Bab iii-perkembangan limfosit



Yüklə 167,7 Kb.
Pdf görüntüsü
tarix17.01.2018
ölçüsü167,7 Kb.
#21450


 

15

BAB III 



PERKEMBANGAN

PERKEMBANGAN

PERKEMBANGAN

PERKEMBANGAN    SEL

SEL

SEL


SEL    LIM

LIM


LIM

LIMFO


FO

FO

FOSIT



SIT

SIT


SIT    

 

 



Kebanyakan sel limfosit menempati suatu organ yang disebut 

organ  limfoid.  Pada  organ  ini  terjadi  interaksi  antara  sel-sel  limfosit 

dengan sel-sel non-limfosit. Interaksi ini memiliki fungsi yang sangat 

penting baik bagi perkembangan limfosit itu sendiri maupun sebagai 

titik  awal  adaptasi.    Organ  limfoid  secara  garis  besar  dapat  dibagi 

menjadi  dua  bagian.  Pertama  disebut    sentral  atau  organ  limfoid 

primer dan kedua disebut periferal atau organ limfoid sekunder. Sel-

sel limfosit dihasilkan oleh organ limfoid primer yang pada gilirannya 

akan menuju ke organ limfoid sekunder. Pada organ limfoid sekunder 

sel-sel  limfosit  dijaga  untuk  tetap  hidup  dan  pada  organ  limfoid 

sekunder  pula  sel-sel  limfosit  mengalami  adaptasi  akibat  adanya 

antigen  yang  masuk  ke  dalam  tubuh.  Yang  termasuk  organ  limfoid 

primer  adalah  sumsum  tulang  dan  timus,  sedangkan  yang  termasuk 

organ  limfoid  sekunder  di  antaranya  adalah  spleen,  lymph  node, 

Peyer’s patch, appendix, adenoid, dan tonsil. Baik limfosit B maupun 

limfosit T berasal dari sumsum tulang, namun hanya limfosit B yang 

mengalami  pemasakan  pada  sumsum  tulang.  Limfosit  T  melakukan 

migrasi dari sumsum tulang menuju organ timus sebelum masak dan 

mengalami  pemasakan  pada  organ  ini.  Limfosit  tersebut  disebut 

limposit B dan T, karena berturut-turut mengalami proses pemasakan 

pada  bone  marrow  (sumsum  tulang)  dan  thymus  (timus).  Limfosit 

yang  telah  mengalami  pemasakan  pada  organ  limfoid  primer  segera 

memasuki  peredaran  darah  untuk  menuju  organ  limfoid  sekunder. 

Organ  limfoid  sekunder  merupakan  organ  limfoid  periferal  tempat 

terjadinya  penangkapan  antigen  oleh  sel-sel  imunokompeten.  Pada 

organ  limfoid  periferal  ini  imunitas  adaptif  dimulai.  Pada  setiap  saat 

tubuh  kita  selalu  berhadapan  dengan  patogen  yang  masuk.  Patogen 

memasuki  tubuh  kita  dengan  berbagai  cara,  misalnya  dari  makanan, 

minuman,  udara,  dan  luka.  Antigen  dan  limfosit  akhirnya  akan 



 

16

bertemu pada organ limfoid periferal yaitu pada lymph node, spleen, 



dan  jaringan  limfoid  mukosa.  Pada  organ  limfoid  periferal  inilah 

sebenarnya dimulainya imunitas adaptif. Pada organ limfoid periferal 

sel-sel  tertentu  yang  dikenal  dengan  nama  antigen  presenting  cell  (APC) 

seperti  makrofag,  sel  dendritik,  dan  sel  B  akan  mempresentasikan 

antigen  dalam  bentuk  peptida.  Peptida  dipresentasikan  pada 

permukaan  APC  dalam  keadaan  terikat  oleh  MHC.  Limposit 

mengenali antigen yang terikat oleh MHC itu.  

 

Gambar  12.  Perkembangan  Limfosit  Pada  Mencit  Berumur  7  Minggu 

Dianalisis  Dengan  Flow  Cytometry.  A)  Analisis  pada  organ  timus  dengan 

menggunakan  double  staining  memakai  antibodi  anti-CD4  yang  dilabel  dengan 

FITC,  dan  antibodi  anti-CD8  yang  dilabel  dengan  PE.  Pada  analisis  ini 

diketahui  bahwa  pada  tahap  perkembangan  di  dalam  timus  limfosit 

mengekspresikan  protein  CD4

+

CD8



+

  sehingga  pada  awal  perkembangan  ini 

disebut sel T doble positive. B) Analisis pada organ limfa (spleen) dengan metode 

yang sama dengan yang dilakukan pada timus. Pada tahap ini diketahui bahwa 

sel  T  telah  terdiferensiasi  menjadi  CD4

+

  atau  CD8



+

  sehingga  pada  tahap  ini 

disebut  sel  T  single  positive  (mature).  Pada  gambar  ini  setiap  titik  pada  panel 

menunjukkan  satu  sel  yang  terdeteksi  oleh  mesin  Flow  Cytometry.  Analisis 

dilakukan dengan menggunakan software CELLQUEST. 

 

Organ Lymph Node. 

Organ  ini  tersebar  dalam  tubuh  sebagai  titik  simpul  dari 

sistem pembuluh limfa. Lymph merupakan cairan ekstraselluler yang 

secara  kontinyu  diatur  keberadaannya  dalam  tubuh.  Lymph 

merupakan  carian  yang  berasal  dari  filtrasi  darah.  Lymph  yang 



 

17

menumpuk  pada  jaringan  dan  tidak  segera  memasuki  pembuluh 



limfa,  akan  menimbulkan  kebengkaan  jaringan  yang  dikenal  dengan 

istilah  adema.  Lymph  akan  dibawa  masuk  ke  jaringan  lymph  node 

melalui  sistem  limfa.  Lymph  masuk  ke  organ  lymph  node  melalui 

pembuluh  limfa  afferent.  Cairan  lymph  tersebut  membawa  antigen 

dari  jaringan  yang  terinfeksi  dan  juga  APC  yang  telah  membawa 

berbagai  macam  antigen.  Lymph  juga  berperan  membawa  kembali 

limfosit  ke  luar  dari  lymph  node  ke  dalam  sirkulasi  darah.  Di  dalam 

organ  lymph  node  sel  B  menempati  daerah  folikel,  sedangkan  sel  T 

menempati  terutama  daerah  parakortikal.  Folikel  sel  B  meliputi 

daerah  yang  disebut  germinal  center.  Pada    germinal  center  inilah  sel  B 

mengalami proliferasi setelah  menerima signal dari sel T. 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Gambar  13.  Organisasi  lymph  node. 

Lymph  node  terdiri  atas  bagian  kortek 

dan  medula.  Kortek  terbagi  dua  bagian. 

Bagian  pertama  merupakan  bagian  luar 

yang  banyak  didiami  oleh  sel  B  yang 

menempati suatu folikel, dan kortek dalam 

(paracortical)  banyak didiami oleh  sel T  dan 

sel  dendritik.  Ketika  terjadi  respon  imun 

oleh  adanya  antigen,  beberapa  folikel 

folikel limfoid sekunder

(dengan germinal center)

pembuluh limfa afferent

daerah paracortical

(sebagian besar sel T)

germinal center

folikel limfoid primer

(sebagian besar sel B)

medula cord (sebagian

besar makrofag

dan sel plasma)

medula sinus

arteri


vena

pembuluh limfa

efferent

sinus marginal

germinal center

senescent



LYMPH NODE


 

18

menunjukkan  froliferasi  sel  B  yang  sangat  cepat  yang  terjadi  pada  pusat 



germinal  (germinal  center)  yang  disebut  folikel  limfoid  sekunder.  Reaksi  ini 

sangat menyolok namun akhirnya terhenti sebagai germinal center senescent. Cairan 

ekstraselluler  mengiring  antigen  yang  dibawa  sel  dendritik  maupun  makrofag 

dari jaringan memasuki pembuluh limfa dan masuk menuju lymph node melalui 

pembuluh  limfatik  afferent.  Cairan  lymph  meninggalkan  lymph  node  melalui 

pembuluh  limfatik  efferent.  Limfosit  naive  memasuki  lymph  node  dari  aliran 

darah  melalui  venula  postcapilary  yang  khusus  dan  meninggalkannya  melalui 

pembuluh limfatik efferent (sumber: Janeway, 2001) 



 

saluran limfa

sumsum tulang

appendix


usus besar

ginjal


Peyer’s patch pada usus kecil

spleen / limfa

saluran thoracic

jantung


timus

vena subclavian kiri

vena subclavian kanan

adenoid


tonsil

lymph node

 

Gambar  14.  Penyebaran  jaringan  limfoid  pada  tubuh  manusia.  Limfosit 

berasal  dari  sel  tunas  dari  sumsum  tulang,  dan  berdiferensiasi  pada  organ 

limfoid sentral. Organ limfoid sentral dapat berupa timus dan sumsum tulang. 

Sel T berdiferensiasi pada timus dan sel B berdiferensiasi pada sumsum tulang. 

Sel-sel limfosit bermigrasi dari organ sentral menuju sirkulasi darah dan dibawa 

menuju  organ  limfoid  sekunder  atau  disebut  organ  limfoid  periferal.  Yang 

termasuk  organ  limfoid  sekunder  itu  adalah:  lymph  node,  spleen,  limfoid 

mukosa,  Payer’s  patches,  dan  appendix.  Organ  limfoid  periferal  merupakan 




 

19

tempat  terjadinya  aktivasi  limfosit  oleh  antigen.  Limfosit  keluar-masuk 



pembuluh  darah  dan  organ  ini  sampai  menemukan  antigen.  Pembuluh  limfa 

menarik  cairan  ekstraselluler  dari  jaringan  periferal  melalui  lymph  node  dan 

masuk  pada  thoracic  duct  (duktus  thoracic),  dan  mencurahkan  cairan  yang 

dibawa  itu  masuk  dalam  vena  subclavian  kiri.  Cairan  yang  berasal  dari 

ekstraselluler  itu  disebut  lymph,  yang  membawa  antigen  menuju  lymph  node 

dan  membawa  kembali  limfosit  dari  lymph  node  menuju  ke  sirkulasi  darah. 

Jaringan  limfoid  juga  berasosiasi  dengan  mukosa  contohnya  yang  terletak 

sepanjang saruran bronkus pada paru. 



 

Organ Limfa (Slpeen). 

Spleen  terletak  di  belakang  lambung.  Organ  ini  bertugas 

mengumpulkan  antigen  dari  darah  dan  juga  mengumpulkan  dan 

menghancurkan  darah  merah  yang  telah  kehilangan  fungsi.  Sebagian 

besar organ spleen terdiri dari daerah yang disebut pulpa merah. Pada 

pulpa  merah,  darah  merah  yang  telah  tua  dihancurkan.  Pada  spleen 

terdapat daerah yang disebut pulpa putih. Pulpa putih adalah tempat 

berkumpulnya sel B yang berasal dari arteri di sekitarnya. Pada pulpa 

putih  terdapat  daerah  tertentu  tempat  berkumpulnya  sel  T  yaitu 

daerah yang disebut periarteriolar lymphoid sheath (PALS). 

 

 

 



 

 

 



 

 

 



 

 

 



 

kapsula


pulpa merah

pulpa putih

trabekula vena

trabekula arteri

sinus venosus

zona marginal

corona sel B

germinal center 

PALS

(sebagian besar sel T) 



arteriola center

sinus marginal

pulpa merah

IRISAN TRANSVERSAL PULPA PUTIH

IRISAN LONGITUDINAL PULPA PUTIH



 

20

Gambar 15. Organisasi jaringan limfoid, spleen. Spleen (limfa) terdiri dari 

bagian  yang  disebut  pulpa  merah.  Pada  tempat  ini  terjadi  penghancuran  sel 

darah merah yang sudah tua. Pulpa merah berselang-seling dengan pulpa putih. 

Limfosit  dan  sel  dendritik    yang  membawa  antigen  datang  bersama  pada 

periarteriolar  sheath.  Pada  setiap  pulpa  putih,  darah  yang  membawa  limfosit 

dan  antigen  mengalir  dari  arteri  trabekula  masuk  ke  arteri  sentral.  Sel  dan 

antigen kemudian masuk ke dalam sinus dan berlanjut menuju vena trabekula. 

Sinus marginal dikelilingi oleh zona marginal limfosit. Di dalam sinus marginal 

dan  di  sekeliling  arteri  sentral  terdapat  periarteriolar  lymphoid  sheath  (PALS), 

yang  tersusun  oleh  sel  T. Folikel  didominasi oleh  sel  B, pada  folikel  sekunder 

germinal  senter  dikelilingi  oleh  korona  sel  B.  Meskipun  susunan  spleen  dan 

lymph  node  mempunyai  persamaan,    namun  antigen  yang  masuk  ke  spleen 

lebih banyak berasal dari darah daripada dari cairan ekstraselluler (lymph). 

 

seleksi positif



seleksi negatif

aviditas


keberhasilan

seleksi


sel T regulator

terabaikan

 

Gambar  16.  Seleksi  penghapusan  sel  T  autoreaktif  terjadi  saat  awal 

perkembangan  sel  T  pada  organ  timus  melalui  ikatan  komplek    self-

MHC:self-antigen.  Sel  T  yang  mengenali  self  antigen  dengan  aviditas  sangat 

kuat akan mengalami seleksi negatif, negative selection. Sel yang mempunyai sifat 

demikian  ini  akan  membahayakan  tubuh  jika  lolos  dari  seleksi  negatif  karena 

mempunyai  daya  serang  terhadap  komponen  tubuh  sendiri.  Sel  T  yang  sama 

sekali  tidak  mengenali  self-antigen    akan  diabaikan  dan  tidak  diperlukan  dalam 

tubuh. Sel tersebut akan mengalami seleksi negatif dengan istilah “neglect”. Sel 

yang  sama  sekali  tidak  mengenali  self-antigen  jika  dibiarkan  hidup  tidak 

mempunyai  peran  pada  sistem  imun  karena  sel  tersebut  tidak  mampu 

berproliferasi  pada  tahap  stimulasi.  Hanya  sel  T  yang  mempunyai  aviditas 

menengah yang dipertahankan tetap hidup dalam sistem imun. Sel inilah yang 

menjadi komponen utama pada sistem imun normal. Sel T yang lolos seleksi ini 

selanjutnya  terdiferensiasi  menjadi  dua  sub  besar  yaitu  sel  T  CD4  dan  sel  T 

CD8.  Sel  T  CD4  sering  dikenal  dengan  istilah  sel  T  helper,  sedangkan  sel  T 

CD8 dikenal dengan istilah sel T killer (sitotoksik). Adapun sel T yang mengikat 

self-antigen  dengan  aviditas  yang  sangat  kuat  namun  tidak  sampai  pada  tahap 

eliminasi  (negative  selection)  akan  menjadi  sel  T  regulator  (T

reg

)  yang  sangat 



penting  untuk  menghambat  terjadinya  autoreaktif  dari  sel-sel  yang  lolos  dari 

negative  selection.  T

reg

  ini  selanjutnya  diketahui  memiliki  peran  yang  sangat 



penting untuk menghambat terjadinya penyakit autoimun. 


 

21

Gut-Associated Limfoid Tissue (GALT). 

GALT  adalah  organ  limfoid  mencakup  adenoid,  tonsils, 

appendix, dan Peyer’s patches pada usus halus. GALT ini mempunyai 

tugas  mengumpulkan  antigen  yang  berasal  dari  daerah  pencernakan. 

Payer’s  patches  merupakan  GALT  yang  paling  besar  peranannya. 

Pada    Payer’s  patches,  antigen  dikumpulkan  oleh  sel  epitel  khusus 

yang disebut multi-fenestrated  atau sel M. Limfosit membentuk folikel 

tersusun atas sel B  yang sangat rapat yang dikelilingi oleh sedikit sel 

T. Lymph node, spleen, dan  limfoid mukosa merupakan organ yang 

berbeda  namun  semua  organ  ini  memiliki    tugas  yang  sama.  Semua 

organ tersebut mempunyai tugas mengumpulkan  antigen dari daerah 

infeksi  yang  selanjutnya  akan  dikenali  oleh  sel-sel  limfosit  untuk 

dimulainya  simtem  imunitas  adaptif.  Organ  limfoid  periferal  juga 

mempunyai peran memberikan signal transduksi kepada limfosit yang 

tidak  menemukan  antigen  agar  tetap  hidup.  Limfosit-limfosit  yang 

belum  menemukan  antigen  itu  akan  mengadakan  sirkulasi  ke  dalam 

peredaran  darah  sampai  menemukan  antigen  yang  spesifik. 

Pemberian signal transduksi terutama oleh sel-sel stroma dalam organ 

limfoid  ini  sangat  penting  untuk  mengatur  jumlah  sel  T  dan  sel  B 

yang  bersirkulasi  dalam  darah.  Untuk  diketahui  bahwa  sel-sel  tetap 

hidup  karena  ada  signal  dari  lingkungannya  yang  memintanya  untuk 

hidup. Begitu sel tersebut tidak memperoleh signal untuk tetap hidup 

dari  lingkungannya,  sel-sel  tersebut  akan  segera  mati  dengan  proses 

alamiah  yang  disebut  apoptosis.  Dengan  demikian  signal  transduksi 

dari 


jaringan 

limfoid 


akan 

memberikan 

peluang 

untuk 


mempertahankan  limfosit  yang  punya  potensial  merespon  antigen 

asing.  Limfosit  bersirkulasi  pada  darah  dan  cairan  lymph.  Sel  B  dan 

sel  T  yang  telah  masak  pada  sumsum  tulang  dan  timus  disebut 

limfosit naive, sebelum sel-sel tersebut terpapar antigen.  Sel-sel naive 

akan terus bersirkulasi dari darah ke jaringan limfoid periferal sampai 

menemukan antigen. Sel-sel naive memasuki jaringan limfoid periferal 

dengan  menyelinap  dan  menembus  di  antara  sel-sel  yang  menyusun 

pembuluh kapiler. Sel-sel tersebut memasuki peredaran darah kembali 

melalui pembuluh limfa, kecuali pada spleen sel-sel tersebut langsung 

memasuki  darah  kembali.  Ketika  limfosit  menemukan  agen 

penginfeksi  pada  jaringan  limfoid  maka  sel-sel  tersebut  akan  tetap 

tinggal  pada  jaringan  limfoid  dan  mengadakan  proliferasi  dan 

diferensiasi  menjadi  sel  yang  disebut  sel  efektor.  Sel-sel  efektor 



 

22

mempunyai  kemampuan  untuk  melawan  antigen.  Ketika  terjadi 



infeksi  di  daerah  periferal,  maka  sel  dendritik  segera  menangkap 

antigen  tersebut  dan  membawanya  dari  tempat  infeksi  ke  draining 



lymph  node

  melalui  pembuluh  limfatik  afferent.  Pada  lymph  node  sel 

dendritik  akan  mempresentasikan  antigen  yang  ditangkap  dalam 

bentuk  peptida  ke  sel  T  yang  bersirkulasi  di  daerah  tersebut.  Sel 

dendritik  juga  memproduksi  sitokin  untuk  membantu  aktivasi  sel  T. 

Sel  B  yang  berhasil  menangkap  antigen  sebagaimana  APC  yang  lain 

juga berhenti dan menjadi aktif dengan bantuan sel T. Sel-sel limfosit 

yang telah mengalami aktivasi dan diferensiasi akibat adanya antigen, 

segera  meninggalkan  lymph  node  lewat  pembuluh  limfatik  efferent 

dalam  bentuk  sel  aktif  yang  disebut  sel  efektor.  Jaringan  limfoid 

periferal  merupakan  jaringan  yang    labil  karena  selalu  terlibat  dalam 

respon imunitas adaptif. Sebagai contoh, bentuk serta struktur lymph 

node selalu berubah sesuai dengan kepentingan. Pada saat ada infeksi 

akan  terlihat  bahwa  folikel  untuk  produksi  sel  B  semakin  banyak, 

demikian  juga  bentuknya  akan  menjadi  besar,  mengalami 

pembengkakan  karena  terjadi  proliferasi  sel  B  yang  berlebihan. 

Sebaliknya  jika  tidak  ada  infeksi  maka  lymph  node  akan  kembali 

mengecil dalam bentuk normal. 

 

 

 



 

 

 



 

 

Gambar  17.  Struktur  jaringan  limfoid  yang  berasosiasi  dengan  usus

Sebagian  besar  folikel  diisi  oleh  sel  B,  dan  sel  T  mengisi  sebagian  kecil  sisi 

folikel.  Antigen  masuk  menembus  epitelium  yang  tersusun  dari  sel  M. 

Meskipun  jaringan  ini  kelihatan  berbeda  dari  organ  limfoid  yang  lain  namun 

susunan  dasarnya  sama.  Sel  M  ditunjukkan  dengan  huruf  ”M”  dan  secara 

khusus dengan anak panah  (sumber: Murphy, 2008). 

lumen usus

epetelium

(sel M)


dome

germinal center

folikel

(area sel B) 



dinding usus

area sel T

area sel T


 

23

Beta Mikroglobulin. 

 

Molekul β2 mikroglobulin merupakan komponen dari MHC-



kelas I. Molekul β2 mikroglobulin diekspresikan oleh semua sel yang 

memiliki  nukleus.  Molekul  β2  mikroglobulin  terletak  secara  lateral 

dengan rantai α3 MHC kelas I. Tidak seperti rantai α3 MHC kelas I,  

β2    mikroglobulin  tidak  mempunyai  bagian  transmembran  pada 

permukaan  sel.  Tepat  di  atas  β2  mikroglobulin  tedapat  rantai  α1. 

Rantai  α1  terletak  secara  lateral  terhadap  rantai  α2.  Molekul  β2 

mikroglobulin  tidak  saja  berasosiasi  dengan  rantai  α    MHC  kelas  I, 

tetapi juga dengan molekul lain yang mirip MHC-kelas I seperti CD1 

dan  Qa.  Pada  mencit    yang  mengalami  defisiensi  β2  mikroglobulin 

akan  kehilangan  ekspresi  MHC  kelas  I.  Sebagai  konsekuwensi  dari 

hilangnya  ekspresi  molekul  MHC-kelas  I,  sel  T  CD8  tidak  dapat 

berkembang karena positive selection  CD8 memerlukan molekul MHC 

kelas I (Gambar 14). 

 

β





mikroglobulin

α



α



α

membran sel

 

Gambar  18.    Skema  molekul  MHC-kelas  I.  Molekul  MHC  kelas  I  berupa 

heterodimer  rantai  α  yang  menembus  membran  sel  dan  molekul  β2 

mikroglobulin yang tidak menembus membran. Rantai α  dan β2 mikroglobulin 

berikatan secara non-kovalen. Rantai α  terdiri atas tiga bagian yaitu α1, α2,  dan 

α3.  Rantai  α3    dan  β2  mikroglobulin   menunjukkan  adanya  persamaan  urutan 

asam  amino  dengan  imunoglobulin  bagian  konstan  (C),  sedangkan  rantai  α1 

dan    α2  membentuk  struktur  tunggal.  Lipatan  pada  rantai  α1  dan    α2 

membentuk  cekungan  yang  panjang  yang  merupakan  tempat  antigen-peptida 

berikatan dengan molekul MHC.  



 

24

Suatu  hal  yang  sangat  menarik  adalah  adanya  bukti  bahwa 



perkembangan  sel  T  CD8  sangat  tergantung  adanya  molekul  β2 

mikroglobulin. Positive selection CD8 sesungguhnya tidak mensyaratkan 

adanya  gen  yang  menyandi  β2  mikroglobulin  pada  sel  yang  sedang 

berkembang.  Perkembangan  sel  T  CD8  hanya  mensyaratkan  adanya 

molekul β2 mikroglobulin pada lingkungannya. Bukti ini sangat jelas 

ketika  Rifa’i  et.all,    melakukan  transfer  sumsum  tulang  mencit  β2

-/-

 

pada mencit normal yang diradiasi pada dosis letal. Hasil transplantasi 



yang  diamati  setelah  tiga  bulan  menunjukkan  bahwa  CD8 

berkembang  dari  mencit  β2

-/-

  sebagaimana  mencit  normal.  Hal  ini 



menunjukkan  bahwa  prekursor  sel  T  yang    mengarah  pada 

pematangan  dapat  memperoleh  self-antigen  yang  dipreresentasikan 

oleh  sel  epitel  timus  pada  resipien.  Dari  fakta  ini  jelaslah  sekarang 

bahwa  β2  mikroglobulin  bukanlah  faktor  survival  untuk  sel  T  dan 

sekaligus  membantah  pendapat  yang  meyakini  gen  penyandi  β2 

mikroglobulin terkait langsung pada keberhasilan proliferasi maupun 

perkembangan sel T CD8. 

Pada pelaksanaan transplantasi sumsusm tulang pada mencit, 

radiasi  dosis  letal  adalah  sekitar  800-900  Rad.  Radiasi  dosis  letal 

bertujuan  untuk  menghapus  semua  prekursor  darah  yang  ada  pada 

resipien.  Prekursor  darah  yang  berupa  sel  punca/stem  cells 

mempunyai kepekaan yang relatif tinggi terhadap radiasi. Di samping 

itu  radiasi  dosis  letal  juga  mendeplesi  sel-sel  darah  putih  yang  telah 

masak.  Mencit  yang  telah  menerima  radiasi  dosis  letal  dan  tidak 

segera  menerima  transfusi  sumsum  tulang  akan  segera  mati  sekitar 

satu  minggu  setelah  radiasi.  Transplantasi  sumsum  tulang  pada 

mencit  congeneic  tidak  menyebabkan  penolakan  setelah  adanya 

radiasi dosis letal. Keberhasilan donor dalam melakukan rekonstitusi 

dapat  diperiksa  setiap  saat  dengan  mengambil  darah  periferal  dan 

dianalisis  dengan  flow  cytometry.  Pelaksanaan  cangkok  sumsum 

tulang  pada  setting  alogenik  dikatakan  berhasil  apabila  donor  dapat 

merekonstitusi  hematopoietik  resipien  hingga  mencapai  lebih  dari 

~95%. Sekitar ~5% sel hematopoietik resipien kebal terhadap radiasi 

yang sampai saat ini belum dapat dijelaskan.  




 

25

 



Sisa sel resipien sebanyak ~5% merupakan pangkal terjadinya 

masalah  pada  kasus  transplantasi  sumsum  tulang  alogenik,  karena 

sekitar  ~5%  sel  resipien  yang  kebal  terhadap  radiasi  kebanyakan 

berupa  limfosit  T.  Limfosit  B  secara  keseluruhan  telah  tergantikan 

dari perkembangan sel donor sehingga dapat dikatakan bahwa sentral 

masalah  pada  kasus  transplantasi  sumsum  tulang  alogenik  terletak 

pada  sel  T.  Sel  resipien  yang  mengenali  sel  donor  pada  akhirnya 

mengalami  aktivasi  dan  secara  kontinyu  melakukan  proliferasi 

sehingga  pada  umumnya  pada  akhirnya  sel  resipien  terus  meningkat 

jumlahnya  dan  melakukan  penolakan  pada  donor.  Ketika  di  dalam 

tubuh  suatu  individu  terjadi  persaingan  antara  sel  donor  dan  sel 

resipien, aktivasi terjadi pada keduanya sehingga sel-sel tersebut akan 

memproduksi  sitokin  yang  berlebihan.  Sitokin  yang  tidak  terkontrol 

pada akhirnya mengganggu homeostasis dan menyebabkan kegagalan 

organ. Gagal organ yang terjadi tidak semata-mata hanya disebabkan 

ledakan  sitokin  tetapi  juga  oleh  serangan  langsung  dan  kontak  antar 

sel  yang  bertujuan  saling  mengeliminasi  karena  satu  sama  lain 

merupakan antigen. Sel T CD8 mempunyai kemampuan killing pada 

target  yang  dikenali  sebagai  antigen,  demikian  juga  sel  natural  killer, 

NK. Sel T dari populasi CD4 juga mempunyai sumbangan yang besar 

pada setiap reaksi imunitas yang melibatkan antigen asing. Sel T CD4 

mempunyai  potensi  menghasilkan  sitokin  yang  mampu  memacu 

aktivasi sel-sel yang lain. 

 

Paradigma  terdahulu  meyakini  bahwa  terjadinya  kasus 



penolakan donor oleh resipien khususnya pada transplantasi  sumsum 

tulang  alogenik  disebabkan  karena  adanya  sel  masak  yang  terdapat 

pada  sumsum    tulang  donor.  Dengan  kata  lain  terjadinya  penolakan 

karena  adanya  kontaminasi  sel  T  yang  telah  masak  pada  donor  yang 

ditransplantasikan.  Sel  masak  itu  hanya  dikhususkan  pada  sel  T, 

sehingga  sel  T  saat  ini  menjadi  pusat  kajian  pada  pelaksanaan 

transplantasi.  Menurut  paradigma  itu  sel  T  yang  telah  masak  dari 

donor tidak akan melewati seleksi pada timus resipien sehingga tidak 



tolerance 

terhadap sel-sel resipien. Seluruh sel resipien yang mempunyai 

inti  akan  mempresentasikan  self  antigen  pada  MHC  kelas  I. 

Presentasi  self  antigen  ini  menjadi  target  serangan  sel  T  CD8  dari 

donor  yang  tidak  terdidik  pada  timus  resipien  .  Dapat  dibayangkan 

bahwa  sel  T  yang  teraktivasi  akan  mengalami  proliferasi  yang  cepat 




 

26

dan sekaligus mensekresikan molekul-molekul efektor sehingga pada 



akhirnya  akan  terjadi  kerusakan  tingkat  jaringan  dan  diikuti  tingkat 

organ. Pada saat sel  T CD8 melakukan penghancuran pada sasaran-

sasaran  yang  dianggap  asing  akan  menyebabkan  inflamasi  sistemik. 

Inflamasi  sistemik  ini  menambah  kerusakan  semakin  luas  termasuk 

menimbulkan aktivasi sel B nonspesifik. Makrofag yang berkembang 

dari  donor  pada  awalnya  merupakan  sel  toleran  yang  bekerja  pada 

kisaran  homeostasis.  Adanya  kerusakan  level  sel  dan  jaringan  yang 

makin  besar  juga  menimbulkan  aktivasi  sel-sel  makrofag  karena  sel-

sel  tersebut  menelan  sisa-sisa  kerusakan  sel.  Fagositosis  oleh 

makrofag  menyebabkan  makrofag  mempresentasikan  antigen  asing 

yang  dikenali  oleh  sel  T  populasi  CD4.  Aktivasi  sel  T  CD4 

menimbulkan  respon  imun  semakin  besar.  Sel  T  populasi  CD4 

mempunyai  potensi  yang  sangat    besar    memproduksi  IL-2.  IL-2 

merupakan  interleukin  yang  sangat  berpengaruh  pada  peningkatan 

proliferasi. IL-2 tidak saja dimanfaatkan oleh sel T CD4 namun juga 

sel  T  CD8  dan  sel  B.  Sel  T  CD8  mempunyai  afinitas  yang  sangat 

tinggi  terhadap  IL-2  dan  bahkan  lebih  tinggi  dibandingkan  afinitas 

CD4  dalam  pemanfaatan  IL-2,  sehingga  CD8  berkembang  dengan 

sangat cepat dan terus menerus memproduksi sitokin termasuk faktor 

proinflamasi  seperti  TNFα  dan  INFγ.  Ketika  semua  sel 

hematopoietik  mengalami  aktivasi,  kerusakan  organ  nampak  makin 

jelas  sebanding  dengan  waktu.  Pada  awal  transplantasi  alogenik 

umumnya  resipien  nampak  sehat  karena  sistem  dikendalikan  oleh 

donor, namun ketika minor MHC pada resipien mulai dikenali sel T 

donor, aktivasi sel T donor akan terjadi.  

 

Pada  manusia  pelaksanaan  transplantasi  tidak  lepas  dengan 



penggunaan  obat-obat  imunosupresor.  Penggunaan  imunosupresor 

dapat melindungi kejadian rijeksi dan graft versus host diseases (GVHD), 

namun    juga  dapat  merugikan  resipien,  karena  resipien  kehilangan 

imunitas  melawan  infeksi  maupun  tumor.  Seperti  diketahui  bahwa 

setiap  saat  sel  tubuh  kita  mengalami  mutasi  level  sel  yang  selalu 

dikontrol  oleh  limfosit  T  dari  populasi  CD8  maupun  sel  NK.  Pada 

kejadian infeksi sel T CD4 dengan cepat merespon antigen yang telah 

dipresentasikan  MHC  kelas  II.  Respon  sel  T  CD4  terhadap  antigen 

bersifat  spesifik,  artinya  hanya  klon  tertentu  yang  dapat  merespon 



 

27

antigen itu. Respon sel T CD4 ini ditandai dengan adanya proliferasi 



dan pelepasan molekul-molekul efektor.  

 

 



 

 

 



Gambar  19.  Sel  T  CD8  tidak  berkembang  pada    individu  yang 

mengalami gen 

knockout

  β2 mikroglobulin. Mencit berumur tujuh Minggu 

diisolasi  spleennya  dan  dilakukan  staining  dengan  antibodi  monoklonal  anti-

CD4  dan  CD8.  Antibodi  anti-CD4  berkonjugasi  dengan  FITC  dan  antibodi 

anti-CD8  berkonjugasi  dengan  PE.  Analisis  dilakukan  dengan  menggunakan 

flow cytometry. Panel kiri adalah analisis sel T dari mencit normal sedang panel 

kanan  dari  mencit  β  mikroglobulin 

-/-

. Pada  gambar  ini  setiap titik pada  panel 



menunjukkan  satu  sel  yang  terdeteksi  oleh  mesin  Flow  Cytometry.  Analisis 

dilakukan dengan menggunakan software CELLQUEST. 

 

Perkembangan  sel  T  CD4  maupun  CD8  di  dalam  timus 



sangat  ditentukan  oleh  adanya  ketersedian  self  antigen  dan  MHC 

yang  diekspresikan  oleh  sel  epitel  dalam  timus.  Belum  dapat 

dipastikan  faktor  mana  yang  lebih  dominan  untuk  terbentuknya 

suatu klon. Banyak ilmuwan yang berpendapat bahwa self antigen 

sendirian  tidak  dapat  menentukan  terbentuknya  suatu  klon,  dan 

menurut  mereka  interaksi    MHC:self-antigen  secara  keseluruhan 

yang  menentukan  perkembangan  klon,  bukan  semata-mata 

antigennya.  Bahkan  ada  pendapat  bahwa  MHC  sendiri  dapat 

menjadi pemicu terbentuknya klon tanpa harus melibatkan antigen. 

Hal  ini  dapat  dimengerti  karena  pada  kenyataannta  MHC 

merupakan protein yang disandi oleh banyak gen yang mengalami 

penyusunan  ulang  sehingga  mempunyai  keragaman  yang  sangat 

besar.  Nampaknya  sangat  logis  bahwa  keberagaman  MHC  sendiri 

memungkinkan  terjadi  seleksi  klon  yang  beragam  pula.  Absennya 

suatu  antigen  pada  suatu  individu  menjadikan  individu  tersebut 



 

28

kehilangan  klon  tertentu.  Sering  dikaitkan  bahwa  kejadian 



autoimun  disebabkan  klon  sel  T  regulator  tidak  lengkap.  Dengan 

kata  lain  bahwa  sel  T  regulator  mempunyai  klon  yang  besar 

diversitasnya, manakala  salah satu klon absen dari individu, maka 

jika  terjadi  reaktivitas  suatu  sel  imun  tidak  ada  yang  kompeten 

untuk  melakukan  supresi.  Supresi  in  vivo  sebenarnya  tidak 

mengharuskan  satu  klon  sel  regulator  mensupresi  sel  reaktif 

tertentu secara spesifik, karena ketika sel regulator telah aktif akan 

memproduksi molekul efektor yang efeknya tidak spesifik, artinya 

molekul  efektor  itu  dapat  melakukan  supresi  ke  seluruh  sel  yang 

mengalami  aktivasi.  Apabila  klon  sel  T  regulator  tertentu  absen 

dari suatu individu, individu tersebut tidak mempunyai sistem yang 

dapat  mengawali  kejadian  supresi  sehingga  sel  reaktif  terus 

teraktivasi walaupun jumlah sel regulator cukup memadai. 

 

 



Gambar 20. Transplantasi sumsum tulang dari  mencit β2 mikroglobulin 

knockout  (β2

-/-

)  pada  mencit  normal  membantu  perkembangan  sel  T 

CD8 mencit β2

-/-

. Sel sumsum tulang dari mencit β2 mikroglobulin knockout 

(β2


-/-

)    sebanyak  5  x  10

5

  ditransplantasi  pada  mencit  normal  yang  diradiasi 



dengan  850  Rad.  Perkembangan  sel  donor  (β2

-/-


)  dianalisis  tiga  bulan  setelah 

transplantasi  dengan  menggunakan  flow  cytometry.  Panel  paling  atas 




 

29

menunjukkan  keberhasilan  transplantasi,  dimana  sekitar  ~90%  sel 



hematopoietik  berasal  dari  donor  β2  mikroglobulin  knockout  (β2

-/-


).  Donor 

dan  resipien  dapat  dibedakan  dengan  marker  CD45.1.  Pada  eksperimen  ini 

donor  tidak  mengekspresikan  molekul  CD45.1  sehingga  disebut  CD45.1

-



sedangkan  resipien  mengekspresikan  molekul  CD45.1  sehingga  disebut 

CD45.1


+

.  Panel  bawah  sebelah  kiri  merupakan  analisis  sel  T  dari  mencit  β2 

mikroglobulin knockout (CD45.1

-

). Pada analisis sel T dari populasi CD4 dan 



CD8  terlihat  bahwa  profile  sel  T  tampak  normal  seperti  profile  mencit  alami 

tanpa  manipulasi  dan  rekayasa.  Pada  panel  bawah  sebelah  kanan  merupakan 

analisis  sel  T  dari    resipien.  Resipien  berupa  mencit  normal  C57BL/6 

(CD45.1


+

).  Pada  gambar  ini  ditunjukkan  bahwa  resipien  yang  diradiasi  masih 

menyisakan sel-sel hematopoietik yang kebanyakan berupa sel T, sedangkan sel 

B  menunjukkan  minoritas  dalam  jumlah.  Pada  eksperimen  ini  dilakukan 

pelabelan  antibodi  monoklonal  dengan  tiga  macam  warna  yakni  CD4-FITC, 

CD8-PE,  dan  CD45.1-Biotin.  Pada  gambar  ini  setiap  titik  pada  panel 

menunjukkan  satu  sel  yang  terdeteksi  oleh  mesin  Flow  Cytometry.  Analisis 

dilakukan dengan menggunakan software CELLQUEST. Gambar ini mewakili 

lebih dari 10 kali eksperimen.  

 

Sel T Teraktivasi. 

 

Sel T yang teraktivasi akan kehilangan ekspresi CD62L. Sel T 



naive  yaitu  sel  T  yang  belum  pernah  terpapar  antigen 

mengekspresikan  molekul  CD62L,  dan  pada  individu  yang  sehat 

umumnya  lebih  dari  80%  sel  T  mengekspresikan  molekul  CD62L. 

CD62L  merupakan  molekul  adhesi.  Pada  limfosit  CD62L  berfungsi 

untuk  melakukan  pelekatan  dan  rolling  pada  sel  endotel  sepanjang 

pembuluh  darah.  Pemeriksaan  pada  individu  yang  tua  menunjukkan 

bukti  adanya  peningkatan  ekspresi  molekul  CD44  dan  penurunan 

molekul  CD62L.  Sel  T  yang  kehilangan  molekul  CD62L  dan 

mengekspresikan molekul CD44  diduga merupakan sel memori yang 

teraktivasi (CD44

+

CS62L


-

). 


Pada  individu  yang  sakit  akan  terjadi  aktivasi  berbagai  sel 

termasuk  sel  T,  sehingga  sel  T  kehilangan  molekul  CD62L.  Pada 

mencit  yang  mengalami  mutasi  gen  IL-2β  menunjukkan  adanya 

peningkatan  sel-sel  memori  yang  signifikan.  Pada  kondisi  ini  diduga 

sel  T  yang  mengalami  aktivasi  terakumulasi  sehingga  pada 

pemeriksaan dengan flow cytometry sebagian besar sel hematopoietik 

menunjukkan  sel-sel  yang  teraktivasi  dan  berupa  sel-sel  memori. 



 

30

Tanda-tanda  sel  teraktivasi  khususnya  pada  limfosit  T  juga  dapat 



diamati  dengan  melihat  ekspresi  CD69.  Molekul  CD69  merupakan 

protein yang disintesis sekitar dua jam setelah terjadi aktivasi sehingga 

menculnya  molekul  ini  pada  permukaan  sel  dianggap  gejala  awal 

terjadinya aktivasi. 

 

 

 



 

 

Gambar  21.  Sel  T  yang  teraktivasi  kehilangan  ekspresi  molekul  CD62L 



dan  sebaliknya  mengekspresikan  molekul  CD44.  Data  pada  panel  kiri 

diperoleh  dari  sel  spleen  mencit  normal  berumur  enam  minggu  distaining 

dengan  tripel  monoklonal  antibodi  yakni  anti-CD44-PE,  anti-CD62L-FITC, 

dan  anti-CD4-biotin.  Analisis  dilakukan  dengan  flow  cytometri.  Prosentasi  sel 

yang  mengekpresikan  CD44

+

CD62L



+

    diperlihatkan  pada  panel.  Pada  panel 

kanan sebagaimana yang dilakukan pada panel kiri namun diisolasi dari mencit 

IL-2Rβ


-/-

. Gambar yang ditampilkan merupakat gate dari limfosit T CD4. Pada 

gambar  ini  setiap  titik  pada  panel  menunjukkan  satu  sel  yang  terdeteksi  oleh 

mesin  Flow  Cytometry.  Analisis  dilakukan  dengan  menggunakan  software 

CELLQUEST. Data ini mewakili lebih dari sepuluh kali eksperimen. 

 

Sel-sel  yang  mengalami  aktivasi  dalam  kontek  biologi  dapat 



dibedakan  dari  sel  normal  dengan  melihat    ciri-cirinya.  Ciri-ciri  itu 

adalah  perubahan  morfologi  sel  dan  perubahan  tingkah  laku  sel. 

Umumnya  sel  yang  teraktivasi  morfologinya  berubah  menjadi  lebih 

besar daripada sel naive. Sel teraktivasi dapat mencapai ukuran 20-50 

kali  lebih  besar  daripada  sel  normal.  Sel-sel  yang  teraktivasi  juga 

mempunyai  perubahan  tingkah  laku  yang  dapat  dibedakan  dari  sel 

normal terutama kemampuan memproduksi sitokin. Sel-sel yang tidak 

mengalami aktivasi tidak dapat dideteksi keberadaan sitokinnya secara 

intraselluler, namun sel yang teraktivasi akan dengan mudah dideteksi 

kandungan  sitokinnya  secara  intraselluler  terutama  jika  aktivasinya 

disebabkan oleh stimuli yang kuat secara in vitro. Pada mencit IL-2Rβ

-



 

31

/- 



aktivasi disebabkan oleh antigen yang belum diketahui. Aktivasi sel-

sel hematopoietik pada mencit IL-2Rβ

-/-

 diduga karena hilangnya sel 



T  regulator  CD4

+

CD25



+

.  IL-2Rβ

 

adalah  salah  salah  satu  molekul 



sebagai komponen penyusun reseptor IL-2 dan lebih dikenal dengan 

nama  lain  CD122.  Knockout  gen  pada  IL-2Rβ

 

sesungguhnya 



ditujukan  pada  molekul  CD122,  namun  efeknya  berimbas  pada 

perkembangan sel T regulator CD4

+

CD25


+

. Knockout gen pada IL-

2Rβ  menyebabkan  mencit  kehilangan  sel  T  regulator.  Secara  teoritis 

CD25 seharusnya tidak hilang ketika dilakukan knockout gen CD122, 

namun  kenyataannya  hilangnya  ekspresi  CD122  karena  rekayasa 

genetika  menyebabkan  CD25  hilang  dari  jaringan  limfoid  periferal. 

Satu hal yang bisa menerangkan hilangnya sel T regulator pada mencit 

IL-2Rβ


-/-

  adalah  kenyataan  bahwa  mencit  IL-2Rβ

-/-

  mempunyai 



kesehatan  yang  sangat  buruk  sehingga  timus  tidak  berkembang. 

Gangguan  pada  perkembangan  timus  ini  diduga  menjadi  penyebab 

utama  hilangnya  ekspresi  CD25  sebagai  marker  sel  T  regulator. 

Banyak  percobaan  yang  berhasil  membuktikan  bahwa  timus 

merupakan  tempat  terbentuknya  sel  T  regulator  CD4

+

CD25



+

  yang 


sering disebut professional regulatory T cells atau natural occuring regulatory T 

cell.

  Gangguan  perkembangan  timus  pada  mencit  IL-2Rβ

-/-

  diduga 



karena  hilangnya  homeostasis  pada  mencit  tersebut.  Gangguan 

homeostasis  ini  banyak  disebabkan  karena  sel-sel  teraktivasi  pada 

mencit IL-2Rβ

-/-


 terus terakumulasi karena kebal terhadap mekanisme 

apoptosis. Pada umumnya sel-sel efektor yang teraktivasi akan segera 

mengalami eliminasi dengan mekanisme apoptosis baik terjadi karena 

ikatan Fas:FasLigan maupun dengan bantuan sel T regulator dengan 

mekanisme  starvasi  yaitu  membatasi  ketersediaan  triptofan  pada 

lingkungan tempat homing sel efektor. 

Satu  hal  yang  sangat  menarik  ternyata  knockout  gen  CD122 

ternyata benar-benar mempengaruhi ekspresi CD25 baik ada maupun 

tidaknya  organ  timus.  Bukti  ini  dapat  dilihat  pada  penelitian  Rifa’i 

(tidak  dipublikasikan)  pada  transplantasi  singenik  mencit  IL-2Rβ

-/-

  

terhadap mencit normal. Pada model transplantasi ini diharapkan sel 



T  regulator  dapat  muncul  dari  prekursor  yang  berasal  dari  sumsum 

tulang  mencit  IL-2Rβ

-/-

  dan  stabil  selama  hidup  resipien.    Namun 



ternyata  sel  T  regulator  yang  berasal  dari  IL-2Rβ

-/-


hanya  bertahan 

sekitar  2-3  minggu  setelah  transfer  dan  selanjutnya  sel  T  regulator 

diganti dari resipien. Pada eksperimen ini ada hal yang sangat penting 

untuk dikaji mengapa sel T regulator yang muncul dari IL-2Rβ

-/-

 tidak 



 

32

stabil  padahal  rekonstitusi  BMT  menunjukkan  keberhasilan  dimana 



lebih  dari  95%  sel  hematopoietik  berasal  dari  IL-2Rβ

-/-


.  Pertanyaan 

lain  yang  tidak  kalah  pentingnya  adalah:  ”Mengapa  sel  T  regulator 

muncul    dari  resipien  padahal  resipien  telah  diradiasi  dengan  dosis 

letal?”.  Pada  eksperimen  ini  ada  beberapa  kemungkinan  yang  dapat 

dikemukakan. Pertama, bahwa knockout gen CD122 secara langsung 

akan  berpengaruh  pada  keberadaan  gen  penyandi  CD25.  Hal  ini 

dimungkinkan  karena  lokus  kedua  gen  tersebut  berdekatan  sehingga 

ada  kemungkinan  terjadinya  interferensi  dan  saling  mempengaruhi. 

Kedua,  sel  T  regualtor  yang  diamati  pada  mencit  hasil  transplantasi 

dengan sumsum tulang mencit IL-2Rβ

-/-

 kemungkinan berasal dari sel 



resipien  yang  kebal  terhadap  radiasi,  meskipun  tidak  menutup 

kemungkinan sel T regulator itu berasal dari  sumsum tulang resipien 

yang  berkembang  menuju  timus.  Namun  nampaknya  kemungkinan 

adanya sel-sel dari sumsum tulang resipien berkembang sangat kecil, 

karena  pada  faktanya  sel-sel  sumsum  tulang  dan  sel-sel  epitel 

khususnya pada usus sangat rentan terhadap radiasi. 

 

Gambar  22.  Transplantasi  sumsum  tulang  dari  IL-2Rβ  knockout  (IL-

2Rβ

-/-

)  pada  mencit  normal  menghasilkan  fenotipe  normal.  Sel  sumsum 

tulang  dari  mencit  IL-2Rβ

-/-

  sebanyak  5  x  10



5

  ditransplantasi  pada  mencit 

normal  yang  diradiasi  dengan  900  Rad.  Perkembangan  sel  donor  IL-2Rβ

-/-


 


 

33

dianalisis satu bulan setelah transplantasi dengan menggunakan flow cytometry. 



Panel paling atas menunjukkan keberhasilan transplantasi, dimana sekitar ~95% 

sel  hematopoietik  berasal  dari  donor  IL-2Rβ  knockout.  Donor  dan  resipien 

dapat  dibedakan  dengan  marker  CD45.1.  Pada  eksperimen  ini  donor  tidak 

mengekspresikan  molekul  CD45.1  sehingga  disebut  CD45.1

-

,  sedangkan 



resipien  mengekspresikan  molekul  CD45.1  sehingga  disebut  CD45.1

+

.  Panel 



bawah  sebelah  kiri  merupakan  analisis  sel  T  regulator  dari  mencit  IL-2Rβ

 

knockout  (CD45.1



-

).  Analisis  sel  T  dari  mencit  IL-2Rβ

-/-

    menunjukkan 

hilangnya ekspresi molekul CD25, meskipun hasil treansplantasi menunjukkan 

fenotip  normal.  Pada  panel  bawah  sebelah  kanan  merupakan  analisis  sel  T 

resipien  yang  memperlihatkan  ekspresi  molekul  CD25  pada  sel  T  CD4.  Pada 

gambar ini ditunjukkan bahwa resipien yang diradiasi dengan dosis letal masih 

menyisakan  sel  T  regulator,  CD4

+

CD25


+

.  Pada  eksperimen  ini  dilakukan 

staining  menggunakan  antibodi  monoklonal  dengan  tiga  macam  warna  yakni 

CD4-PE,  CD8-FITC,  dan  CD45.1-Biotin.  Pada  gambar  ini  setiap  titik  pada 

panel  menunjukkan  satu  sel  yang  terdeteksi  oleh  mesin  Flow  Cytometry. 

Analisis  dilakukan  dengan  menggunakan  software  CELLQUEST.  Gambar  ini 

mewakili lebih dari 10 kali eksperimen.  

 

 



CD4

C

D

2

5

12%

donor

host

22.3

%

0.0%

donor

host

 

 



Gambar  23.  Transplantasi  sumsum  tulang  dari  IL-2Rβ  knockout  (IL-

2Rβ

-/-

)  pada  mencit  normal  menghasilkan  fenotipe  normal  namun  ada 

kecendurengan  peningkatan  sel  resipien  dan  penurunan  jumlah  sel 


 

34

donor.  Sel  sumsum  tulang  dari  mencit  IL-2Rβ

-/-

  sebanyak  5  x  10



5

 

ditransplantasi  pada  mencit  normal  yang  diradiasi  dengan  900  Rad. 



Perkembangan  sel  donor  IL-2Rβ

-/-


  dianalisis  tiga  bulan  setelah  transplantasi 

dengan  menggunakan  flow  cytometry.  Panel  paling  atas  menunjukkan 

keberhasilan transplantasi, dimana sekitar ~90% sel hematopoietik berasal dari 

donor  IL-2Rβ  knockout.  Donor  dan  resipien  dapat  dibedakan dengan marker 

CD45.1.  Pada  eksperimen  ini  donor  tidak  mengekspresikan  molekul  CD45.1 

sehingga  disebut  CD45.1

-

,  sedangkan  resipien  mengekspresikan  molekul 



CD45.1  sehingga  disebut  CD45.1

+

.  Panel  bawah  sebelah  kiri  merupakan 



analisis  sel  T  dari  mencit  IL-2Rβ

 

knockout  (CD45.1



-

). Pada  analisis  sel T  dari 

mencit  IL-2Rβ

-/-


    menunjukkan  hilangnya  ekspresi  molekul  CD25,  meskipun 

hasil  transplantasi  menunjukkan  fenotipe  normal.  Pada  panel  bawah  sebelah 

kanan merupakan analisis sel T  resipien yang memperlihatkan ekspresi molekul 

CD25  pada  sel  T  CD4.  Pada  gambar  ini  ditunjukkan  bahwa  resipien  yang 

diradiasi  dengan  dosis  letal  masih  menyisakan  sel  T  regulator,  CD4

+

CD25



+

Jumlah  sel  regulator  yang  berasal  dari  resipien  meningkat  dari  ~10%  pada 



pengamatan  satu  bulan  setelah  BMT  menjadi  ~20%  pada  pengamatan  tiga 

bulan  setelah  BMT.  Pada  eksperimen  ini  dilakukan  staining  dengan  antibodi 

monoklonal  dengan  tiga  macam  warna  yakni  CD4-PE,  CD25-FITC,  dan 

CD45.1-Biotin.  Pada  gambar  ini  setiap  titik  pada  panel  menunjukkan  satu  sel 

yang  terdeteksi  oleh  mesin  Flow  Cytometry.  Analisis  dilakukan  dengan 

menggunakan software CELLQUEST. Gambar ini mewakili lebih dari 10 kali 

eksperimen.  

 

 



 

 

 



 

 

Kataloq: files -> 2011
2011 -> Everyone has the right to life, liberty and security of person
2011 -> Attic style or Atticism, the style of oratory or prose writing associated with the speeches of the great Attic I
2011 -> Diantara tanda-tanda kekuasaan Allah swt adalah Dia menjalankan matahari di lintasan yang teratur
2011 -> Grimsvötn est entré en éruption, et le souvenir de celle de l’Eyjafjallajökull l’an dernier est encore assez présent dans les esprits pour que l’on se préoccupe à nouveau de l’impact de ce nouvel évènement tellurique sur le trafic aérien
2011 -> Baken 1: Gericht op de vraag achter de vraag
2011 -> Musson: Hello? Dewey: Hi Steve, it’s John Dewey, famous philosopher and educator I don’t know if you remember me, but I developed a really cool philosophy of education way back when

Yüklə 167,7 Kb.

Dostları ilə paylaş:




Verilənlər bazası müəlliflik hüququ ilə müdafiə olunur ©genderi.org 2022
rəhbərliyinə müraciət

    Ana səhifə