210
ROS signaling: the new wave. //Trends in Plant Science, 16, 63–68.
22.
Yan S.H., Zhou H.M.(2006) Role of osmolytes as cheperones during the
refolding of aminoacylase.
Biochem.// Cell Biol., 84, 30-38
SEVERAL UNDERSTANDING OF THE MECHANISMS OF PLANTS’
RESISTANCE
М.H.Mamedova, T.H.Qaragezov
Institute of Molecular biology and Biotechnology , ANAS
*Research Institute of Crop Husbandry
Several mechanisms of plants’ salt tolerance were examined. It is shown
that stress probing and signal components can have a significant role in the
regulation of plant response to salt stress.
BİTKİLƏRİN DAVAMLILIQ MEXANİZMLƏRİNİN BƏZİ
ANLAYIŞLARI
M.H.Məmmədova, T.H.Qaragözov
AMEA, Molekulyar biologiya və biotexnologiya İnstitutu
*Əkinçilik Elmi-Tədqiqat İnstitutu
Bitkilərin duza davamlılığının bəzi mexanizmləri nəzərdən kecirilmişdir.
Göstərilmişdir ki, duz stresində bitkilərin cavab reaksiyasının tənzimlənməsində
stres zondlama və siqnal komponentləri mühüm rol oynaya bilər.
УДК 635:631.147
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КУЛЬТУРЫ ИЗОЛИРОВАННЫХ ТКАНЕЙ И
КЛЕТОК IN VITRO ДЛЯ РАЗМНОЖЕНИЕ ТЕТРАПЛОИДНОЙ
ФОРМЫ АРБУЗА
Т.В.ИВЧЕНКО, Н.А.БАШТАН, Т.К.ГОРОВАЯ
Институт овощеводства и бахчеводства НААН Украины Украина,
62478, Харьковская обл., Харьковский р-н, г. Мерефа, п/о Селекционное, ул.
Овощеводов, 1
Проведенными биотехнологическими исследованиями установлены
параметры способа размножения тетраплоидных форм арбуза в культуре
изолированных тканей invitro. Высокий процент образования адвентивных
побегов (74%) получен при культивировании семядолей ювенильных
211
проростков арбуза на регенерационной питательной среде MS,
модифицированной цитокинином БАП в концентрации 3 мг/л. Использование
без гормональной питательной среды MS для дополнительного размножения
позволило предотвратить образование аномальных растений при
последующем размножении растений-регенерантов тетраплоидных форм и
обеспечило максимальную генетическую стабильность клонированного
материала. Использование питательной среды MS модифицированной 0, 5
мг/л ИУК индуцировало ризогенез у 85 % регенерантов.
Ключевые слова: Citrullus
lanátus
, тетраплоиды, триплоидные
гибриды, клональное размножение, регенерация, укоренение, адаптация
Keywords: Citrullus
lanátus
, tetraploid, triploid hybrids, micropropagation,
regeneration, rooting, adaptation
Açar sözlər: Citrullus lanatus, tetraploid, triploid, hibridlər, klonal
çoxaldılma, regenerasiya, kökəmələgəlmə, adaptasiya
Арбуз столовый (Citrullus lanátus.) - ценный продукт питания, источник
ценных витаминов и лекарственных компонентов, важных для здоровья. В
Украине его выращивают почти во всех естественно климатических зонах на
площади от 60 - 65 тыс. га. В последние пять лет в Украине наблюдается
увеличение объемов производства арбуза, но оно происходит по
экстенсивному типу, за счет увеличения площадей под этой культурой.
Существенно повысить экономическую эффективность выращивания этой
культуры, и обеспечить потребность населения в качественной продукции
бахчеводства, возможно за счет внедрения гибридов, сочетающих в себе
комплекс хозяйственно-ценных признаков (раннеспелость, холодостойкость,
высокую урожайность, высокие вкусовые качества, устойчивость к
фузариозному увяданию и др.). Особенно значительный практический
интерес для производства представляют собой триплоидные гибриды арбуза,
в которых не завязываются семян. Сегодня бессемянный арбуз занимает
большие площади в Японии, США, Индии, Китае, Турции. Главным
преимуществом
триплоидных
гибридов
арбуза
является
высокая
урожайность, которая почти в два раза выше, чем высокие вкусовые
качества.
Согласно традиционной селекционной технологии триплоидные
гибриды создают в результате гибридизации тетраплоидных материнских и
диплоидных родительских линий.
Первым, в разработке метода получения триплоидных гибридов
арбуза, был японский генетик Х. Кихара. Он на базе тетраплоидних форм,
созданных путем полиплоидизация семян колхицином, создал триплоидный
гетерозисный бессемянный гибрид арбуза [1]. Но как показали дальнейшие
исследования выход тетраплоидных проростков после их обработки водным
раствором колхицина составляет от 3% до 15%. Кроме того, в
тетраплоидныхплодах, в первом семенном поколении, завязывается
212
незначительное количество семян, которые характеризуются низкой
энергией прорастания и всхожестью. Поэтому, для преодоления
существующих сложностей, возникающих при размножении тетраплоидных
форм арбуза, во многих селекционных центрах мира используют
биотехнологические методы. Первым такой подход применил M. Сampton
[2], который использовал технологию invitro для выделения из триплоидних
коммерческих гибридов тетраплоидных форм и их размножения путем
индукции адвентивных побегов на регенерационной питательной среде.
Пакистанскими учеными были проведены разработки, по созданию
тетраплоидных форм методом полиплоидизации в культуре invitro [3].
Использование клеточных технологий имеет особенно большие возможности
в растениеводстве, как прием ускорения создания компонентов гетерозисных
гибридов, особенно когда гибридные семена имеют высокую цену. Таким
образом, развитие с коммерческой точки зрения системы клонального
микроразмножения триплоидных и тетраплоидных форм арбуза создает
научные предпосылки для снижения стоимости производства бессемянных
триплоидных гибридов. Об исследованиях по разработке регенерационных
систем для размножения арбуза с использованием семядолей, гипокотилей и
апикальных меристем сообщается в сообщениях Шатурведи и Бхатнагар [4],
М. Камптона и У. Грей [5], Донг и Цзя [6]. Но представленные в этих
публикациях протоколы питательных сред не показывают хорошую
эффективность на генотипах украинской селекции. Цель проведенных нами
исследований – разработка эффективной регенерационной системы для
размножения тетраплоидных форм арбуза в культуре изолированных тканей
invitro.
Исследования
выполнялись
при
использовании
стандартного
биотехнологического
оборудования
согласно
общепринятыми
биотехнологическим методами [7]. Все манипуляции по размножению
растений в культуре in vitro осуществляли в соответствии с ДСТУ 7645-2014
«Культуры овощные. Метод вегетативного размножения». В качестве
донорского материала были использованы тетраплоидные формы арбуза,
созданные нами в 2014-ом году путем обработки семян районированного
сорта Макс плюс в 0,01% растворе колхицина, согласно методике [8]. Перед
введением в культуру in vitro тканей семена тетраплоидных форм замачивали
шесть часов в воде при 30° С. Стерилизацию подготовленного таким образом
материала проводили сначала погружая его в раствор этилового спирта с
массовой долей 70% (на 3-10 секунд), затем в растворе гипохлорита натрия с
массовой долей 1% в течение 25-30 минут. После этого дезинфицирующий
раствор сливали, а растительный материал промывали 5 раз стерильной
дистиллированной водой. Простерилизованные семена высаживали в
пробирки, на поверхности твердой питательной среды ¼ MS [9], для
получения ювенильных проростков. Данная среда MS также была дополнена
витаминами (1 мг / л пиридоксина НСl, 1 мг / л никотиновой кислоты, 1 мг / л
тиамина), 100 мг / л мезо-инозита, 20 г / л сахарозы, 6 г агар-агара. рН среды