Koh ve embriyo kalitesi Dr. Kemal ÖZGÜR

KOH ve embriyo kalitesi

• Dr. Kemal ÖZGÜR

1. KOH: Temmuz 2008

2. KOH=Kasım 2008

Plan

• Embriyo kalitesi tanımı

• Agonist ve antagonist siklusları

• HMG ve FSH siklusları

• LH katkısı

• Follikül çaplarının katkısı

• Coasting katkısı

• Mild stimulations vs harsh (dozun katkısı)

EQ; Cleavage stage embryos

• Cleavage rate

• Cell number

• Cleavage symmetry

• Cytoplasmic fragmentasyon

• Multinucleation

• Zona pellucida structure

• Cell-cell contact

• Cytoplasmic organization

Cleavage hızı

• 1st cleavage: 25-27 hr post insemination: Avantajlı implantasyon.

• D2-4 cells (Ziebe et al 1997, Giorgetti et al. 1995)

• D3: 7-9 cells (Gerris et al. 1999, Van Royen et al 1999, 2001)

• Hızlı cleavage: yüksek mozaisizm ve polyspermic fertilizasyon

Hücre boyut ve simetrisi

• Zayıf foll gelişim=(Goyannes et al(1990) eşit boyutta olmayan blastomerlerde total blastomer volümünün % 8 daha az olduğunu buldu. (Pronucl evredeki volümden farklı olmayacağı için zayıf folliküler gelişimden kaynaklanacağını iddia etmiş)

• Spindle asimetrisi de yol açabilir.

• Fragmantasyonla sitoplazma kaybı

• Cytokynesis-karyokinesis ilişkisinin bozulması-(dominant multinukleate blastomer ve bölünen diğerleri)

Multinukleasyon

• Mekanizma: sitokinesis olmadan karyokinesis; nukleus fragmantasyonu; anafaz sırasında kromozomların anormal migrasyonu (Tesarik et al. 1987, Winston et la 1991, Hardy et al.1993)

• 2 hücreli embriyolarda daha fazla (Blaiker ve Cadesky 1997)

• D2 ve d3 embriyolarda varlığı ileri derecede mozaisizm ve FISH de polyploidi (Kigman et al 1996)

• Staessemn ve Van Steirrteghem (1998) 2 cell stage multinukleasyon yarısı normal diploid olup geçici ve reversibl fenomen olabileceğini iddia etmişler.

Zona Pellucida yapısı

• ZP embriyo gelişiminde incelme

• Kalınlığı embriyo doğal hatching yetisini belirliyor (Cohen et al 1989)

• Hücre sayısı, embriyo grade, ileri maternal yaş, fragmentasyon oranı ile kalın zona arasında anlamlı korelasyon (Garsida et al 1997).

Cell-cell contact

• Cell-cell contact hücre adezyon moleküllerinin expresyonuna yol açar

• Arrest olan fare blastomerlerini arrest olmayanları ile agregasyon yaptırması tekrar gelişme yeteneğini kazanmasına yol açtı. (Neganova et al 2000)

• Sitoplazmik fragmantasyon interselüler aralıkları doldurarak bozabilir.

Cytoplasmic integrity

• Çok sayıda intrasitoplazmik vakuol veya şiddetli hücre kontraksionu = muhtemel dejenaratif süreç

• Buna karşın özellikle d3 embriyolardaki veziküler görünüm genomik aktivasyon sinyali?

• Vezikulasyon ile gebelik pozitif korele (Desai et al 2000)

Sitoplazmik fragmantasyon

• Erken evre embriyolarda sıkça görülen bir durum: Bir cohort grubu içinde bütün embriyoları-bir kısmını alabilir.

• “cell division without nuclear division” ( Edwards RG, Steptoe PC, Purdy JM. Fertilization and cleavage in vitro of preovulator human oocytes. Nature. 1970)

• Çoğu ilk cleavage’da.

• Fragmantasyonun klinik gebelik oranın düşürdüğü ilk olarak 1987 de gösterilmiş. (Puissant F et al. Hum Reprod 1987 Nov;2(8):705-8 Embryo scoring as a prognostic tool in IVF treatment.

Fragmantasyon ve IVF outcome

• Saint Barnabas grubu EggCyte database. (1999 Fert& Sterility 2410 hasta retrospective analiz).

Mekanizma ?

• Apopitosis (programlı hücre ölümü) ?

• İzole tek hücre sorunu

• Enflamasyon yok

Başarıyı etkileyen parametre?

661 women

• 661 women

• elective single embryo transfer or double embryo transfer

• cycles with 0 or 100% ongoing implantation (n 5 520) were analysed

KOH da antagonist kullanımının etkisi?

HMG vs rec FSH?

Ongoing pregnancy was the primary end-point [HPhMG 27% and rFSH 22%; odds ratio (OR) (95% confidence interval, CI) 1.25 (0.89-1.75)].

• Ongoing pregnancy was the primary end-point [HPhMG 27% and rFSH 22%; odds ratio (OR) (95% confidence interval, CI) 1.25 (0.89-1.75)].

• The live birth,ongoing pregnancy and ongoing implantation rates for top-quality embryos were higher with HP-hMG than rFSH [48 versus 32% (P 5 0.038), 48 versus 32% (P 5 0.038), 41 versus 27% (P 5 0.032)].

• the proportion of embryos with at least 50% surviving blastomeres after cryopreservation and embryos resuming mitosis were more frequent with HP-hMG compared with rFSH.

Mild vs harsh stimulasyon?

LH eklenmesi?

Follikül çapları?

Oosit maturasyonun katkısı?

Antalya IVF

• 740 ICSI-ET yapılan sikluslar ele alındı

• Pick-up sonrası denudasyon ve M2, M1, ICSI

• Day 2 transferi

• M2 oosit/toplam oosit oranına göre gruplar değerlendirildi

Sonuçlar

• Embriyo kalitesini tanımlayan morfolojik özellikler başarıyı etkilemektedir.

• Agonist - antagonist siklusları – recLH eklenmesi arasında başarıyı etkileyen farklılıklar bulunmamaktadır

• Coasting süresi uzadıkça outcome olumsuz etkilenmektedir.

• Mild stimulation ile daha az oosit üretilmektedir.

• HMG ve FSH sikluslarında farklılık olabileceğini gösteren çalışmanın tek olması sonucu netleştirememektedir.

• Follikül çapları optimum düzeylerde daha olgun ve muhtemel daha kaliteli embriyo üretmektedir. Oosit olgunlaşma oranı stimulasyon kalitesini yansıtan anlamlı bir parametre olup ilerleyen çalışmalara ihtiyaç vardır.