Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyi kollegiyasının 29 mart 2010-cu IL tarixli
Mikropresipitasiya reaksiyası (MPR)
Yüklə 224,21 Kb. Pdf görüntüsü
|
- Bu səhifədəki naviqasiya:
- Mikropresipitasiya reaksiyası (MPR) MPR-in keyfiyyət analizi
- Müayinənin aparılmasına hazırlıq
- Müayinə prosedurası
- Mikropresipitasiya reaksiyasının nəticələrinin qiymətləndirilməsi Nəticə Təsviri Kəskin
- Müsbət
- Şübhəli (=)
- MPR-in yarı-kəmiyyət analizi
- Nəticələrin qiymətləndirilməsi
21
MPR-in keyfiyyət analizi ►
Müayinə üçün plazma və ya inaktivləşdirilmiş zərdabdan istifadə edilir. Sifilisli xəstənin plazmasına, qan zərdabına və ya likvora kardiolipin antigeni emulsiyası (xolesterin - kardiolipin - lesitin kompleksi) əlavə etdikdə aqqlütinasiya baş verir, ağ rəngli lopa şəklində dibə çökən presipitat (antigen-anticism kompleksi) yaranır. ►
olur (xolesterin 0,98%, kardiolipin 0,03%, lesitin 0,27%, təmiz etil spirtində). ►
oyuqlarında və ya 0,8-1,0 sm qalınlıqlı üzvi şüşədən (pleksiqlas) hazırlanmış, yastı dibli cilalanmış oyuqları olan planşetlərdə yerinə yetirilir. ►
Planşetin nişanlanmış oyuqlarına tədqiq olunan zərdab və ya plazma ilə antigen suspenziyası əlavə edilir. ►
çalxalamaqla məhlulun qarışdırılması nəticəsində baş verir. Anticisimlər olmadıqda müayinə olunan nümunədə reaksiya mühiti dəyişmir.
►
İş gününün əvvəlində müayinəni aparmaq üçün kardiolipin antigeninin emulsiyası hazırlanır. Bu vaxt kardiolipin antigeninin şəffaflığına fikir verilir. Çöküntü olduqda emulsiyanı termostatda 37°C-yə qədər qızdırırlar. ►
əlavə edilir, sonra quru pipetka vasitəsi ilə eyni miqdarda MPR üçün kardiolipin antigeni əlavə olunaraq tez qarışdırılır. ►
Daha kiçik lopaların formalaşması üçün antigeni sınaq şüşəsinin divarı ilə deyil, birbaşa fizioloji məhlulun üzərinə əlavə etmək lazımdır. ►
Antigenli sınaq şüşəsini “yetişdirmək” üçün otaq temperaturunda 30 dəqiqə ərzində saxlayırlar, bundan sonra 10-15 dəqiqə sentrifuqada fırlatmaqla çöküntü üzərində şəffaf maye alır və onu Klinik protokol Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyinin İctimai Səhiyyə və İslahatlar Mərkəzində hazırlanmışdır.
22 sınaq şüşəsindən kənar edirlər. Alınmış çöküntüyə 7 ml 10%-li xolin-xlorid məhlulu əlavə olunur. Müayinə prosedurası ►
Pipetkalı dozator vasitəsilə sınaq şüşəsindən azacıq zərdab və ya qan plazması götürülür və 3 damcı planşetin uyğun oyuğuna əlavə edilir. ►
Hər bir nümunə üçün fərdi ucluqdan istifadə edilir. ►
Fərdi ucluq istifadədən sonra dezinfeksiya məhlullu qaba qoyulur. ►
hər bir oyuğa 1 damcı kardiolipin antigeninin resuspenziyalaşdırılmış işçi emulsiyası əlavə edilir. ►
10 dəq müddətində qarışdırılır. ►
10 dəqiqədən sonra bütün oyuqlara 3 damcı fizioloji məhlul əlavə edilir və rəvan hərəkətlərlə reaksiya mühiti qarışdırılır, bu vaxt məhlulun qonşu oyuğa keçməsinə imkan verilməməlidir. ►
Sonra planşeti 3-5 dəq sakit vəziyyətdə saxlayır, bunun ardınca nəticələrin qeydiyyatına başlayırlar. Mikropresipitasiya reaksiyasının nəticələrinin qiymətləndirilməsi Nəticə Təsviri Kəskin müsbət (4+) Presipitatın iri lopaları ağ rəngli olub oyuğun həcmi boyu bərabər yayılır və ya oyuğun periferiyasında yerləşir, reaksiya mühiti isə praktiki olaraq şəffaf olur. Müsbət Lopalar orta ölçüdə olub, oyuğun bütün həcmi boyu yayılır, reaksiya mühiti ağımtıl çalarlı olur.
Kiçik lopacıqlar oyuğun bütün həcmi boyu yayılır, reaksiya mühiti ağımtıl çalarlı olur.
Çox kiçik lopaların mövcudluğu presipitatın olmasına şübhə yaradır, çalxaladıqda bəzi antigen hissəcikləri parlaq çalarlı olur. Belə bir nəticə alındıqda təkrar müayinə aparılması məsləhət görülür.
Presipitat yoxdur, reaksiya mühiti qeyri-şəffafdır, planşeti çalxaladıqda kardiolipin antigeni hissəcikləri qatışır və oyuğun mərkəzində ağ parlaq çalarlılıq formalaşır. Klinik protokol Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyinin İctimai Səhiyyə və İslahatlar Mərkəzində hazırlanmışdır.
23
Skrininqdə müsbət nəticə vermiş bioloji materialların bütün nümunələri MPR-in yarı-kəmiyyət variantında analiz edilməlidir. Anticisimlərin kəmiyyət müayinəsi patoloji prosesin retrospektiv dinamik qiymətləndirilməsi, aparılan spesifik müalicənin effektivliyini dəyərləndirilməsi məqsədilə aparılır. Seroloji diaqnostika hər bir pasiyentdə eyni metodla aparılmalıdır, həm də yaxşı olar ki, eyni laboratoriyada yerinə yetirilsin. İki müxtəlif testin kəmiyyət nəticələri müqayisə oluna bilməz, məs: RPR titri bir qayda olaraq VDRL titrindən yüksək olur.
►
Planşetin oyuqlarında bioloji materialın ardıcıl olaraq ikiqat durulaşdırılması aparılır. Reagentlərin hazırlanması standart metodika üzrə yerinə yetirilir, onlar 30 dəqiqə müddətində otaq temperaturunda isidilir. ►
məhlul əlavə edilir. ►
Birinci və ikinci oyuqlara 3 damcı (90 mkl) müayinə olunan bioloji material nümunəsi əlavə edilir. Çoxsaylı pipetləmə vasitəsilə ikinci oyuğun möhtəviyyatı qarışdırılır, sonra 1:2 nisbətində durulaşdırılmış qarışıqdan 3 damcı (90 mkl) 3-cü oyuğa əlavə olunur. ►
Bu əməliyyat cərgənin bütün oyuqlarında aparılır, durulaşdırmanın sonunda axırıncı oyuqdan 3 damcı (90 mkl) artıq qalmış material kənar edilir. Beləliklə, təmiz bioloji materialdan 1:2, 1:4, . . . . və 1:128 (8 dəfə durulaşma) və ya 1:512 (10 dəfə durulaşma) durulaşma sırası alınır. ►
kardiolipin antigeninin emulsiyası əlavə edilir. Horizontal istiqamətdə 5-8 dəqiqə müddətində çalxalanır. Prosedura bitdikdən sonra bütün oyuqlara 3 damcı (90 mkl) fizioloji məhlul əlavə edilir və 5 dəqiqədən sonra nəticələr müəyyən edilir. Nəticələrin qiymətləndirilməsi Qeydiyyat standart metodika üzrə aparılır. Anticisimlərin titri kimi presipitat aşkar edilmiş son durulaşma hesab olunur.
Klinik protokol Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyinin İctimai Səhiyyə və İslahatlar Mərkəzində hazırlanmışdır.
Yüklə 224,21 Kb. Dostları ilə paylaş:
|