Sevda dulger tez

 

74 

3.4.3. Hassasiyet 

 

5  µg/ml  derişimde  hazırlanan  10  ayrı  numunenin  analizleri  sonucunda  sonuçların 

standart sapmasının 3,3 katı alınarak hesaplanan LOD ve 10 katı alınarak hesaplanan 

LOQ değerleri aşağıda gösterilmektedir.  

 

 

Çizelge 3.13. Hassasiyet Çalışmalarından Elde Edilen Veriler 

HAZIRLANAN  MDMA 

DERĐŞĐMĐ        5

 µg/mL

 

MDMA ALANI 

ANALĐZ SONUNDA BULUNAN 

MDMA KONS. (

µg/mL)

 

1. Enj 

1289,3 

5,975611 

2. Enj 

1283,7 

5,947885 

3. Enj 

1145,9 

5,265640 

4. Enj 

1104 

5,058193 

5. Enj 

1149 

5,280988 

6. Enj 

1103,4 

5,055223 

7. Enj 

1197 

5,532548 

8. Enj 

1158 

5,379785 

9. Enj 

1285,5 

5,879063 

10. Enj 

1245,5 

5,765189 

Ortalama 

1193,2 

5,514012 

Std. Sapma 

30,971277 

0,148790 

RSD 

2,595634 

2,698412873 

LOD 

0,00690078 

0,506017 

LOQ 

0,020932911 

1,533383 

 

Analizler  sonunda  RSD  değerlerinin  yaklaşık  2,6  çıkması  kullanılan 

konsantrasyon  seçimlerinin  doğru  olduğunu  ve  tekrarlanabilirliğinin  iyi  derecede 

olduğunu göstermektedir.  

 

 

---

 

75 

 

4. TARTIŞMA 

Bu  çalışmada;  ülkemizde  son  beş  yıl  içerisinde  değişik  illerde  yapılan  uyuşturucu 

operasyonlarında  ele  geçirilen,  yasadışı  üretilmiş  çeşitli  amfetamin  grubu  madde 

içeren  36  adet  ekstazi  tabletin  fiziksel,  spektroskopik  ve  kromatografik  

incelemelerinin yapıldı. Đş yoğunluğu fazla olan laboratuvarlara yönelik GC-MS, GC 

ve HPLC cihazlarında uygulanmak üzere hızlı, pratik ve hassasiyeti yüksek üç farklı 

yöntem geliştirildi. Bu yöntemlerin validasyonları yapılarak karşılaştırıldı. 

Öncelikle  tabletlerdeki  MDMA’yı  en  yüksek  verimle  çözmek  için  çözücü 

seçimi  yapıldı.  Bunun  için  literatürdeki  çözücüler  kullanılan  GC-MS  şartları  için 

denendi.  2005  yılında  yapılan  bir  çalışmada  22  adet  ekstazi  tablet  değişik  çözücü 

sistemleriyle  ve  0,  4,  12,  24,  48  ve  96.  saatte  yapılan  GC-MS  ve  GC-FID 

analizleriyle  değerlendirilmiştir.    Đzooktan,  toluen,  etanol,  diklormetan,  etilasetat  ve 

dietileter çözücü olarak kullanılmıştır. Analiz sonuçlarına göre izooktan ve toluen en 

inert ancak zamana dayalı analizlerde ise kararsız oldukları tespit edilmiştir (Aalberg 

ve  ark.,  2005).  Yapılan  çalışmalardan  kloroform  ve  metanolün  kullandığımız  GC-

MS, GC ve HPLC yöntemleri için en uygun çözücüler olduğu tespit edildi.  

GC-MS cihazı ile yapılan nitel analizlerde 5 numaralı tablet hariç 35 tabletde 

MDMA  tespit  edildi.  Ayrıva  MDMA  dışında  bazı  tabletlerde  N-Metil-3,4-

metilendioksiamfetamin  (MDMA)  dışında  kafein,  fenobarbital,  1-(4-klorofenil 

piperazin),  3,4  metilendioksi-N-etilamfetamin  (MDEA) 

gibi  maddelerinde 

bulunduğu gözlendi. 

Bu  çalışmada  kullanılan  GC  çalışmasına  benzer  bir  çalışmada  Mitrevski  ve 

Zdravkovski  tarafından  yapılmıştır.  Alev  Đyonlaştırma  Dedektörlü  (FID)  GC 

kullanılarak  ele  geçirilen  tabletlerdeki  amfetamin,  MDMA,  metamfetamin,  3,4- 

metilen  dioksi  amfetamin  (MDA),  3,4-metilen  dioksi  N-etil  amfetamin  (MDEA)  ve 

N

 

metil-1-(3,4-metilendioksifenil)-2-butanaminin 

(MBDB) 

eş 

zamanlı 

belirlenmesine  yönelik  hızlı  ve  basit  bir  metot  geliştirilmiştir.  Bu  altı  amfetamin 

türevi  madde  iç  standart  olarak  difenilamin  ve  SPB-50  kapiler  kolon  kullanılarak  6 

---

 

76 

dk içinde birbirinden ayrılmıştır. Amfetamin ve metamfetamin piklerinin kuyrukları 

ihmal  edilebilecek  düzeyde  birbirine  değerken,  diğer  amfetamin  türevi  maddelerin 

yüksek  ölçüde  simetrik  pikler  yapmıştır.  Hassasiyet  nanogram  tüm  bileşenler  için 

nanogram  seviyesindedir.  Dedeksiyon  limiti  (LOD)  200mg/mL’dir  (Mitrevski  ve 

Zdravkovski, 2005).  

Bu çalışmada ise, FID-GC kullanılarak ele geçirilen tabletlerdeki MDMA ve 

kafein  miktarı  belirledi.  Kolon  olarak  Agilent  1235032  DB-5  kapiler  kolon 

(30,0mx320µmx0,25mm) kullanıldı. Đnlet sıcaklığı 250

0

C, dedektör sıcaklığı 300

0

C, 

sıcaklık  programı  130

0

C’den  başlar,  2  dk  bu  sıcaklıkta  kaldıktan  sonra  dakikada 

25

0

C artarak 290

0

C’ye çıkar ve bu sıcaklıkta da 3 dk kalır. 11,4 dk’lık analiz süresi 

hızlı,  2,11 RSD değeri ile hassas bir metod geliştirildi. 

HPLC  analizleri  için  Sadeghipour  ve  arkadaşlarının  1996  yılında  yapmış 

oldukları  bir  çalışma  ile  yola  çıkıldı.  %91  fosfat  tamponu:%9  asetonitril  bileşimli 

pH’ı 3.8 olan çalışmadaki koşullar bizim çalışmamızda optimize edilerek %90 fosfat 

tamponu:%10  asetonitril  bileşimli  pH’ı  4,2  yapıldı.  pH  arttırıldığında  piklerin  daha 

keskin çıktığı görüldü. Bu farklılık kolon cinsinden kaynaklandı.  Çalışmada 150 mm 

uzunluğunda  4  µm  çap  ve  3,9  mm  kalınlığında,  dolgu  materyali  silika  bazlı  C18 

NovaPak Waters marka kolon kullanılmıştır. Sadeghipour ve arkadaşları ise, 125 mm 

uzunluğunda  5  µm  çap  ve  4  mm  kalınlığında,  C

18

  AB  Nucleosil  100  marka  kolon 

kullanmıştır.  Bu  da  piklerin  alıkonma  zamanı  ve  verimi  etkileyen  bir  durumdur. 

Yapılan 

kalibrasyon 

ve 

validasyon 

çalışmalarında 

yöntemin 

hassasiyeti 

kanıtlanmıştır.  HPLC  analizler  sonunda  RSD  değerlerinin  yaklaşık  2,6  çıkması 

kullanılan  konsantrasyon  seçimlerinin  doğru  olduğunu  ve  tekrarlanabilirliğinin  iyi 

derecede olduğunu göstermektedir.  

GC ve HPLC analizlerinde geliştirilen metotlar seçilen tabletlerdeki MDMA 

miktarları karşılaştırıldığında paralellik gözlenmiştir. 

 

---