Deneysel parkinson hastaliğinda dokosaheksaenoik asiDİn nörodejenerasyondaki yeri ve etki mekanizmasi

DENEYSEL PARKİNSON HASTALIĞINDA DOKOSAHEKSAENOİK ASİDİN NÖRODEJENERASYONDAKİ YERİ VE ETKİ MEKANİZMASI
Gülay HACIOĞLU
Akdeniz Üniversitesi Tıp Fakültesi, Fizyoloji Anabilim Dalı, ANTALYA

Dokosaheksaenoik asit (DHA), beyin hücre membranlarının fosfolipid tabakasında bulunan ve normal hücresel fonksiyon için elzem olan temel doymamış yağ asididir. Çalışmanın amacı, deneysel Parkinson modeli oluşturulan yetişkin sıçanlarda, DHA uygulamasının etkisini incelemektir. Sıçanlar rasgele olarak 4 gruba ayrılmıştır: Kontrol, DHA verilen grup, deneysel Parkinson oluşturulan grup, deneysel Parkinson oluşturulan + DHA verilen grup. DHA gruplarına, 4 hafta boyunca gavaj yoluyla 36 mg/kg/gün dozunda DHA verilmiştir. Parkinson grubunda, MPTP toksini çift taraflı olarak median ön beyin demeti içine mikroenjeksiyon yoluyla uygulanmıştır. Sıçanların motor aktivitesi “vertical pole” ve “vertical wire” testleri ile değerlendirilmiştir. Substansiya nigra (SN)daki hücre ölümü, DNA kırıklarının enzimatik olarak işaretlenmesiyle (TUNEL yöntemi) tespit edilmiştir. Kaspaz-3, Bcl-2 ve iNOS proteinlerinin yoğunluğu immünohistokimyasal analiz ile değerlendirilmiştir. iNOS mRNA düzeyi RT-PCR yöntemi ile saptanmıştır. Parkinson modeli oluşturulan hayvanlarda belirgin aktivite azlığı, motor koordinasyon ve denge kaybı tespit edilmiştir. DHA alan Parkinson grubunda ise parkinsonizm belirtilerinin hafiflediği saptanmıştır. Bunun yanında, DHA alımı Parkinson grubunda dopaminerjik hücre ölümünü azaltmıştır. iNOS mRNA’sı grupların hiçbirinde saptanmamıştır. Buna karşın, immünohistokimyasal olarak tayin edilen iNOS protein ekspresyonunun Parkinson grubunda diğer gruplara göre daha kuvvetli olduğu gözlenmiştir. Parkinson oluşturulup DHA verilen grupta ise iNOS ekspresyonu belirgin biçimde düşmüştür. Bcl-2 ve kaspaz-3 ekspresyonu Parkinson grubunda düşük yoğunlukta izlenmiştir. DHA ve Parkinson+DHA gruplarında Bcl-2 ekspresyonu aynı yoğunlukta gözlenirken, her ikisinde de Bcl-2 reaksiyon şiddetinin Parkinson grubuna göre daha yüksek olduğu tespit edilmiştir. Bu çalışmanın sonuçları, MPTP ile oluşturulan deneysel Parkinson modelinde DHA alımının dopaminerjik nöronları apoptotik hücre ölümüne karşı koruduğunu göstermektedir.
Anahtar kelimeler: Parkinson, MPTP, dokosaheksaenoik asit, apoptoz

THE EFFECT AND INFLUENCE MECHANISM OF DOCOSAHEXAENOIC ACID ON NEURODEGENERATION IN EXPERIMENTAL PARKINSON DISEASE
Gulay HACIOGLU
Akdeniz University Faculty of Medicine, Department of Physiology, ANTALYA
Docosahexaenoic acid (DHA) is the major polyunsaturated fatty acid in the phospholipids fractions of the brain and is required for normal cellular function. The aim of this study was to observe the effects of DHA supplementation on experimental Parkinson in adult rats. The rats were randomly divided into 4 groups: Control, DHA-treated, Parkinson-induced, and Parkinson-induced + DHA-treated. In the DHA-treated groups, DHA was supplied daily by gavage for 4 weeks at a dose of 36 mg/kg/day. In the Parkinson group, MPTP was microinjected bilaterally into median forebrain bundle. Motor activity of the rats was observed by the “vertical pole” and “vertical wire” tests. Apoptosis in SN was detected by enzymatic labeling of DNA strand breaks using TUNEL method. Caspase-3, Bcl-2 and iNOS protein density were evaluated by immunohistochemistry. Analysis of iNOS mRNA expression was performed by RT-PCR. Animals with experimental Parkinson model exhibited decreased locomotor activity and motor coordination and loss in sense of balance. Diminished Parkinsonism symptoms were detected in DHA supplemented group. DHA supplementation also decreased dopaminergic neuron death in Parkinson+DHA group. iNOS mRNA expression was not detected in any of the studied groups. However, a greater iNOS protein expression was observed in the Parkinson group compared to others. iNOS protein expression was significantly lower in the DHA treated Parkinson group. Bcl-2 and caspase-3 expressions were also lower in the Parkinson group. Additionally, Bcl-2 expression density was similar in DHA and Parkinson+DHA groups, while Bcl-2 was higher in both groups in comparison with Pakinson animals. In conclusion, DHA supplementation in MPTP-induced experimental Parkinson model significantly protects dopaminergic neurons against apoptotic cell death.
Key words: Parkinson, MPTP, docosahexaenoic acid, apoptosis