Xromatografiya tadqiqot usuli sifatida. Xromatografiyaning kashf etilishi tarixi Xromatografiyaning rivojlanishi

Transkripsiya
1 Qisqa hikoya suyuq xromatografiyaning rivojlanishi Xromatografiyani M.S. 1903 yilda ustunli suyuqlik-adsorbsion usul shaklida rang. Bu usulda donasi kattaligi mkm dan ortiq bo'lgan adsorbentlar qo'llanilgan, tortishish kuchi ta'sirida eluent (erituvchi) kolonkadan tortishish kuchi bilan o'tgan va oqim detektorlari yo'q edi. Ajratish asta-sekin, bir necha soat davomida davom etdi va bu rejimda suyuq xromatografiyani analitik maqsadlarda ishlatish mumkin emas edi. Yillarda. turli mamlakatlardagi mutaxassislarning sa'y-harakatlari tezkor suyuqlik xromatografiyasini yaratishga qaratilgan. Ajralish tezligini oshirish uchun tashqi va ichki diffuziya yo'llarini qisqartirish kerakligi aniq edi. Bunga adsorbent donalarining diametrini kamaytirish orqali erishish mumkin. Ustunlarni mayda donalar (5-10 mikron) bilan to'ldirish yuqori bosimli nasoslardan foydalanishni talab qiladigan yuqori kirish bosimini yaratdi. Yuqori bosimli suyuqlik xromatografiyasi shunday tug'ilgan. Yupqa fraksiyaning adsorbentlariga o'tish bilan ustunlarning samaradorligi sezilarli darajada oshdi, shuning uchun zamonaviy ekspress-analitik suyuqlik xromatografiyasi yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC) deb nomlandi. Yupqa taneli qattiq adsorbentlarni (5 yoki 10 mikron) ishlab chiqish, yuqori bosimli nasoslarni (200 atm.dan ortiq) va oqim detektorlarini yaratish, bularning barchasi HPLC ning yuqori ishlashini ta'minladi. Ajralish vaqtlari bo'yicha u gaz xromatografiyasidan kam emas edi va qo'llash sohalarida u undan sezilarli darajada oshib ketdi. Hozirgi vaqtda HPLC boshqa xromatografik usullar orasida ishlab chiqarilgan asbob-uskunalar hajmi bo'yicha ham (yiliga kromatograflardan ortiq, qiymati 2 milliard dollardan ortiq), nashrlar soni bo'yicha ham (yiliga 5-6 ming nashr) etakchi o'rinni egallaydi. . Zamonaviy HPLC turli xil versiyalarda amalga oshiriladi. Bu variantlar molekulalarning turli aralashmalarini (shu jumladan barcha turdagi izomerlarning aralashmalarini) ajratish imkonini beradi; sintetik va biopolimerlarning makromolekulalari (shu jumladan viruslar va massasi bir necha milliongacha bo'lgan molekulalar); ionlar va barqaror radikallar. HPLC ning roli fan va ishlab chiqarishning biologiya, biotexnologiya, oziq-ovqat sanoati, tibbiyot, farmatsevtika, sud-tibbiyot, atrof-muhit ifloslanishini nazorat qilish va boshqalar kabi muhim sohalarida ham katta. HPLC inson genomini dekodlashda asosiy rollardan birini o'ynadi, yaqinda yillar davomida proteomika muammolarini muvaffaqiyatli hal qilmoqda.
Oxirgi o'n yillikda qo'llanilgan 2 HPLC varianti Variantlar Teskari fazali Oddiy fazali Ion-juft Ion almashinuvi hajmini istisno qilish Jel filtrlash Ligand almashinuvi Chiral yaqinlik Immunitet miselyar Hidrofobik Kumush teskari faza Suyuqlik-suyuqlik Variant Ekstraktsion Donorni yutuvchi kompleks Turbulent uzluksiz to'shakka qarshi Counter HPLC nazariyasining yuqori haroratli membrana savollari Xromatografik jarayon: ushlab turish, suyultirish, ajratish Xromatografik ustun oddiy adsorbent bilan to'ldirilgan naycha bo'lib, u orqali erituvchi doimiy ravishda oqadi. Adsorbent (sorbent, ustunni to'ldiruvchi) ustunda filtrlar yordamida ushlab turiladi, u statsionar va shuning uchun statsionar faza deb ataladi. Sorbentga nisbatan harakatlanuvchi erituvchi harakatlanuvchi faza (ayrim hollarda eluent) deb ataladi. Ustun bo'ylab harakatlanayotganda, moddaning molekulalari (sorbatlar) sorbentning teshiklari ichida tarqaladi va u yoki bu turdagi molekulalararo o'zaro ta'sirlar natijasida statsionar faza yuzasida adsorbsiyalanadi. Molekulalarning adsorbsiyalangan holatda bo'lish vaqti sorbatlarning sorbent bilan molekulalararo o'zaro ta'sirining kuchi bilan belgilanadi. Juda zaif sorbtsiya bilan molekulalar deyarli barcha vaqtlarini o'tkazadilar
Mobil fazaning 3 yechimi va shuning uchun kolonna bo'ylab harakatlanuvchi fazaning tezligidan bir oz pastroq tezlikda harakatlaning. Aksincha, juda kuchli sorbtsiya bilan molekulalar sirtdan deyarli ajralmaydi va ularning ustun bo'ylab harakatlanish tezligi ahamiyatsiz. Xromatografiya nuqtai nazaridan, adsorbsiya kuchi oraliq bo'lgan va sorbatlarning ustun bo'ylab harakatlanish tezligi mobil fazaning harakat tezligidan 2-10 baravar kam bo'lgan sharoitlar ko'proq qiziqish uyg'otadi. Xromatografiyada harakatlanuvchi fazaning harakatiga nisbatan molekulalar harakatining sekinlashishi hodisasi tutilish deyiladi. Agar moddalarning sorbsiya konstantalari har xil bo'lsa, ularning ustun bo'ylab o'rtacha harakat tezligi ham har xil bo'ladi. Shunday qilib, ajratish xromatografiyasining asosiy maqsadiga erishiladi. Tabiiyki, amalda bitta molekulalar ustunga kiritilmaydi. Agar ustunga har xil turdagi kamida bir nechta molekulalar kiritilsa, sorbat molekulalarining o'rtacha harakat tezligi hali ham farq qiladi. Bundan tashqari, har bir turdagi alohida molekulalarning harakat tezligi ma'lum bir tur uchun o'rtacha qiymatdan u yoki bu yo'nalishda og'adi. Dastavval lahzali impuls shaklida ustunga kiritilgan sorbat molekulalari ustunni kengroq zonada qoldiradi. Xromatografiyada bir xil molekulalarning harakat tezligining bunday aniqlanmasligi eroziya deb ataladi. Ushbu kiruvchi hodisa bir moddaning molekulalari orasida tezligi birinchisining eng tez molekulalarining tezligiga yaqin bo'lgan boshqasining molekulalari ham bo'lishi mumkinligiga olib keladi. Natijada, moddalar zonalari qisman bir-birining ustiga chiqishi mumkin va ajratish to'liq bo'lmaydi. Retension va eroziya jarayonlari xromatografiya nazariyasining predmeti hisoblanadi. Ba'zi asosiy atamalar va ta'riflar Xromatogramma - bu kolonnadan harakatlanuvchi fazali oqim bilan chiqib ketayotgan birikmalar konsentratsiyasining ajralish boshlangan vaqtga bog'liqligini tasvirlaydigan egri chiziq.
4 Xromatogramma odatda asosiy chiziq va cho'qqilardan iborat. Xromatografik qurilmalarda, qoida tariqasida, harakatlanuvchi fazadagi moddaning kontsentratsiyasini to'g'ridan-to'g'ri o'lchash yo'q, lekin detektorning maxsus birligi yordamida kontsentratsiyaga (elektrik) funktsional bog'liq bo'lgan ba'zi jismoniy miqdorlar o'lchanadi. o'tkazuvchanlik, optik zichlik va boshqalar). Asosiy chiziq detektor signalni faqat mobil fazadan qayd etadigan vaqt oralig'iga to'g'ri keladi. Gauss taqsimotiga ideal tarzda yaqinlashadigan tepalik egri chizig'i ustundan chiqishda kontsentratsiyaning bosqichma-bosqich o'sishini va uning keyingi pasayishini tavsiflaydi. Xromatogrammada tepalik paydo bo'ladigan vaqt ushlab turish vaqti (t R) deb ataladi. Xromatografik tizimning doimiy ish sharoitlari va fazaviy tarkibi sharoitida ma'lum bir modda uchun ushlab turish vaqti doimiy bo'ladi. Ba'zan, xromatogrammaning boshlang'ich qismida tepalik qayd etiladi, uning tabiati namunani in'ektsiya qilish paytida ustundagi qisqa muddatli muvozanat bilan bog'liq. Bu cho'qqi so'rilmaydigan moddani ushlab turish vaqtiga to'g'ri keladi (t 0). Moddalarning ikkita ajratilgan cho'qqilarining qiyosiy termodinamik xususiyatlari nisbiy tutilish yoki selektivlikni beradi. Bu qiymat berilgan xromatografik tizimning berilgan juft moddalarni ajratish qobiliyatini ko'rsatadi. Saqlash vaqtlari va ulardan olingan barcha miqdorlar asosan jarayonning termodinamik xarakteristikalari hisoblanadi. Biroq, natija termodinamik va kinetik turdagi omillarning birgalikdagi ta'siri bilan aniqlanadi. Agar xromatografik tizimda bo'lsa bu kompozitsiya da
Berilgan haroratda ikkita modda uchun t R qiymatlari bir xil bo'ladi (yoki = 1,0), u holda ustunning geometriyasida hech qanday o'zgarish bu juftlikning ajralishiga olib kelmaydi. Ammo, boshqa tomondan, t R qiymatlaridagi farq avtomatik ravishda ajralish va undan ham ko'proq yaxshi narsaga erishiladi degani emas. Buning uchun ishlatiladigan ustun etarlicha yuqori kinetik xususiyatlarga ega bo'lishi kerak. Sorbtsiya-desorbsiya aktlari ajralish potentsialini amalga oshirish uchun yuqori tezlikda amalga oshirilishi kerak, bu t R farqi bilan ko'rsatiladi. Jarayonning asosiy kinetik xarakteristikasi - nazariy plastinkaga ekvivalent h balandligi. (HETT). Bu qiymat sorbent qatlamining balandligiga to'g'ri keladi, uning o'tishi davomida sorbsiya-desorbsiya akti o'rtacha bir marta sodir bo'ladi. U asosan ishlatiladigan sorbent sifatini, ustunni to'ldirish sifatini va xromatografiya rejimini to'g'ri tanlashni aks ettiradi. Ustunning sifatini baholash uchun nazariy plitalar sonining o'zaro nisbati qo'llaniladi.Nazariy plitalar soni ustunning samaradorligini o'lchovidir. Xromatografik zonalarning eroziyasi Ajraladigan aralashma ustunga tor impuls shaklida yuboriladi va uning hajmini ustun hajmiga nisbatan e'tiborsiz qoldirish mumkin. Ajraladigan moddalarning molekulalari harakatlanuvchi faza oqimi bilan harakat qilganda, impuls asta-sekin kengayadi, undagi ajraladigan moddalarning konsentratsiyasi esa kamayadi. Bu jarayonning asosiy sababi shundaki, alohida molekulalarning ustun bo'ylab harakatlanish tezligi berilgan birikmaning o'rtacha tezligi xarakteristikasidan farq qiladi. Har xil turdagi molekulalarni ajratishga erishishning xromatografik jarayonining yakuniy foydali natijasi nuqtai nazaridan, zonalarning xiralashishi, hech bo'lmaganda, quyidagi sabablarga ko'ra juda istalmagan. Birinchidan, kuchli eroziya turli xil birikmalar zonalarining qisman qoplanishiga olib keladi va shuning uchun tizimning selektivligi uchun yanada qattiqroq talablar qo'yilishi kerak. Bundan tashqari, agar u yoki bu holatda yuqori selektivlikni ta'minlash mumkin bo'lsa ham, umumiy ajratish qobiliyati kichikdir. Eroziyaning yana bir salbiy oqibati - bu zonaning markazida sorbat konsentratsiyasining pasayishi, tahlil paytida sezuvchanlikning pasayishiga olib keladi. Eroziya jarayonlari intensivligining o'lchovi nazariy plastinkaga ekvivalent balandlikdir. h ning qiymati bir qator maxsus jarayonlar bilan belgilanadi. 1) Mobil faza oqimining bir xilligi. Ustundagi sorbent mobil faza oqadigan kanallar tizimini hosil qiladi. Sorbent zarralari qanchalik nozik bo'lsa, harakatchan faza molekulalarining yo'l uzunligi bir-biriga yaqinroq bo'ladi. kamroq farq bir zonaning molekulalarining ustundan o'tish vaqti, zonaning surilishi kamroq.
6 2) Harakatlanuvchi va statsionar fazalardagi molekulyar diffuziya. Oqim tezligi qanchalik yuqori bo'lsa, shu sababli kamroq loyqalik. 3) Massa almashinish tezligi, sorbsiya yoki ion almashish vaqti. Oqim tezligi qanchalik yuqori bo'lsa, bu sabab tufayli loyqalik shunchalik katta bo'ladi. H ni kamaytirish uchun diametri kichikroq bo'lgan sorbent zarralarini qo'llash kerakligi aniq. Afsuski, bu yo'ldan faqat ma'lum chegaragacha foydalanish mumkin, bu esa texnik nuqtai nazardan belgilanadi. Ustundagi bosimning pasayishi jarayonning boshqa parametrlari bilan quyidagi bog'liqlik bilan bog'liq: bu erda r - oqim qarshiligi parametri, p - bosimning pasayishi, U - oqim tezligi, L - ustun uzunligi, d - sorbentning o'lchami zarralar. Bosimning oshishi bilan uskunaning narxi va murakkabligi keskin oshadi. Shuning uchun HPLC da d p = 3-10 mikron. Samaradorlikni oshirish uchun kamroq yopishqoq erituvchilarga afzallik beriladi, chunki ular yuqori diffuziya koeffitsientiga va kamroq ustun qarshiligiga ega. HPLCda xromatografik zonalarning diffuziya nazariyasi hozirgi kunga qadar ko'proq yoki kamroq tugallangan. Ushbu nazariyaning rivojlanishi nazariyaga yaqin ustunlarning samaradorligini amalda qo'llash imkonini berdi. Shunday qilib, don diametri 3 mkm dan kam bo'lgan sorbentlardan foydalanganda, ustun uzunligining bir metriga nazariy plitalargacha samaradorlik olindi. Xromatograflar ajralish selektivligini o'rganishga katta e'tibor berishadi. HPLCda gaz xromatografiyasidan farqli o'laroq, selektivlik sorbentning tabiati va eluentning tabiati bilan belgilanadi. Sorbtsiyaning erkin energiyasi bilan bog'liq bo'lgan modda - erituvchining o'zaro ta'sirini o'rganish bo'yicha ishlar davom etmoqda. HPLC nazariyasidagi dolzarb mavzular ajratish jarayonini kompyuter optimallashtirishdir. Yuqorida ta'kidlanganidek, hozirgi vaqtda xromatograflarning asosiy sa'y-harakatlari ajratish selektivligi masalalarini nazariy o'rganishga qaratilgan. Turli xil kimyoviy tabiatdagi sorbentlarda va ko'p o'lchovli xromatografiya variantlarida molekulalarning tuzilishi va ularning saqlanishi o'rtasidagi bog'liqlikni o'rganish bo'yicha o'nlab nashrlar mavjud. Gaz xromatografiyasida ham, HPLCda ham ajratishning selektivligini yaxshilash uchun izomerlarni tanlab ajratish uchun siklodekstrinlar, toj efirlari va suyuq kristalllardan foydalanilganda sterik omil keng qo'llaniladi.
7 Gaz va suyuqlik xromatografiyasida optik izomerlarni ajratish nazariyasidagi ta'sirchan yutuqlar. Natijalar kashfiyot darajasida olingan bo'lib, optik izomerlarni ikkita nuqtadagi kontaktlar bilan ajratish imkoniyatini ko'rsatdi (uchinchi aloqa nuqtasi axiral adsorbentning yuzasi bo'lishi mumkin). Kritik sharoitlarda polimerlarning xromatografiyasi nazariyasini ishlab chiqish muvaffaqiyatli davom etmoqda. Xromatografik ushlab turish parametrlarini biologik va kimyoviy faollik molekulalar. Bu, ayniqsa, dori vositalarining yangi turlarini izlashda farmatsevtika uchun istiqbolli. So'nggi yillarda HPLCda haroratning butun ajratish jarayoniga ta'siri muammosi katta qiziqish uyg'otdi. Yuqori haroratli HPLC taklif qilingan va bu usulda haroratni dasturlash uchun uskunalar ishlab chiqilmoqda. Eluentning harorati va kuchini bir vaqtning o'zida o'zgartirganda, ajratishni optimallashtirish ustida ishlash istiqbolli ko'rinadi. Biz ustun bo'ylab qo'llaniladigan elektr maydonining g'ovakli uglerod adsorbentli ustunlarga kortikosteroidlarni ushlab turish va eroziyasiga ta'sirini o'rgandik. magnit maydon politetrafloroetilen bilan qoplangan po'lat sharlar bilan magnit zarralar bilan to'ldirilgan ustunlar ustida ushlab turish uchun. HPLC uchun sorbentlar HPLC uchun sorbentlarning keng assortimenti ishlab chiqilgan va ishlab chiqarilgan. Dunyo bo'ylab 100 ga yaqin kompaniya 300 dan ortiq sorbentlarni ishlab chiqaradi. Biroq, haqiqiy assortiment ancha torroqdir, chunki ko'pgina kompaniyalarning sorbentlari sirtning kimyoviy tabiatida bir xil va faqat nomlari bilan farqlanadi. Turli sorbentlarda turli HPLC usullarini qo'llashning nisbiy ulushi Xromatografiya usuli / turi Sorbentdan foydalanuvchilarning foizi Teskari faza 50,4 Payvandlangan guruhlar bilan silikagel C C 8 15,9 Fenil 7,1 C 4 2,3 C 1 -C 2 1,1
8 Oddiy fazali 24,1 payvandlangan CN-guruhlari bilan silika jeli 8,9 Silikagel 8,5 MN 2-4,7 Diol 2 Ion almashinuvi va ionli 14 Anionlar 7,4 Kationlar 6,6 Eksklyuziv 6,7 Suvli 3,5 Suvsiz 3 , 8111. Koʻpincha boshqa xirallar. sof silikagellar va payvandlangan qutbsiz va qutbli guruhlarga ega silikagellar ishlatiladi. Alyuminiy, sirkoniy, titan va boshqalar oksidlari asosida sorbentlar yaratilgan va rivojlanishda davom etmoqda.HPLCda turli sorbentlardan foydalanish ulushi quyidagicha: silikagellar 70%, g'ovak polimerlar (stirol va divinilbenzolning sopolimeri, polimetakrilatlar, tsellyuloza). va boshqalar) 20%, g'ovakli uglerod sorbentlari, titan oksidi, sirkoniy oksidi 4%, alyuminiy oksidi 1%. Analitik amaliyotda C 18 va C 8 alkil guruhlari bilan payvandlangan silikagel yordamida teskari fazali xromatografiya (70% dan ortiq) eng katta qo'llanilishini topadi.Keng qo'llanilishiga qaramay, bu sorbentlarning bir qator kamchiliklari bor, ulardan asosiylari. etarli darajada kimyoviy barqarorlik emas. ph da< 3 происходит гидролиз связи =Si О Si=, а при рн >10 silika asosi eriydi, ayniqsa yuqori haroratlarda. Bu sorbentlar qutbli birikmalar va izomerlarni ajratishda selektiv emas. Asosiy tabiatning moddalari, qoida tariqasida, qoldiq gidroksil guruhlari bilan o'zaro ta'siri tufayli assimetrik cho'qqilar shaklida elute qilinadi. Silikagel materiallarining xossalari silikagelning tozaligi, geometrik va kimyoviy tabiatiga, alkil guruhlarni payvandlash usuliga va boshqalarga kuchli bog'liqdir.So'nggi yillarda ushbu kamchiliklarni bartaraf etishga qaratilgan tadqiqotlar faol ravishda olib borilmoqda. Avvalo, boshlang'ich silika jellarini ishlab chiqarish sezilarli darajada yaxshilandi, bu esa ahamiyatsiz tarkibga ega bo'lgan sferik zarrachalarni takror ishlab chiqarish imkonini berdi.
9 og'ir metallar. Silikagel sirtining gidroksil guruhlarining to'liq bog'lanishi hech qachon erishilmaydi. Qoldiq gidroksil guruhlari kichik qutbli molekulalarning birikmalarida istalmagan o'zaro ta'sirlarga va assimetrik tepaliklarga olib keladi. Qoldiq silanollarning ta'sirini bartaraf etish uchun ularni ko'proq hajmli izopropil yoki izobutil guruhlari bilan yopish (bloklash) taklif qilindi. Bunday sorbentga misol Zorbax Stabil Bond. Ikki qo'shni alkil zanjiri 3-4 metilen guruhi orqali kremniy atomlari bilan bog'langanda ham bidentat o'rnini bosuvchi moddalar qo'llaniladi. Ushbu "ko'prik" qoldiq gidroksil guruhlarini yopadi va bunday fazalar hatto yuqori pH sharoitida ham barqarordir.< 12 (Zorbax Extend-С18). Силикагели со средними размерами пор, 80, 100, 120 Å, применяют для разделения низкомолекулярных соединений, силикагели с порами 300 Å и более для разделения макробиомолекул. Как известно, поверхность белковой глобулы богата гидрофильными аминокислотами, но в то же время содержит немало (до половины от их общего содержания) гидрофобных остатков, нередко образующих скопления (" гроздья"). Такие гидрофобные зоны, развитые в большей или меньшей степени, представляют xarakterli xususiyat hidrofobik xromatografiya usuli asos bo'lgan har bir oqsilning tuzilishi. Tegishli sorbentlar hidrofilik matritsaga, masalan, o'zaro bog'langan Sefaroza agarozaga hidrofobik qismlarni kiritish orqali sintezlanadi. Xususan, oktil- va fenilsefaroza shu printsip asosida qurilgan: Protein eritmasi fenilsefaroza orqali o'tkazilganda, oqsil yuzasining hidrofobik joylari fenil guruhlari bilan aloqa hosil qiladi va bu tuzilmalarga qo'shni suv molekulalarini siqib chiqaradi. Turli xil oqsillar uchun bunday kontaktlarning soni va kuchi juda farq qiladi. Ularning kuchini oshirish, masalan, konsentrlangan tuz eritmalaridan oqsillarni sorbsiyalash orqali yordam beradi.
10 ammoniy sulfat. Fenilsefaroza bilan kolonnadan oqib o'tadigan eritmadagi tuz konsentratsiyasining asta-sekin kamayishi oqsillarning muqobil desorbsiyasiga olib keladi. Har xil uzunlikdagi hidrofobik alkil radikallarini katta gözenekli kremniy oksidiga qo'shish orqali olingan sorbentlar ham xuddi shunday ta'sir qiladi. Ular qattiq va yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC) ostida yuqori bosimlarda ishlash uchun ayniqsa mos keladi. Uzun C 18 uglevodorod zanjirlarini o'z ichiga olganlar juda kuchli, ko'pincha qaytarib bo'lmaydigan bog'lanish tufayli oqsillarni ajratish uchun kam qo'llaniladi, ammo peptid xromatografiyasi uchun ishlatilishi mumkin. Eng yaxshi natijalar qisqaroq C 4 -C 8 uglevodorod zanjirlarini o'z ichiga olgan sorbentlarda oqsillarni xromatografiya qilish orqali olinadi. Gidrofobik xromatografiya ko'pincha boshqa effektlar bilan birlashtiriladi. Misol uchun, siyanogen bromid faollashtirilgan sefarozaga turli uzunlikdagi diaminlar qo'shilishi ikkita katyonik guruh bilan birga gidrobik uglevodorod zanjirlarini o'z ichiga olgan sorbentlarni beradi. Hidrofob sorbent va anionit xususiyatlarini bir xromatografik materialda birlashtirish uning imkoniyatlarini boyitadi. Hidrofob sorbentda xromatografiya uchun yuqorida tavsiflangan usul yagona mumkin bo'lgan usuldan uzoqdir. Proteinlarni sorbtsiya qilish uchun eritmaga ko'tarilgan tuz konsentratsiyasini kiritish shart emas va elutsiya uchun organik erituvchilar qo'shilishi, pH ning siljishi ishlatilishi mumkin. Ba'zi hollarda oqsillarni bog'lash hidrofobik va ionli o'zaro ta'sirlarning kombinatsiyasiga asoslangan bo'lsa, tuz eritmalari bilan elyusiya yaxshi natija beradi. Shuni ham yodda tutingki, hidrofobik xromatografiya belgilari oqsillarni ajratishning boshqa usullarida, ayniqsa yaqinlik xromatografiyasida ham uchraydi. Har yili AQShning Pitsburg konferentsiyasi va ko'rgazmasida HPLC uchun o'nlab yangi sorbentlar taklif etiladi va ular yangi yo'nalishlar va tendentsiyalarni baholash uchun ishlatilishi mumkin. Firmalar ustunlarning keng assortimentini taklif qiladi: ustun uzunligi 10 dan 250 mm gacha, ichki diametrlari esa 1 dan 50 mm gacha. HPLC uskunasi Zamonaviy suyuq xromatograflar uchta versiyada ishlab chiqariladi: blok-modulli, monoblokli va oraliq (bir blokdagi modulli dizayn). Modulli qurilma konfiguratsiyasini tanlash tomonidan belgilanadi analitik muammo... Modulli tizim ma'lum bir tizimni minimal xarajatlar bilan tez va oson yig'ish imkonini beradi. Moslashuvchan blok-modulli tizim asosida oddiy texnologik muammolarni hal qilish va murakkab tadqiqot o'lchovlarini bajarish uchun mos keladigan bloklarni ko'paytirish bilan oddiy qurilmalarni ham, murakkab qurilmalarni ham yaratish mumkin.
11 Monoblok tizimi ba'zan maxsus maxsus vazifalar uchun foydalidir. O'zgartirilishi mumkin bo'lgan birliklarga ega integratsiyalashgan tizim ham xuddi shunday afzalliklarga ega. Hozirgi vaqtda suyuq xromatograflarning quyidagi turlari ketma-ket ishlab chiqariladi: yuqori bosimli (yopiq tizimlar), gradientli, izokratik, preparativ, ionli, eksklyuziv, past bosimli ( ochiq tizimlar), ko'p o'lchovli, onlayn analizatorlar, yuqori haroratli uzluksiz, qarshi oqim, harakatlanuvchi yotoq, aminokislotalar analizatorlari. Ushbu suyuq xromatograflar to'plami quyidagi aniqlash tizimlarini o'z ichiga olishi mumkin: o'zgaruvchan to'lqin uzunligiga ega UV-Vis fotometrlari, qattiq to'lqin uzunliklari (filtrlar bilan), skanerlash, fotodiod qatorli, refraktometrik, floresans, elektrokimyoviy, kondüktometrik, amperometrik, yorug'lik tarqalishi, kimyoviy tarqalish. , mass-spektrometrik, chiral, mikrokolonnali, radioaktiv, IR-spektroskopik, alangali ionlanish va boshqalar. Mikro va nanokolonnali HPLC rivojlanmoqda. Xromatograf sxemasi: 1-nasos 2-namuna quyish moslamasi 3-xromatografik kolonka 4-detektor 5-registrator 6-ustunli termostat 7-eluent tayyorlash uchun birlik 8-eluat yoki fraksiya kollektorining drenaji
HPLC qo'llanilishining 12 sohalari HPLC usullari farmakopeyalarga rasmiy usullar sifatida kirdi turli mamlakatlar, EPKda (AQSh Atrof-muhitning ifloslanishini tahlil qilish agentligi), GOSTlarda va ko'plab zararli birikmalarni tahlil qilish bo'yicha tavsiyalarda. HPLC usullari bilan atrof-muhit ifloslanishini monitoring qilishda neft mahsulotlari er usti va ichimlik suvlarida aniqlanadi; suvdagi, tuproqdagi pestitsidlar; suvdagi ftalatlar; aromatik aminlar va ko'p yadroli aromatik birikmalar oziq-ovqat va suvda; fenol, xlorofenol va nitrofenollar ichimlik suvi; oziq-ovqat tarkibidagi nitrozaminlar; suv, tuproq va oziq-ovqat tarkibidagi og'ir metallar; oziq-ovqat va ozuqa tarkibidagi mikotoksinlar (aflatoksinlar, zearalenon va boshqalar) va boshqa ko'plab ifloslantiruvchi moddalar. HPLC biokimyoviy markerlarini tahlil qilish orqali kasalliklarni erta tashxislash aholini ommaviy tibbiy ko'rikdan o'tkazish va xavfli kasalliklarni aniqlashda biokimyoviy belgilar va metabolitlarni aniqlash uchun tobora ko'proq foydalanilmoqda. Odatda, kasalliklarni tashxislash uchun faqat markerlarni aniqlash kifoya qiladi, ammo ba'zi hollarda ko'plab komponentlar darajasining metabolik profilini aniqlash talab etiladi. Biologik markerlar nisbatan kichik molekulalar: katexolaminlar, aminokislotalar (homosistein), indollar, nukleozidlar, porfirinlar, qandlar, steroidlar, gormonlar, vitaminlar, pterinlar va lipidlardir. Ba'zi hollarda katta molekulalar ham qo'llaniladi: fermentlar, oqsillar, nuklein kislotalar... Bemorlarda fiziologik suyuqliklarning kontsentratsiya profili turli kasalliklar sog'lom odamlarning profilidan sezilarli darajada farq qilishi mumkin. Bu ko'rsatkich irsiy metabolik kasalliklarga chalingan bemorlarda aniqlanishi kerak. Bundan tashqari, saraton, yurak-qon tomir, ruhiy va nevrologik kasalliklar, shuningdek, diabet va porfiriyaz holatlarida maxsus tahlillar o'tkaziladi. Tana suyuqliklarining kontsentratsion profili ma'lum alomatlari bo'lgan bemorlarda aniqlanadi, ammo bu kasallikning aniq tashxisini ta'minlamaydi. Yaqinda OITS bilan kasallangan bemorlarning profilida o'zgartirilgan nukleozidlar paydo bo'lishi ko'rsatildi. Murakkab va ko'p komponentli biologik suyuqliklar kabi ob'ektlarni tahlil qilish uchun yuqori haroratlarda ko'plab biologik faol birikmalarning beqarorligi nuqtai nazaridan gaz xromatografiyasidan aniq afzalliklarga ega bo'lgan yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi mos keladi. Biologik suyuqliklardagi ko'plab markerlarning tarkibi r darajasida bo'ladi, shuning uchun ularni aniqlash uchun yuqori sezgir va selektiv detektorlar, xususan, amperometrik va floresan detektorlar talab qilinadi. Tahlil qilish maqsadga muvofiqdir
13 tasi tezda, 5-20 daqiqa ichida bajarildi. Hozirgi vaqtda butun dunyo bo'ylab tibbiyot markazlarida biokimyoviy belgilar tahlili bilan 200 dan ortiq metabolik kasalliklar allaqachon aniqlangan. Biokimyoda tadqiqot va tahlil HPLC biologik birikmalarni ajratish uchun eng keng qo'llaniladi: oqsillar, fermentlar, shakar, lipidlar, aminokislotalar, peptidlar, vitaminlar va boshqalar Proteomikaning rivojlanishi bilan bog'liq holda, oqsillarni ajratish va tahlil qilishga qiziqish. , peptidlar va aminokislotalar keskin oshdi. HPLC usuli dori-membrana, dori-oqsil o'zaro ta'sirini o'rganish va oqsillarning oksidlanish darajasini baholash uchun ishlatiladi. Xromatografik ko'rsatkichlar va biologik xususiyatlar o'rtasidagi o'rnatilgan bog'liqlik farmatsevtikada yangi dori vositalari va boshqa biologik faol birikmalarni yanada ongli ravishda izlash imkonini beradi. HPLC dori metabolitlarini o'rganish, allergenlarni ajratish va ajratish, farmakokinetik jarayonlarni o'rganishning eng muhim usullaridan biridir. yilda ishlab chiqilgan sanoat miqyosi enantiomerik preparatlarni ajratish.

2.2.29. YUQORI FOYDALANISH SUYUQLAR XROMATOGRAFIYASI Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC) moddalarni bir-biriga aralashmaydigan ikkita suyuqlik oʻrtasida turlicha taqsimlashga asoslangan ajratish usulidir.

8. Savollar 1. Xromatografiya ta’rifini bering. 2. Xromatografiyaning qanday xususiyatlari o'xshash xossalarga ega bo'lgan moddalarni boshqa ajratish usullariga nisbatan yaxshiroq ajratishga erishish imkonini beradi. 3. Ro'yxat
6-ma'ruza Xromatografik tahlil usullari Ma'ruza rejasi 1. Xromatografiya tushunchalari va atamalari. 2. Xromatografik tahlil usullarining tasnifi. Xromatografik uskunalar. 3. Xromatografiya turlari: gazli,
Moskva fizika-texnika instituti (Davlat universiteti) Molekulyar va biologik fizika kafedrasi Fizik tadqiqot usullari 9-ma'ruza Suyuqlik xromatografiyasi usullari va texnologiyasi
Professor Anatoliy Glebovich Kochetov Assistant Olga Viktorovna Lyang AST, ALT: Reitman Frenkel va kinetik usul bo'yicha Biologik ixtiro yoki vizualizatsiya kimyoviy reaksiya yoki jismoniy jarayon
7-MA’RUZA XROMATOGRAFIYA AYIRISH, ANSIKLASH VA MIQDARNI ANIQLASH USULI OLARAK Tayanch tushuncha va ta’riflar Xromatografik usullarning turli tasniflari Kimyosorbsion xromatografiya.
Xromatografiyaning kashfiyoti (1903) MIKHAIL SEMENOVICH TSVET (1872-1919) Xromatografiya rivojlanishining asosiy bosqichlari 1903 yil Xromatografiyaning ochilishi (Tsvet MS) 1938 yil Yupqa qatlamli yoki planar xromatografiya (Izmailov).
Analitik kimyo 4 semestr, 17-ma'ruza. Modul 3. Xromatografiya va boshqa tahlil usullari. Xromatografiya. Usullarning printsipi va tasnifi. 1. Xromatografik ajratish prinsipi. Statsionar va mobil
ROSSIYA MILLIY TADQIQOT FILIALLARI VAZIRLIGI TOMSK DAVLAT KIMYO FAKULTETI UNIVERSITETI Fanning izohli ish dasturi Tahlilning xromatografik usullari O'quv yo'nalishi.
04.07 Moskva Fizika va texnologiya instituti Molekulyar va biologik fizika kafedrasi Fizik tadqiqot usullari 8-ma'ruza Xromatografiya Dolgoprudny, 6 aprel, 07. Reja. Kelib chiqish tarixi
V.D. O. V. Shatts SAXARTOVA YUQORI SAMARALI SUYUQLAR XROMATOGRAFIYASI Nazariya asoslari. Metodologiya. Tibbiy kimyoda qo'llanilishi. MUQADDIMA Zamonaviy rivojlanish kimyo va biologiya fanlari talab qilinadi
FEDERAL TA'LIM AGENTLIGI Davlat ta'lim muassasasi oliy kasbiy ta'lim "Ural davlat universiteti A.M. Gorkiy "Ekologiya va tabiatdan foydalanish" ilmiy-tadqiqot va rivojlanish markazi
03.04.01 “Analitik kimyo” oʻquv profili boʻyicha kimyo yoʻnalishi boʻyicha “Xromatografik tahlil usullariga kirish” oʻquv fanining ish dasturiga ANNOTAT 1. Fanni oʻzlashtirish vazifalari.
Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash Vazirligi UMUMIY FARMAKOPI MAQOLA Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi OFS.1.2.1.2.0005.15 San'at o'rniga. GF XI Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (suyuqlik
Laboratoriya ishi 7b Tuproqlarning gaz fazasi tarkibini xromatografik aniqlash. Xromatografiya (yunoncha.chroma, genitiv xromatos rang, boʻyoq) — ajratish va tahlil qilishning fizik-kimyoviy usuli.
Moskva fizika-texnika instituti (Davlat universiteti) kafedrasi molekulyar fizika Fizik tadqiqot usullari Ma'ruza Gaz xromatografiyasi nazariyasi va tamoyillari Dolgoprudniy, noyabr
APP NOTE-19 / 2017LC Maestro HPLC suyuq xromatografining amperometrik detektorli tahliliy imkoniyatlari qon plazmasidagi homosisteinni aniqlash misolida keltirilgan A. Ya. Yashin, t.f.n. D., yetakchi muhandis
Biofarmatsevtik tahlil uchun Agilent AdvanceBio SEC SEC ustunlarining afzalliklari Ma'lumotlar sifatini yaxshilash uchun ustun ishlab chiqaruvchilarni taqqoslash.
BELARUSIYA DAVLAT KIMYO FAKULTETI ANALİTIK KIMYO KAFEDRASI P R O G R A M A S P E C I AL N O G O G K U R S A "XROMATOGRAFIK TAHLIL" 5 KURS Talabalari uchun.
Agilent AdvanceBio SEC Aggregation tahlili ustunlari: Asbobning mosligi Texnik ma'lumotlarga umumiy nuqtai Kirish Agilent AdvanceBio SEC ustunlari - bu yangi oila
Moskva fizika-texnika instituti (Davlat universiteti)) Molekulyar fizika kafedrasi Fizik tadqiqot usullari Ma'ruza 0 Gaz xromatografiyasi Dolgoprudniy, 5 noyabr, 0. Reja. Tarix
2 Tahlil usullari: 1. Kimyoviy usullar... Kimyoviy muvozanat va uning tahlilda qo'llanilishi. Kislota-baz muvozanati. Kislota va asoslarning kuchi, ularning o'zgarish qonuniyatlari. Hammett funktsiyasi. Hisoblash
Davlat byudjeti oliy kasb-hunar ta'limi muassasasi Sog'liqni saqlash va ijtimoiy rivojlanish vazirligining MOSKVA DAVLAT TIBBIY STOMOTİV UNIVERSITETI
VD SHATZ, OV SAXARTOVA YUKORI SAMARALI SUYUQLAR XROMATOGRAFIYASI Nazariya asoslari. Metodologiya. Tibbiyot kimyosiga tatbiq LATVIYA SSR FANLAR AKADEMİYASI MEHNAT QIZIL BAYROQ ORDANLI INSTITUTI.
Moskva fizika-texnika instituti (Davlat universiteti) Molekulyar va biologik fizika kafedrasi Fizik tadqiqot usullari 8-ma'ruza Xromatografiyada detektorlar Suyuqlik xromatografiyasi
Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash Vazirligi UMUMIY FARMAKOPEY MAQOLA Elektroforez OFS.1.2.1.0021.15 San'at o'rniga. GF XI, 1-son Elektroforez - bu zaryadlangan zarrachalarning qobiliyatiga asoslangan tahlil usuli,
Moskva fizika-texnika instituti molekulyar va biologik fizika kafedrasi Fizik tadqiqot usullari 9-ma'ruza Gaz xromatografiyasi texnikasi va eksperimental usullari Dolgoprudniy, 3 aprel.
APP NOTE-18 / 2017LC Maestro HPLC suyuq xromatografining amperometrik detektorli tahliliy imkoniyatlari, qon plazmasidagi katekolaminlarni aniqlash misolida keltirilgan A. Ya. Yashin, t.f.n. D., yetakchi muhandis
Xromatografiya nazarda tutadi tanqidiy jarayonlar instrumental tahlil. Bu, birinchi navbatda, kimyo, biokimyo va atrof-muhit tahlili kabi fan sohalarida kichik hajmlarni aniqlashda muhim rol o'ynaydi.
Federal Davlat byudjeti fan instituti "Federal Tibbiy Biologik Agentlikning Kirov nomidagi Gematologiya va qon quyish ilmiy-tadqiqot instituti" 3.3.2. Tibbiy immunobiologik
Past bosimli xromatografiya yordamida uglevodlar, spirtlar va organik kislotalarni ishonchli aniqlash Agilent Hi-Plex ligand almashinuvi HPLC ustunlari Agilent Technologies Company Agilent Hi-Plex ustunlari
FSUE NPO "RADON" Moskva Konsentratsiya va ajratish usulini ishlab chiqish va sinovdan o'tkazish va (IV) Qatronlar bo'yicha ekstraksiya xromatografiyasi yordamida Ermakov A.I. Moskva - 2013 yil 1 Sorbsion material: Emprenye qilingan
Tahlilning fizik-kimyoviy usullari Xromatografiya Xromatografiya usuli sorbsiya hodisasiga asoslanadi Sorbsiya - qattiq yoki suyuq sorbentlar tomonidan gazlar, bug'lar va erigan moddalarning so'rilishi jarayoni Turlar.
Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash Vazirligi UMUMIY FARMAKOPEY MAQOLA Gaz xromatografiyasi OFS.1.2.1.2.0004.15 San'at o'rniga. GF XI Gaz xromatografiyasi asosida uchuvchi birikmalarni ajratish usuli hisoblanadi
Gaz xromatografiyasi 1 Moddalarga qo'yiladigan talablar 1. Uchuvchanlik 2. Termik barqarorlik (modda parchalanmasdan bug'lanishi kerak) 3. Inertlik Gaz xromatografi sxemasi 1 2 3 4 5 1. Tashuvchi gaz balloni
Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash Vazirligi UMUMIY FARMAKOPEY MAQOLA Yupqa qatlamli xromatografiya OFS.1.2.1.2.0003.15 San'at o'rniga. GF XI, 1-son Harakat paytida yuzaga keladigan xromatografik jarayon
Moskva fizika-texnika instituti (Davlat universiteti) Molekulyar va biologik fizika kafedrasi Fizik tadqiqot usullari 7-ma'ruza Gaz va suyuqlik xromatografiyasi. Amaliy
141 Transformator moyida ionolni nazorat qilish uchun HPLC mikrokolonnasini qo'llash Rudakov O.B., Fan Vinh Thin Voronej davlat arxitektura va qurilish universiteti, Voronej Podolina E.A. Elektrostalskiy
46. ​​XROMATOGRAFIK AYRISH USULLARI Xromatografik ajratish usullari ko'p bosqichli ajratish usullari deb ataladi, bunda namunaning tarkibiy qismlari statsionar va harakatlanuvchi ikki faza o'rtasida taqsimlanadi. Statsionar
ELSTYSKIN, LBITSIKSON, EVBRAUDE Amaliy Yuqori samarali Suyuq XROMATOGRAFIYA Kirish versiyasi Moskva. 1986 MUNDARIJA Muqaddima ... Kirish ... 1-BOB. NAZARIYA ASOSLARI VA ASOSLARI.
Moskva fizika-texnika instituti (Davlat universiteti)) Molekulyar fizika kafedrasi Fizik tadqiqot usullari 9-ma'ruza Xromatografiya. Kirish Dolgoprudniy, 9 oktyabr, 0 Reja.
FEDERAL TA'LIM AGENTLIGI "Oliy kasb-hunar ta'limi" davlat ta'lim muassasasi "Ural davlat universiteti" A.M. Gorkiy "Ekologiya va tabiatdan foydalanish" ilmiy-tadqiqot va rivojlanish markazi
Mavzu. Yuzaki hodisalarning fizik-kimyosi. Adsorbsiya. Yuzaki hodisalar heterojen tizimlarda o'zini namoyon qiladi, ya'ni. ularning tarkibiy qismlari o'rtasida bo'linish yuzasiga ega bo'lgan tizimlar. Yuzaki hodisalar
848 Materiallar bo'yicha QISQA Izohlar XII Xalqaro konferensiya"Ion almashinuvi jarayonlarining fizik-kimyoviy asoslari (IONITY-2010)" UDC 541 Yuqori samarali anion almashinuvi usuli bilan shakar, aminokislotalarni aniqlash
ZAMONAVIY TAYYORLANGAN FLESH XROMATOGRAFIYASI 2-qism * A. Abolin, PhD, GalaChem [e-mail] P.-F. Icarus, Interchim (Frantsiya) Biz tayyorgarlikning zamonaviy usullari bo'yicha materiallarni nashr etishda davom etamiz
ROSSIYA FEDERATSIYASI TA'LIM VA FAN VAZIRLIGI MOSKVA FIZIKA-TEXNIK INSTITUTI (DAVLAT UNIVERSITETI) Molekulyar va biologik fizika kafedrasi YUQORI SAMARALI SUYUQLAR XROMATOGRAFIYASI.
Tavricheskiy nomidagi Milliy universitetining ilmiy yozuvlari V. I. Vernadskiy "Biologiya, kimyo" turkumi 17-jild (56). 2004.1.S. 150-155. UDC 577.322: 537.632.5 Ba'zi gidrofobik ligandlarning SPEKTRALGA TA'SIRI
Biologik membranalardagi fizik jarayonlar Mualliflar: A.A. Kyagova, A. Ya. Potapenko I. Tuzilishi, vazifalari jismoniy xususiyatlar biologik membranalar 1) tuzilishi Fosfolipid ikki qavatli fosfolipid molekulalari
273 UDC 543. 544 AMİNATLI b-siklodekstrinda aminokislota ENANTIOMER HOSULALARINI YUKORI SAMARALI SUYUQ XROMATOGRAFIYA USUL BILAN AYRISH I. A. Ananyeva, E. N. Shapovalova, S.
“FLUORAT-02-PANORAMA” SPEKTROFLUORIMETRIK detektori bilan yuqori samaradorlikdagi SUYUQLIK XROMATOGRAFI. Bu spektrofluorimetrik sifatida ishlatiladigan "FLUORAT-02-PANORAMA" suyuqlik analizatoridir.
1. Tushuntirish xati 1.1. Talabalarga qo'yiladigan talablar Talaba quyidagi boshlang'ich kompetensiyalarga ega bo'lishi kerak: matematikaning asosiy qoidalari va tabiiy fanlar; mustaqillik ko‘nikmalariga ega bo‘lish
Ochiq matbuotda e'lon qilinishi sharti bilan Agilent 1100, Agilent 100 o'lchov vositalarining davlat reestrida ro'yxatga olingan Suyuq xromatograflar A6 ro'yxatida yotadi. Buning o'rniga texnik hujjatlarga muvofiq chiqarilgan
QOZOGISTON RESPUBLIKASI TA’LIM VA FAN VAZIRLIGI SHAKARIM NOMIDAGI OILALAR SHAHRI DAVLAT UNIVERSITETI 3-darajali QMS hujjati “Tanlov komponentining 3-darajali UP KV UP KV TA’LIM DASTURI” “08” tahriri.
Oliy kasbiy ta'lim davlat ta'lim muassasasi ta'lim federal agentligi Vladimir davlat universiteti V.G. AMELIN XROMATOGRAFIK TAHLIL USULLARI
Bitta Crystalning barcha yuzlari 09-312-6029EN Yo'riqnomalar Neft mahsulotlari. O'rta distillatlarda aromatik uglevodorodlarning turlarini aniqlash. Yuqori samarali suyuqlik xromatografiya usuli bilan
7-ma'ruza. YUTUV HODISALARI 1. Yuzaki taranglik 1.1. Yuzaki energiya. Hozirgacha biz turli xil media * o'rtasidagi interfeys mavjudligini hisobga olmadik. Biroq, uning mavjudligi juda bo'lishi mumkin
O'quv rejasi OSVO 1-31 05 01 2013 ta'lim standartiga asoslangan va o'quv dasturi UVO G 31 153 / uch. 2013 yil MUSTAFOR: V.A.Vinarskiy, dotsent, kimyo fanlari nomzodi, dotsent TAVSIYA ETILGAN.
1 Yuqori molekulyar birikmalar (Lysenko E. A.) Ma’ruza 7. Makromolekulaning fraksiyasi 2 1. Fraksiyalanish tushunchasi. 2. Tayyorlovchi fraksiyalash. 3. Turbidimetrik titrlash usuli. 4. Jel ichiga kirib boruvchi
08, jild http://dx.doi.org/0.6787/nydha-68-878-08---07- TAYYORLASH MEGOSIN VA UNING MURAJBEK MURAJAK MEGAFERON MEGAFERON MURAJASINI TADQIQOTLARNI STANDARTLASHTIRISHGA ILMIY YONDORISh, Nazirova Ya.Ziyaev. , Xaitboev A.A
Agilent SureMass texnik sharhi Izoh Qo'lda tahlil qilish yoki dasturiy ta'minotning eng yuqori qismini ajratish an'anaviy ravishda izolyatsiya qilish uchun to'liq spektrli GC / MS xromatogrammalarini tahlil qilishda qo'llaniladi.
Xromatografiyaning kashshofi rus olimi, botanik va fizik-kimyogari Mixail Semyonovich Tsvet edi.
Xromatografiyaning kashfiyoti Tsvet Sankt-Peterburgda magistrlik dissertatsiyasini tamomlagan (1900 - 1902) va Varshavadagi birinchi ish davri (1902 - 1903) davriga to'g'ri keladi. Tsvet o'simlik pigmentlarini o'rganib, adsorbent - kukunli kaltsiy karbonat bilan to'ldirilgan trubka orqali rangi jihatidan farq qiluvchi juda kam pigmentlar aralashmasidan iborat eritmani o'tkazdi, so'ngra adsorbentni toza erituvchi bilan yuvdi. Aralashmaning alohida komponentlari ajratilgan va rangli chiziqlar hosil qilgan. Zamonaviy terminologiyaga ko'ra, Tsvet xromatografiyaning rivojlanayotgan variantini (rivojlanayotgan suyuqlik-adsorbsion xromatografiya) kashf etdi. Tsvet o'zi yaratgan xromatografiya variantini ishlab chiqish bo'yicha tadqiqotlarning asosiy natijalarini o'zining doktorlik dissertatsiyasi bo'lgan "O'simlik va hayvonot dunyosidagi xromofillar" (1910) kitobida taqdim etdi. gaz cho'kindi ion almashinuvi xromatografiyasi
Tsvet xromatografik usulni nafaqat aralashmani ajratish va uning ko'p komponentliligini aniqlash, balki miqdoriy tahlil qilish uchun ham keng qo'llagan, shu maqsadda u shisha ustunni sindirib, adsorbent ustunni qatlamlarga kesib tashlagan. Tsvet suyuq xromatografiya uchun asbob-uskunalar ishlab chiqdi, birinchi marta pasaytirilgan bosim (evakuatsiya) ostida va biroz ortiqcha bosim ostida xromatografik jarayonlarni amalga oshirdi, samarali ustunlar tayyorlash bo'yicha tavsiyalar ishlab chiqdi. Bundan tashqari, u yangi usulning ko'pgina asosiy tushunchalari va atamalarini kiritdi, masalan, "xromatografiya", "rivojlanish", "o'zgartirish", "xromatogramma" va boshqalar.
Xromatografiya dastlab juda kamdan-kam qo'llanilgan, uning kechikish davri taxminan 20 yil davom etgan, bu vaqt davomida usulning turli xil qo'llanilishi bo'yicha juda oz sonli hisobotlar mavjud edi. Va faqat 1931 yilda ishlagan R.Kun (Germaniya) A.Vintersteyn (Germaniya) va E.Lederer (Fransiya) kimyoviy laboratoriya Geydelbergdagi imperator Vilgelm tibbiy tadqiqotlar instituti (R.Kun boshchiligida) ushbu usul bilan a- va b-karotinni xom karotindan ajratib olishga muvaffaq bo'ldi va shu bilan Rang kashfiyotining ahamiyatini ko'rsatdi.
Xromatografiya rivojlanishining muhim bosqichi sovet olimlari N.A. Izmailov va M.S. Shrayber tomonidan yupqa qatlamda xromatografiya usuli (1938), bu moddaning iz miqdori bilan tahlil qilish imkonini beradi.
Keyingi muhim qadam, A. Martin va R. Sing (Angliya) tomonidan xloroform yordamida suv bilan to'yingan silikagel bilan to'ldirilgan kolonnada aminokislotalarning atsetil hosilalarini ajratish misolida suyuq bo'linish xromatografiyasining variantini kashf qilish edi. erituvchi (1940). Shu bilan birga, mobil faza sifatida nafaqat suyuqlik, balki gazdan ham foydalanish mumkinligi qayd etildi. Bir necha yil o'tgach, bu olimlar mobil faza sifatida butanol bilan suv bilan namlangan qog'ozda aminokislota hosilalarini ajratishni taklif qilishdi. Ular birinchi ikki o'lchovli ajratish tizimini ham amalga oshirdilar. Martin va Sing xromatografiyaning tarqalish variantini kashf etganlari uchun kimyo bo'yicha Nobel mukofotiga sazovor bo'lishdi. (1952). Keyin Martin va A. Jeyms DS-550 silikon va stearin kislotasidan (1952 - 1953) tayyorlangan aralash sorbentda aralashmani ajratib, gaz taqsimlash xromatografiyasining variantini amalga oshirdilar. O'sha vaqtdan beri eng jadal rivojlanish gaz xromatografiyasi usuli bo'ldi.
Gaz xromatografiyasining variantlaridan biri xromatografiya bo'lib, unda gazlar aralashmasini ajratishni yaxshilash uchun harakatlanuvchi faza - gaz harakati bilan bir vaqtda sorbent va ajratilgan aralashmaga harakatlanuvchi harorat maydoni ta'sir qiladi. uzunligi bo'ylab ma'lum bir gradient (AA Juxovitskiy va boshq., 1951) ...
Xromatografik usulning rivojlanishiga ion almashinadigan xromatografiya asoschisi (1937 - 1940) G. Shvab (Germaniya) katta hissa qo'shdi. U sovet olimlari E.N.ning asarlarida yanada rivojlantirildi. Gapon va T.B. Eritmadagi ionlar aralashmasini xromatografik ajratishni amalga oshirgan (F.M.Shemyakin, 1947), shuningdek, Tsvetning eruvchanlik farqiga qarab moddalar aralashmasini xromatografik ajratish imkoniyati to'g'risidagi g'oyasini amalga oshirgan Gapon. qiyin eriydigan cho'kmalarning (cho'kindi xromatografiyasi, 1948).
Ion almashinish xromatografiyasining rivojlanishining zamonaviy bosqichi 1975 yilda G.Smoll, T.Stivens va V.Bauman (AQSh) ishlaridan soʻng boshlandi, bunda ular ion xromatografiyasi (yuqori samarali ion varianti) deb nomlangan yangi analitik usulni taklif qildilar. konduktometrik aniqlash bilan almashinish xromatografiyasi).
Perkin-Elmer kompaniyasining xodimi M. Golei (AQSh) tomonidan xromatografiyaning kapillyar variantini yaratish (1956) alohida ahamiyatga ega bo'lib, unda kapillyar naychaning ichki devorlariga sorbent qo'llaniladi, bu esa buni amalga oshirishga imkon beradi. ko'p komponentli aralashmalarning iz miqdorini tahlil qilish.
60-yillarning oxirlarida. suyuq xromatografiyaga qiziqish keskin ortdi. Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC) joriy etildi. Bunga yuqori sezgir detektorlar, yangi selektiv polimer sorbentlar va yuqori bosimlarda ishlash imkonini beradigan yangi uskunalarni yaratish yordam berdi. Hozirgi vaqtda HPLC boshqa xromatografik usullar orasida etakchi o'rinni egallaydi va turli xil versiyalarda qo'llaniladi.
1.Kirish.
2. Xromatografiyaning paydo bo'lishi va rivojlanishi.
3. Xromatografik usullarning tasnifi.
4. Qattiq statsionar fazada xromatografiya:
a) gaz (gaz adsorbsion) xromatografiyasi;
b) suyuq (suyuqlik-adsorbsion) xromatografiya.
5. Suyuq statsionar fazada xromatografiya:
a) gaz-suyuqlik xromatografiyasi;
b) gel xromatografiyasi.
6. Xulosa.

Spektrning nurlari sifatida, kaltsiy karbonat ustunida pigmentlar aralashmasining turli komponentlari muntazam ravishda taqsimlanadi, bu ularning yuqori sifatli va sifatli bo'lishiga imkon beradi. miqdoriy aniqlash... Men shu tarzda olingan preparatni xromatogramma, taklif qilingan texnikani esa xromatografik deb atayman.

M.S.Tsvet, 1906 yil
Kirish
Moddalar aralashmasini ajratish va tahlil qilish zarurati nafaqat kimyogar, balki boshqa ko'plab mutaxassislar tomonidan ham duch keladi.
Kimyoviy va fizik-kimyoviy ajratish, tahlil qilish, tuzilishi va xususiyatlarini o'rganishning kuchli arsenalida. kimyoviy birikmalar va ularning murakkab aralashmalari yetakchi oʻrinlardan birini xromatografiya egallaydi.
Xromatografiya - bu gazlar, bug'lar, suyuqliklar yoki erigan moddalar aralashmalarini ajratish va tahlil qilish va aniqlash uchun fizik-kimyoviy usul. fizik va kimyoviy xossalari Aralashmalarning ajratilgan komponentlarini ikki faza o'rtasida taqsimlashga asoslangan individual moddalar: mobil va statsionar. Statsionar fazani tashkil etuvchi moddalar sorbentlar deyiladi. Statsionar faza qattiq yoki suyuq bo'lishi mumkin. Mobil faza - bu sorbent qatlami orqali filtrlangan suyuqlik yoki gaz oqimi. Mobil faza gazsimon yoki suyuq holatga aylangan tahlil qilingan moddalar aralashmasi uchun erituvchi va tashuvchi vazifasini bajaradi.
Sorbsiyaning ikki turi mavjud: adsorbsiya - moddalarning qattiq sirt tomonidan yutilishi va absorbsiya - gazlar va suyuqliklarning suyuq erituvchilarda erishi.