Sistematika riba
Biologija i patologija riba
Stranica 62/95
Kontrolirano mriještenje s hormonalnom stimulacijom
U Hrvatskoj se biljojedne ribe prirodno ne mrijeste. Naime, one za svoj razvoj trebaju duboke rijeke
koje poplavljuju ( mrijest). Ukoliko rijeke ne poplavljuju, ikra koja je poluplovna, nakon oplodnje pada
na dno, ostaje bez kisika i propada. Zbog toga je razvijen postupak kontroliranog mrijesta.
Kontrolirani mrijest se korist kad su biljojedne ribe spremne na mrijest – u 4. fazi kad su formirana
osjetilna tjelešca. Tada se nastupanje 5. faze stimulira unosom hormona (hormonalna stimulacija -
hipofizacija). Nakon mrijesta jaja se sakupljaju u mrežu. Pri tome se imitiraju vrtložne struje ( uzgon)
koje ikru održavanu iznad dna. Ikra se skuplja i stavlja u inkubaciju.
Hipofizacijom se hormonima djeluje izravno na gonade pa ikra vrlo brzo sazrijeva. Budući da se
uzima cijela hipofiza, osim gonadotropnih hormona daju se i drugi hormoni pa treba biti oprezan da ne
dođe do uginuća matice. Dva tjedna prije mrijesta potrebno je u potpunosti prekinuti hranidbu matice.
Za umjetan mrijest je potrebno oko 1000°d
Sistematika riba
Biologija i patologija riba
Stranica 63/95
Shema hormonalne stimulacije pri mrijestu
Prirodan mrijest
Vanjski faktori
Osjetila
Mozak
Hipotalamus
Hipofiza
GONADE
MRIJEJST
SREDINA
Umjetan mrijest
Kontrolirani uvjeti
Hipofizacija
•FSH (prolan A)
sazrijevanje ikre
•LH (prolan B)
ovulacija i
izbacivanje ikre
Umjetan mrijest
Pripreme počinju početkom siječnja; prati se vodostaj, duljina dana i temperatura vode te se iz toga
izračunava koliko je °d prošlo. Do kraja 4. faze treba proći 1000°d. Tada treba izvršiti hipofizaciju
matica.
Hipofizacija
Priprema pripravka. Hipofize se vade tijekom ožujka spolno zrelim ribama; nakon što je prošlo 800°d.
To se izvodi trepanacijomom čeone kosti na sredini linije koja spaja oči. Vakuum pumpom se isiše
mozak ispod kojeg je hipofiza. Ginekološkom žličicom se hipofiza vadi i suši u acetonu. Hipofiza je
teška 3-5 mg.
Sušenje. U prvoj izmjeni acetona odstranjuju se krvi i mast. Slijedi još 4-5 izmjena. Potom hipofiza ide
u frižider na 4°C kroz 24 sata. Završna faza sušenja je odstranjivanje acetona; pripravak se stavi na
papir i ostavi se da aceton ishlapi.
Osušena i konzervirana hipofiza skladištena u tamnome (tamne posude) i na hladnome (4°C) ostaje
aktivna par godina.
Probno testiranje. Hipofiza se u tarioniku smrvi u sitni prah te se od toga napravi suspenzija koja se
injekcijom aplicira ribama intramuskularno. Ukoliko se aplicira u krivoj fazi, učinak može izostati.
Hipofizacija i postupak s maticama
.
Tijekom jesen i zime matice se izlovljavaju radi
zdravstvenog pregleda i stavljanja u matičnjake na
zimovanje. U matičnjacima miruju sve do lipnja kada se
ponovno pregledavaju i važu te se određuje ukupna doza
pripravka hipofize. Potom se mužjaci i ženke odvoje i
stavljaju u mrjestilišta u kojima je protočna voda s puno
kisika. Prije davanja hormonskog pripravka matice se
anesteziraju anestezinom ili MS 222.
Oprema za hipofizaciju. Izvor: http://www.kuleuven.ac.be/
Aplikacija hormonskog pripravka se vrši dvokratno – što je specifično za svaku vrstu. Postoje 3
načina unosa lijeka; intramuskularno, intraperitonealno i intrakranialno. Intraperitonealna injekcija se
daje neposredno ispod prsne peraje.
Sistematika riba
Biologija i patologija riba
Stranica 64/95
Prvi dan u 8 ujutro intramuskularno se daje
• Mužjacima 1 mg/kg tjelesne težine
• Ženkama 0.5 mg/kg tjelesne težine
Aplikacija se vrši u leđnom dijelu dubokim ubodom, a pored mjesta uboda
izvrši se kompresija prstom. Uštrca se i promasira da se sadržaj deponira u
mišić (da ne iscuri).
Prvi dan u 20 sati se daje druga doza
• Mužjacima 6 mg/kg tjelesne težine
• Ženkama 12 mg/kg tjelesne težine
Naredni dan u 15.30 se ribe anesteziraju da bi se u 17.00 izvelo istiskivanje
spolnih produkata. Prvo se istiskuju spolni produkti ženki a potom u istu
posudu se istiskuju spolni produkti mužjaka. Doda se fiziološka otopina i
promiješa.
Intramuskularna aplikacija. Izvora:
http://www.carpio-fr.com
Hipofizacija kanalskog soma:
http://www.kuleuven.ac.be/bio/eco/Clarias/Movies/HypophysisExtraction.rm
Metode oplodnje
Prema načinu miješanja ikre i mliječi razlikujem o 3 metode oplodnje:
• Mokra metoda oplodnje se rabi kod pastrvskih i biljojednih riba jer se ikra ne lijepi. Ikru i
mliječ je potrebno spojiti uz prisutnost vode.
• Suha metoda se obavlja bez prisutnosti vode – jedina tekućina je spolna tekućina.
• Ekstra-suha metoda zahtjeva dodavanje fiziološke otopine za mrijest; 0.3% NaCl + 0.4%
urea blago hipertonična otopina za toplovodne ribe
Način oplodnje
Nakon hvatanje ribe, a prije istiskivanja spolnih produkata, ribu je potrebno obrisati krpom. Potom
slijedi istiskivanje spolnih produkata koje može biti:
• Direktno – u posudu se prvo stavlja ikra pa mliječ
• Indirektno
–
mliječ se uzima pipetom i stavlja u sterilnu epruvetu – na 4°C 12 sati ostaje
sposobna za oplodnju – pa se naknadno dodaje ikri.
Kako nema kontrole pokretljivosti odnosno zdravlja spermija, ikra jedne ženke se oplođuje s mliječi 2
mužjaka.
U mrjestilištima za umjetan mrijest linjaka (Tench, Tinca tinca) se vrši ekstra-suha metoda oplodnje.
Pri tome ikra nakon dodatka fiziološke otopine bubri i zatvara se pupila. Tome slijedi ispiranje
odlijepljene ikre otopinom taninske kiseline (dva puta – ali vrlo kratko!) pa dvokratno ispiranje vodom.
Potom se stavlja u Zugerov aparat za inkubaciju, na 20°C tijekom 2 dana. Završna fazu traje 3 dana u
Weiss-ovom inkubatoru.
Ličinke se stavljaju u mreže za transport. Ličinke se u ribnjak stavljaju u gustoći do 50 ličinki na m
3
vode. Primjerice u ribnjak od 10.000 m
3
se može nasaditi 500.000 ličinki.