248
NAXÇIVAN DÖVLƏT UNİVERSİTETİ. ELMİ ƏSƏRLƏR, 2017, № 3 (84)
NAKHCHIVAN STATE UNIVERSITY. SCIENTIFIC WORKS, 2017, № 3 (84)
НАХЧЫВАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ. НАУЧНЫЕ ТРУДЫ, 2017, № 3 (84)
ELŞAD ƏHMƏDOV,
JALƏ HƏSƏNOVA,
FƏRİDƏ MƏMMƏDOVA,
SÜDABƏ İSMAYILZADƏ,
İSMAYIL MİKAYILZADƏ
parazitolog@mail.ru
Azərbaycan Milli Elmlər Akademiyası Zoologiya İnstitutu
UOT 576.893.192.1
EKSPERİMENTAL EİMERİOZ (Eimeria tenella) ZAMANI CÜCƏLƏRİN BƏZİ
ORQANLARINDA ALT VƏ AST FERMENTLƏRİNİN AKTİVLİYİ İLƏ QLUTAMİN VƏ
ASPARAGİN TURŞULARININ MİQDARI ARASINDA KORRELYASİYA ƏLAQƏLƏRİ
Açar sözlər: Eimeria tenella, aspratataminotransferaza, alaninaminotransferaza, qaraciyər,
beyin və bud əzələləri, qlutamin turşusu
Key words: Eimeria tenella, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы,
печен, мозг, мышц, глутаминовая кислота
Ключевые слова: Eimeria tenella, Alanine aminotransferase, Aspartate transaminase, liver,
brain, muscle, glutamic acid
Eimeria cinsinin nümayəndələri tərəfindən törədilən eimerioz quşçuluq təsərrüfatlarının
inkişafına mane olan əsas problemlərdən biridir [11,6,9]. Dünyada eimeriozdan quşçuluq
təsərrüfatlarına dəyən iqtisadi zərər ildə milyard dollar təşkil edir [14,15,13]. Ev toyuqları arasında
təsadüf edilən 9 növ eimeriadan Eimeria acervulina, E.brunetti, E.maxima, E.mivati, E.necatrix,
E.tenella patogen hesab edilir. Azərbaycanın quşçuluq təsərrüfatlarında E.acervulina, E.maxima,
Е.necatrix, E.tenella növlərinə təsadüf edilir ki, bu növlər arasında öz patogenliyi ilə xüsusi olaraq
seçilən E.tenella növünə praktiki olaraq bütün təsərrüfatlarda rast gəlinir [5].
Parazitar xəstəliklərin törədicilərinin sahibin orqanizminə təsiri ancaq onların lokalizasiya
olunduğu orqana deyil, parazitin orqanizmə ümumi təsiri ilə əlaqədardır. Müxtəlif qrup parazitlərin
bir-biri və sahib ilə qarşılıqlı münasibətləri incə molekulyar-bioloji mexanizmlərə əsaslanır. Sahibin
orqanizmində parazitin inkişaf mərhələlərinə uyğun olaraq baş verən biokimyəvi dəyişikliklərin,
xüsusilə ALT və AST kimi indikator fermetlərin öyrənilməsi nəticəsində əldə edilən məlumatlar
xəstəliyin diaqnostika və müalicəsində yeni metodların yaradılmasına elmi zəmin yaradır [8,2,3,7].
Müalicə və profilaktika tədbirlərinin aparılmasında və effektiv seçici xüsusiyyətə malik, sahibin
orqanizminə təsir etməyən yeni dərman preparatlarının yaradılması və sınaqdan keçirilməsində bu
istiqamətdə aparılan tədqiqatların nəticələrinin nəzərə alınması böyük elmi və praktiki əhəmiyyət
kəsb edir. Ədəbiyyat məlumatlarının təhlili göstərir ki, koksidiozun beyin, qaraciyər və əzələ kimi
toxumalarda fermentlərin aktivliyinə təsirinin öyrənilməsi istiqamətində aparılan tədqiqatlar çox
azdır [1,12,10]. Bu tədqiqatların hamısı broyler cücələri üzərində aparılmışdır. Digər cinslərdən
olan cücələr üzərində bu istiqamətdə aparılan tədqiqat işləri çox azdır.
Tədqiqatlarda məqsəd, yerli cinsdən olan qara toyuq cücələrinin eksperimental eimeriozu
(Eimeria tenella) zamanı qaraciyər, beyin və əzələlə toxumalarında ALT (alaninaminotransferaza)
və AST (aspartataminotransferaza) fermentlərinin aktivliyi ilə qlutamin və asparagin turşularının
midqarı arasında əlaqələri müəyyənləşdirməkdir.
Material мə Metodika
Tədqiqatlar yerli cinsdən olan 40 baş yerli qara toyuq cücələri üzərində aparılmışdır. Sutkalıq
cücələr institutun vivariumunda steril şəraitdə 20 günlük yaşa qədər standart broyler
təsərrüfatlarında istifadə edilən tərkibində antikoksidiostatik əlavələr və antibiotiklər olmayan
yemlə qidalandırılaraq böyüdülmüşdür. 20 günlük yaşa qədər böyüdülən cücələr hər birində 20 cücə
olmaqla iki, kontrol və təcrübə qruplarına ayrılmışdır. Kontrol qrupun cücələri koksidilər ilə
249
yoluxdurulmamış, təcrübə qrupun cücələri isə Eimeria tenella (Apicomplexa, Coccida, Eimeriidae)
parazitinin 20000 sporlaşmış oosistası ilə oral yolla yoluxdurulmuşdur.
Biokimyəvi analizlər üçün parazitin sahibin orqanizmində inkişaf mərhələlərinə uyğun olaraq
yoluxdurmadan 3, 5, 7 və 10 gün sonra hər dəfə 5 cücə kəsilmişdir. Kontrol qrupdan da invaziyanın
yuxarıda qeyd edilən günlərinə uyğun olaraq hər dəfə 5 cücə dekapitasiya olunmuşdur. Toxuma
homogenatlarında (qaraciyər, beyin və əzələ) ALT (alaninaminotransferaza) və AST-nin
(aspartataminotransferaza) aktivliyi dinitrofenilhidrazin (Raytman və Frenkel metodu) metodu ilə
təyin edilmişdir [4].
Bu məqsədlə quşlar dekapitasiya olunduqdan sonra tez bir anda çıxarılan orqandan 1q toxuma
götürülərək üzərinə 1:9 nisbətində 0,25M saxaroza məhlulunda hazırlanan 0,1 mM ETDA əlavə
edilərək soyuq mühitdə şüşə homogenizatorda əzilmişdir. Alınan homogenat 10 dəqiqə 5000
dövr/dəqiqə sürətlə K24 sentrifuqasında çökdürülmüşdür. Supernatant saxaroza məhlulunda 1:50
nisbətində duruldulmuşdur. AST-nin aktivliyini təyin etmək üçün sınaq şüşəsinə 0,5 ml substrat
məhlulu əlavə edilmiş və onun da üzərinə 0,1ml homogenat əlavə edilərək sınaq şüşəsi 1 saat
müddətində 37
0
C-də termostatda saxlanılmışdır. 1 saatdan sonra sınaq şüşəsinə 0,5 ml
dinitrofenilhidrazin əlavə edilib 20 dəqiqə müddətində otaq temperaturunda saxlanılmış, vaxt
tamam olandan sonra məhlulun üzərinə 5ml 0,4N NaOH məhlulu əlavə edilərək otaq
temperaturunda 10 dəqiqə rəngin intensivləşməsi üçün saxlanılmışdır. Nümunənin optiki sıxlığı 530
nm dalğa uzunluğunda ölçülmüşdür.
AST-nin aktivliyini təyin etmək üçün sınaq şüşəsinə əlavə edilən 0,5 ml substratın üzərinə 0,1
ml homogenant əlavə edilərək termostatda 30 dəqiqə müddətində 37
0
C temperaturda inkubasiya
edilmişdir. Analizin sonrakı mərhələsi ALT-nin aktivliyinin müəyyən edilməsi zamanı istifadə
olunan üsulda olduğu kimi olmuşdur. Aminotrasferazanın aktivliyinin hesablanması piroüzüm
turşusuna görə qurulan kalibrovka əyrisi əsasında hesablanmışdır. Fermentlərin aktivliyinin
hesablanmasında homogenatın duruldulması nəzərə alınmış, hesablamalarda 1 q toxumaya (mq
zülal) görə ifadə edilmişdir. ALT və AST-nin aktivliyi mkmol/ml·saat ilə ifadə edilmişdir.
Homogenatların sərbəst aminturşu tərkibi ionmübadiləli xromatoqrafiya metodu ilə öyrənilmişdir.
Rəqəm göstəriciləri 1 q yaş toxumaya görə mkmol (mkmol/1q toxuma) ilə ifadə edilmişdir.
Alınan məlumatların statistik işlənilməsində İBM Statistics 20 proqramından istifadə
edilmişdir. P<0,05 olduqda baş verən dəyişikliklərin statistik dürüst olduğu qəbul edilmişdir.
Alinan nəticələrin müzakirəsi
Alınan məlumatların analizi göstərir ki, invaziyanın prepatent dövründə yoluxdurulmuş cücələrin
qaraciyər və beyində AST-nin aktivliyi statistik dürüst dəyişikliklərə məruz qalmır. Patent dövrünün
əvvəllərində qaraciyər və beyində bu fermentin aktivliyinin artdığı qeydə alımnışdır. İnvazaziyanın 10-
cu gününə qədər qaraciyərdə AST-nin aktivliyi kontrol qrupun göstəriciləri səviyyəsinə qədər bərpa
olunur, beyində isə AST-nin aktivliyində əks istiqamətində dəyişiklik baş verir, daha doğrusu bu
fermentin iştirakı ilə baş verən pereaminləşmə proseslərinin inaktivləşməsi başlayır.
Qaraciyər və beyindən fərqli olaraq bud əzələlərində AST-nin aktivliyində dəyişikliklər artıq
invaziyanın prepatent dövründə başlayır. İnvaziyanın 3-cü və 5-ci günləri fermentin aktivliyi
normaya nisbətən 13,90% azalır. Patent dövrünün əvvəli - invaziyanın 7-ci günü, fermentin
aktivliyində qısa müddətli bərpa olunma müşahidə olunur, sonra azalmağa başlayaraq 10-cu gün
daha kəskin azalır. İnvaziyanın bu günü fermentin inaktivləşməsi kontrol qrupun göstəricilərinə
nisbətən 40,07% təşkil edir (cədvəl ).
Eimerioz zamanı qaraciyər, beyin və bud əzələlərində AST-nin aktivliyinin müqayisəli analizi
göstərir ki, normada fermentin ən yüksək aktivliyi digər orqanlara nisbətən əzələlərdə qeydə alınır.
Belə ki, yoluxdurulan cücələrin əzələlərində invaziyanın 3, 5 və 10-cü günləri AST-nin aktivliyində
statistk dürüst azalma müşahidə edilir. Beyində və qaraciyərdə isə bu fermentin iştirakı ilə baş verən
pereaminləşmə prosesləri sürətlənir.
Yuxarıda göstərildiyi kimi, xəstə quşların qaraciyərində AST-nin aktivliyi invaziyanın 7-ci
günü 10,19% artır (P<0,001). Belə ki, qaraciyərdə AST-nin aktivliyi ilə qlutamin və asparagin
turşularının miqdarı arasında müsbət statistik dürüst korrelyasiyanın (müvafiq olaraq r=+0,861 və
r=+0,688) olmasına baxmayaraq, AST-nin aktivliyinin qlutamin və asparagin turşusunun miqdarı
Dostları ilə paylaş: |