Patientnära analyser

Patientnära analyser Sida av 3

Dokumenttyp:	Metodbeskrivning
Dokumentnamn:	CRP C-Reaktivt protein B S , Afinion AS100

Medicinsk bakgrund

CRP syntetiseras i levern och utsöndras till plasma där den är ett av de snabbast stigande akutfasproteinerna med en halveringstid på några timmar. Proteinets funktion är ofullständigt känd, men genom att bindas till olika substanser från skadade celler och mikroorganismer, leder det till att komplementsystemet aktiveras. CRP har också betydelse för fagocytosen och T-lymfocyternas funktion. Det stiger vid sjukdomar med cellsönderfall som aseptiska nekroser, vissa kroniska inflammatoriska tillstånd och ibland vid maligna tillstånd. CRP ökar kraftigt inom några timmar vid bakteriella infektioner och celldestruktion som efter en operation, men ökar bara marginellt vid okomplicerade viroser.

Litteraturreferens nr 1.

Instrument och mätprincip

AfinionTM AS100

AfinionTM CRP testkassett

Leverantör: Alere AB

AfinionTM testkasett innehåller alla reagens som behövs för bestämning av CRP koncentrationen i humant helblod-, serum- eller plasmaprov. I testkassetten späds det uppsamlade provet med en vätska som också lyserar blodkropparna. Provspädningen sugs genom ett membran som är täckt med anti-CRP antikroppar. På så sätt koncentreras allt CRP i provet på detta membran. En lösning som innehåller anti-CRP antikroppar konjugerade till ultrasmå partiklar sugs sedan genom membranet. De guldmärkta antikropparna kommer att bindas till de CRP som redan bundits på membranet, som färgas röd-brunt. Överskott av guldantikroppskonjugat tvättas bort med en tvättlösning. AfinionTM AS100 instrumentet mäter färgintensiteten på membranet, som är proportionell mot mängden CRP i provet. CRP koncentrationen visas på instrumentet.

Provtagning och provhantering

Kapillärblod (direkt från fingret) måste analyseras inom 1 minut från att kapillären fyllts med blod.

Kapillär- och venblod i EDTA-rör, helblod: hållbart 5 dygn i kylskåp. Får ej frysas.

Venblod i gelrör

Centrifugeras i 5 min 22⁰C vid 2400 x g.

Hållbarhet:10 dygn i kyla i korkade rör.

Reagens

Oöppnad kassett förvarad i kylskåp, hållbar till utgångsdatum.

Oöppnad kassett förvarad i rumstemperatur, hållbar fyra veckor.

Innan analys måste kassetterna ligga framme 15 minuter i obruten folieförpackning för att uppnå rumstemperatur.

Beskrivning av testkassetten

Testkassettens två huvudkomponenter är provtagningsenheten och reagensbehållaren. Testkassetten har dessutom ett handtag, en streckkodetikett med lotspecifik information och ett ID-fält för prov-ID. Se bild och tabell nedan.

Komponent Funktion/Sammansättning

1a.Provtagningsenhet i stängt läge

1b.Kapillär 1,5 μL glaskapillär som fylls med provmaterialet.

3.Reaktionsbrunnar: Innehåller alla nödvändiga reagens för en analys:

3a.Kapillärtorkare: Plastlaminerat papper.

b.Membranrör: Rör med nitrocellulosamembran täckt med anti-CRP antikroppar.

c.Konjugatlösning: Anti-CRP antikroppar bundna till ultrasmå guldpartiklar.

d.Tvättlösning: Fosfatbuffrad NaCl och detergenter.

e.Spädingslösning: Boratbuffert med detergenter.

4.Handtag för att få korrekt grepp på testkassetten.

5.Streckkodetikett som innehåller test- och lotspecifik information för instrumentet.

6.Optisk avläsningsyta =Område för transmissionsmätning.

7.ID-fält för ID-märkning med penna eller etikett.

Kalibrering

AfinionTM CRP är kalibrerad mot ERM® –DA470 referenspreparation (CRM 470).

Internkontroll

Två nivåer, kontrollerna analyseras enligt följande: C1 och C2 varvas varannan dag. Analyseras på samma sätt som patientprov.

Färdigspädda.

Förvaras i kylskåp.

Hållbart: Oöppnad till utgångsdatum, öppnad i fyra veckor.

Kontrollerna kan användas direkt från kylskåpet utan föregående rumstemperering.

Externkontroll

Equalis PNA, se www.equalis.se

Upprättat av	Granskad av	Godkänt av	Giltigt fr o m	Dok nr-vers
Britt-Marie Huuva Gustafsson Ella Björnström