edilməsi, tipinin müəyyənləşməsi sə titrləşdirmə üsulunun həya
ta keçirilməsi bu üsul vasitəsilə həyata keçirilir.
İçərisində virusla yoluxmuş toyuq ebrionunun fıbrosplast
hüceyrə kulturası olan mixbər şüşələrinə 0,2 ml xenks məhlu
lunda hazırlanmış 0,4 %-li eritrosit yuyuntusu əlavə edilir. Mix
bər şüşələri çalxalanır və mayedi vəziyyətdə otaq temperatura-
sında və ya soyuducuda 4° S temperaturda saxlanır. Eritrositlərin
hüceyrə ilə kontakt müddəti inkubasiyanını temperaturasından
və virusun növündən asılıdır. Quşların paraqrip virusu üçün otaq
temperaturası şəraitində hemadsorbsiyanın başlanması vaxtı 3-5
dəqiqə bərabər olduğu halda 4° S temperatur şəraitində 30-40
dəqiqə olur. Bu reaksiya hələ yoluxmuş kulturada sitopatik təsir
baş verməkdən əvvəl dəqiq nəticənin əldə edilməsinə imkan
verir. Virusu hemadsorbsiya zamanı eritrositlərin hüceyrələr
səthində möhkəm şəkildə adsorbsiya olunur və 1-2 dəfə yuyun
duqdan sonra belə orada saxlanır. Eritrositlər virusla yoluxmuş
hüceyrə səthlərində xarakterik komalaşma törədir. Paraqrip vi
rusları eritrositlərin diffuz tip aqqlütinasiyasını əm ələ gətirir.
Yoluxmamış hüceyrələrin səthində eritrositlər adsorbsiya olun
mur və sərbəst şəkildə eritrositlər görünüş sahəsində nəzərə
çarpır. Sitopatik təsirin tez meydana çıxması zamanı eritrositlə
rin aqqlütinasiyası daha aydın şəkildə nəzərə çarpır. Hüceyrə
kulturaları mixbər şüşələri 14-20 gün nəzarət altında olur. Reak
siyanın nəticəsi mikroskopun kiçik böyüdücüsü altında yoxlanır.
Hemadsorbsiyanın ləngiməsi reaksiyası spesifik antitellərin yo
luxmuş hüceyrələrin səthi ilə qarışıqlı əlaqədsidir ki, onlar erit-
rositləri adsorbsiya etmək qabiliyyətini itirmir. Bu reaksiya yal
nız hemadsorbsiya hadisəsini törədən virusların identifıkasiya
üçün tətbi olunur. Bu məqsədlə hüceyrə kulturasının inkubasiy-
asın sonra hemadsorbsiyanın yaranmasını təmin edən vaxt ər
zində mixbər şüşələrindən saxlayıcı mühit kənar edilir və kultu-
ra Xenks məhlulu ilə yuyulur. Sonra mixbər şüşələrinin bir his
82
səsində 0,2 ml duaıdulmamış və ya l:10-də duruldulmuş spesi
fik serum və 0,6-0,8 ml Xenks məhlulu tökülür. Otaq tempera-
turası şəraitində 15-30 dəqiqəlik kontaktdan sonra mixbər şüşə
lərinin hamısına 0,2 ml eritrositlərin 0,4 %-li yuyuntusu əlavə
edilir. Mixbər şüşələrini maili vəziyyətdə otaq temperaturası şə
raitində 3-5 dəqiqə saxlayıb çalxaladıqdan sonra nəticəsi yoxla
nır. Əgər serumlu mixbər şüşələrində hemadsorbsiya yoxdursa,
nəzarət m ixbərlərində isə bu aydın şəkildə nəzərə çarpırsa,
reaksiya müsbət hesab edilir.
Koaqqlütinasiva reaksiyası. Bu reaksiyadan əsasən quşların
şiş xəstəliklərinin və qripin diaqnostikası üçün istifadə edilir.reak-
siyanın mahiyyəti qızılı stafılokokkların A zülalının ada dovşanla
rı və hind donuzlarının spesifik antigenlə immunizasiya yolu ilə
alınmış hiperimmun serumun Fc - fraqmenti ilə birləşməsidir.
Reaksiya 4 mərhələ üzrə qoyulur: 1) Qızılı stafılokokkun 10%-
li fəal yuyuntusunun əldə edilməsi; 2) Qızılı stafılokokk yuynu-
sunda A zülalının miqdarının stabilləşdirilməsi. Stabilləşmə 2
üsulla, onu 4-6° S temperaturda saxlamaqla və liofılizasiya yolu
ilə həyata keçirilir; 3) Stafılokokk reagentinin sensibilizasya
üçün tətbiq olunan hiperimmun serumun alınması; 4) Reaksiya
nın qoyulması və nəticəsinin yoxlanması.
Qızılı stafılokokkun yuyuntusunu almaq üçün A zülalın pro-
dusenti kimi St. aureis götürülür. Bu ştamın bir günlük aqar kul-
turasım maye peptonlu maya mühitinə əkib 12-14 saat ərzində
şyuttel-aparatda dəqiqədə 100 təkan rejimində yetişdirirlər. Sta-
filokokk yuyuntusunu 15 dəqiqə ərzində sentrifuqadan keçir
məklə çökdürür və 2 dəfə fosfat-bufer məhlulunda yuyurlar. Sonra
fosfat-bufer məhlulunda 10 %-li stafılokokk yuyuntusu hazırla
nır və 1 %-li formaldehid məhlulu ilə təsbit edilir. Daimi qarış
dırma şəraitində təsbitin müddəti 3 saatdır. Daha sonra stafılo-
kokk yuyuntusu 4 dəfə fosfat-bufer məhlulunda yumaqla for-
ınaldehiddən təmizləyirlər. Suspenziyanı 10 %-li konsentrasi-
83
yayadək duruldub 80° S temperaturda 1 saata qədər isitmək onun
patogelik aktivliyini aşağı salırlar. Bundan sonra qarışıq yenidən
yuyulur, üzərinə natrium-meriolyat əlavə edilir. Bu qarışığı 4-6°
S temperaturda saxlamaq və ya liofılizasiya etmək olar.
Stafılokokk kulturasını 7-10 dəqiqə ərzidə quru buzla spirt
qarışığında liofılizasiya edir, sonra tez bir şəkildə dondurucu ka
meraya keçirir və mənfi 30-40° S-də 4 saat saxlayırlar, daha so
nra isə 24-25°S temperaturaya malik olan quruducu aparata keçi
rirlər. Flakonda qurudulmuş qarışıq rezin tıxacla bağlanır və me
tal kalpakla örtülür.
A - zülalının bioloji aktivliyi liofılizasiya qurtardıqdan və
sonra isə işin bütün dövrlərində yoxlanır. 1:2000 və yuxarı titrli
A zülalı aktiv hesab edilir. Stafılokokk preparatının aktivliyi va-
sitəsiz hemaqqlütinasiya reaksiyası ilə yoxlanır.
Sensibilizasiyalı eritrositlərin aydın nəzərə çarpan aqqlütina-
siyası müşahidə edilən maksimal durultma A zülalın titri hesab
edilir. Bu qayda üzrə işlənmiş qızılı stafılokokk hüceyrələri sta-
fılokokklu reakgent adlanır.
Quşların leykoz-sarkoma və ya qrip virusuna spesifik hipe-
rimmun serum almaq üçün ev heyvanları seçilir ki, onların 1 lq G
A zülalı ilə yaxın olsun, bu cəhətdən itin və hind donuzlarının
immunoqlobulinləri daha aktivdir.
Hiperimmun serum ciddi şəkildə spesifik olmalıdır, yəni di
gər kompanentlərə qarşı antitel qeyd olunmamalıdır.
Koaqqliitinasiya reaksiyasının birinci mərhələsi tədqiq olu
nan viruslu materialdan kənar bioloji kompanentlərin təm izlən
məsini təmin edir. Bu məqsədlə adsorbsiyadan istifadə edilir.
Tədqiq olunan materiallar 10 %-li stafılokokk reagentinin bəra
bər həcmdə miqdarı qarışdırılır, 5-10 dəqiqə ərzində 370 S tem
peraturda inkubasiya edilir və sonra sentrifuqadan keçirilir.
Çöküntü üstündəki maye götürülür və bunun üzərinə həmin
miqdarda 10 %-li stafılokokk reagenti əlavə edilir. Belə əm ə
84
liyyat yenidən əvvəlki qayda üzrə təkrar edilir.
Koaqqlütinasiya reaksiyası yağsızlaşdırılmış əşya şüşəsi
üzərində qoyulur. Bu məqsədlə 1 damla yoxlanan meterial və 1
damla koaqqlütinasiya verən reagent götürülüb bir-birinə qarış
dırılır. Reaksiyanın nəticəsi 2-3 dəqiqə intensiv qarışdırmadan
sonra mütləq qara fonda vizual olaraq yoxlanır. Reaksiyanın nə
ticəsi 3 balla qiymətləndirilir.
+++ /
Ф
/ - qarışığın aydın şəkildə nəzərə çarpan şəffafla-
ması:
++ /
^
/ - qarışığın şəffaflanması;
+ - zəif şəffaflanma,
- şəffaflanma olmur.
Bu reaksiya istənilən baytarlıq laboratoriyasındakı qoyula bi
lər və üstünlüyü yüksək dərəcədə səmərəlili, spesifikliyi, qoyul
masının sadəliyi ilə səciyyələnir.
Q uşların infeksion xəstəliklərinin nom enklaturası
və təsnifatı.
Quşların hər hansı bir xəstəliyi təkamülcə yaranmış nozolo-
ji vahid olub, spesifikliyi onu törədən mikrobun növü ilə təyin
edilir. Xəstəlikərin düzgün təsnifatı və nomenklaturası onların
öyrənilməsində böyük əhəmiyyətə malikdir.
Nomenklatura /latınca - nomenklatura - siyahı/ hər hansı bir
elm sahəsində istifadə olunan terminlərin adlandırılınasının cə
minə deyilir.
Təsnifat - klassifıkasiya /latınca klassis - dərəcə və faciodüz-
lədirəm/ uyğun xəstəliklərin qruplaşdırmasından ibarətdir. De
məli, nomenklatura yalnız termenlərin adlandırılması olduğu
halda, təsnifat xəstəliklərin elmi əsaslarla qruplaşdırılması kimi
başa düşülür.
Xəstəliklərin ümumi təsnifatı aşağıdakı 4 saylı sxemdə gös
85
Dostları ilə paylaş: |