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Doc9.11 

Medium 154  

Catalog Number: M-154-500 

500 ml 


Instructions

 for storage and use 

Product

 

Description

 

Medium 154 is a sterile, liquid tissue culture medium prepared 

with 200 µM calcium chloride for the growth of normal human 

epidermal  keratinocytes.    This  medium  is  intended  for  use  as 

one  component  in  a  complete  culture  environment.    Medium 

154 is a basal medium containing essential and non-essential 

amino  acids,  vitamins,  other  organic  compounds,  trace 

minerals,  and  inorganic  salts.    This  medium  does  not  contain 

antibiotics, antimycotics, hormones, growth factors, or proteins.  

This  medium  is  HEPES  and  bicarbonate  buffered  and  is 

designed  for  use  in  an  incubator  with  an  atmosphere  of  5% 

CO

2



/95%  air.  To  support  plating  and  long-term  proliferation  of 

normal  human  keratinocytes,  Medium  154  must  be 

supplemented  with  Human  Keratinocyte  Growth  Supplement 

(HKGS,  Cat.  S-001-5)  or  Human  Keratinocyte  Growth 

Supplement Kit (HKGS Kit, Cat. S-001-K).  

Intended Use 

Medium 154 is intended for use in the routine culture of normal 

human  epidermal  keratinocytes.    When  supplemented  with 

HKGS  or  HKGS  Kit,  Medium  154  will  support  the  plating  and 

proliferation  of  keratinocytes  at  varying  culture  densities  from 

clonal  (25  cells/cm

2

)  to  high  density  (8  x  10



4

  cells/cm

2

).    


Additional applications for use may include primary isolation of 

keratinocytes from skin, and clonal growth assays.  For optimal 

results  when  performing  primary  isolations,  Medium  154 

should be used in conjunction with Coating Matrix Kit (Cat. R-

011-K). 

 

This  product  is  for  research  use  only.    Not  for  use  in 



animals, humans, or diagnostic procedures

.

 

Caution:  If handled improperly, some components of this 

product  may  present  a  health  hazard.    Take  appropriate 

precautions  when  handling  this  product,  including  the 

wearing  of  protective  clothing  and  eyewear.    Dispose  of 

properly. 

Storage and Stability 

Medium  154  is  stored at  4°  C  in  our  facility  and  is shipped at 

ambient  temperature.    Upon  receipt,  the  medium  should  be 

stored at 4° C and should not be frozen.   Protect from light.  

Several  components  of  this  tissue  culture  medium  are  light-

labile, and we recommend that the medium not be exposed to 

light for lengthy periods of time.  If the medium is warmed prior 

to use, do not exceed 37° C.  When stored in the dark at 4° C, 

the product is stable until the expiration date on the label. 

Please  use  the  supplementation  instructions  (page  2)  to 

prepare the medium for use. 

 

 

 

800-955-6288  techsupport@invitrogen.com  www.invitrogen.com



 


 

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Doc9.11 

 

Preparation of Supplemented Medium 154 



Note: For information on HKGS or HKGS Kit, please refer to 

the product sheet that accompanies those products. 

1.  Thaw  the  frozen  components  of  the  HKGS  Kit,  or  one 

bottle of HKGS according to the instructions provided with 

those  products.    Make  sure  that  the  caps  of  all  of  the 

bottles are tight.  Gently swirl the bottle(s) of supplement.  

Avoid  splashing  the supplement  into the  cap  of  the  bottle 

or causing the supplement to foam. 

2.  Wipe  the  outside  of  the  containers  with  a  disinfecting 

solution such as 70% ethanol or isopropanol. 

3.  To add the HKGS, transfer the entire contents of the bottle 

of  supplement  to  the  bottle  of  medium  using  sterile 

technique  in  a  laminar  flow  culture  hood.    To  add  the 

HKGS Kit, transfer the desired amount of each component 

of  the  HKGS  Kit  to  the  bottle  of  medium  using  sterile 

technique in a laminar flow culture hood.  Note: addition of 

less than the entire amount of any component may affect 

the  performance  of  the  supplemented  medium.    If 

antibiotics/antimycotics 

are 

desired, 



add 

the 


antibiotic/antimycotic  solution  included  in  HKGS  Kit  using 

the same technique as above. 

4.  Tightly  cap  the  bottle  of  supplemented  medium  and  swirl 

the  contents  to  ensure  a  homogeneous  solution.    Avoid 

causing the medium to foam. 

Storage and Stability of Supplemented Medium 154 

Once  Medium  154  has  been  supplemented  with  HKGS  or 

HKGS  Kit,  the  supplemented medium should  be  stored  in  the 

dark  at  4°  C  and  should  not  be  frozen.    When  stored  in  the 

dark at 4° C, the supplemented medium is stable for 1 month. 

Selected References 

The  Medium  154  formulation  is  based  on  medium  MCDB  151,  with 

trace  elements  as  in  medium  MCDB  104,  and  the  high  amino  acid 

modifications of Pittelkow. 

Cook, Pittelkow, and Shipley; J. Cell. Physiol. 146:277-289, 1991 

Peehl and Ham;  In Vitro 16:  526-540, 1980 

McKeehan et al.; In Vitro 13: 399-416, 1977 

Pittelkow and Scott; Mayo Clin. Proc. 61: 771-777, 1986

 

 

 



 

 

 



 

 

 



 

 

 



 

 

 



Terms and Conditions of Sale 

Cascade  Biologics,  Inc.  (hereinafter,  CBI)  warrants  that  its  products  will  perform  according  to  the  information  provided  in  various  publications  that  it 

distributes, and as described herein for the intended shelf life of the product when stored under the conditions prescribed by CBI.  If any product does 

not perform according to the published information provided by us, CBI will replace the product free of charge to the original customer.  The remedy of 

product replacement shall be the customers' sole and exclusive remedy for defective product, unless CBI is unable to deliver replacement product, in 

which  case  CBI  shall  reimburse  the  customer  for  the  purchase  price  of  the  defective  product.    Customer  understands  that  the  foregoing  limited 

warranty is in lieu of all other warranties and CBI hereby disclaims all other warranties including, but not limited to, implied warranty of merchantability 

or  fitness  for  adequacy  for  any  particular  purpose  or  use.    CBI  shall  not  be  liable  to  customer  or  to  any  party  claiming  through  customer  for  any 

incidental or consequential damages, including, but not limited to any lost profits, lost savings, or lost business, whether arising out of contract, tort, or 

otherwise.    Customer  acknowledges  that  products  are  intended  for  research  use  only  and  are  not  to  be  used  in  animals,  humans,  or  diagnostic 



procedures. 


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