Description species Reactivity Human Specificity

---

 

 

 

DESCRIPTION

Species Reactivity

Human

Specificity

 

Detects human A­Raf in direct ELISAs and Western blots. In direct ELISAs, no cross­reactivity with recombinant human (rh) B­Raf, rhRaf­1 

(aa 1­648), rhRaf­1 (aa 189­353), or rhKSR1 is observed. In Western blots, no cross­reactivity with recombinant human (rh) B­Raf or rhKSR1 

is observed. 

Source

Monoclonal Mouse IgG

2B

 Clone # 684128

Purification

 

Protein A or G purified from hybridoma culture supernatant

 

Immunogen

   

E. coli­derived recombinant human A­Raf  

Asn150­Lys314 

Accession # P10398

Formulation

Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in PBS with Trehalose. See Certificate of Analysis for details. 

*Small pack size (­SP) is supplied either lyophilized or as a 0.2 μm filtered solution in PBS.

APPLICATIONS

Please Note: Optimal dilutions should be determined by each laboratory for each application. 

General Protocols

 are available in the Technical Information section on our website.

 

Recommended 

Concentration

Sample

Western Blot

0.5 µg/mL

See Below

DATA 

Western Blot

Detection of Human A­Raf by Western Blot. Western 

blot shows lysates of 293T human embryonic kidney cell line 

and HeLa human cervical epithelial carcinoma cell line. 

PVDF Membrane was probed with 0.5 µg/mL of Human A­

Raf Monoclonal Antibody (Catalog # MAB6607) followed by 

HRP­conjugated Anti­Mouse IgG Secondary Antibody 

(Catalog # 

HAF007

). A specific band was detected for A­Raf 

at approximately 68 kDa (as indicated). This experiment was 

conducted under reducing conditions and using 

Immunoblot 

Buffer Group 1

. 

  

PREPARATION AND STORAGE 

Reconstitution

Sterile PBS to a final concentration of 0.5 mg/mL.

Shipping

The product is shipped at ambient temperature. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below. 

*Small pack size (­SP) is shipped with polar packs. Upon receipt, store it immediately at ­20 to ­70 °C

 

Stability & Storage

Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze­thaw cycles. 

l

12 months from date of receipt, ­20 to ­70 °C as supplied. 

l

1 month, 2 to 8 °C under sterile conditions after reconstitution. 

l

6 months, ­20 to ­70 °C under sterile conditions after reconstitution. 

BACKGROUND 

The Raf serine/threonine kinases are effectors of Ras that function as MAP3Ks in the ERK phosphorylation cascade. Mammals express three Raf proteins: A­Raf, B­

Raf, and Raf­1, also known as C­Raf. Human A­Raf is a 70 kDa protein that shares three regions with B­Raf and Raf­1: aa 14­153 which contains a Ras­binding 

domain, a Cys­rich domain, and a lipid­binding domain; aa 209­223; and aa 308­573 which contains the Ser/Thr protein kinase domain and a second lipid­binding 

domain. A­Raf is activated by phosphorylation at Ser 257, 262, and 264. It then regulates multiple processes including endocytic trafficking, glycolysis, cell cycle 

progression, and apoptosis. Within aa 150­314, human A­Raf shares 87% aa sequence identity with mouse and rat A­Raf. 

   

 

Human A

-

Raf Antibody

 

Monoclonal Mouse IgG

2B

 Clone # 684128

 

Catalog Number:  MAB6607

 

 

Rev. 2/7/2018 Page 1 of 1