190
Qarışığın komponentlərinin ayrılması, tarazlıq
hərəkətsiz
fazada həllolmuş maddənin konsentrasiyasının hərəkət edən fa-
zadakı konsentrasiyasına olan nisbəti ilə müəyyənləşdirilən
müxtəlif paylanma əmsalları nəticəsində baş verir. Analiz
olunan maddələrin qarışığı, xromatoqrafiya nəticəsində kağız
üzərində ayrı-ayrı ləkələr və ya zolaqlar şəklində ayrılılır.
Kağızı qurutduqdan sonra maddələrin yaxşı ayrılması üçün
xromatoqrafiya prosesini eyni üsulla bir və ya bir neçə dəfə
təkrar etmək olar.
Maddələrin ikinci dəfə ayrılması başqa istiqamətdə və
adətən, digər hərəkət edən həlledicinin köməyi ilə aparılan iki-
ölçülü xromatoqrafiya metodu, kifayət qədər qəribəliyi ilə
diqqəti cəlb edir. Əgər xromatoqram, boyanmamış ləkəyə ma-
lik olursa, onda hər hansı bir reaktivlə aşkarlanır.
Xromatoqramlar oxunarkən, təcrübəli xromatoqramı eyni
şəraitlərdə alınmış “
ş a h i d” xromatoqramla (kimyəvi cəhət-
dən təmiz maddələrin xromatoqramları) müqayisələndirərək,
onların optik xüsusiyyətləri və ləkələrin vəziyyəti nəzərə alınır.
Hər
bir ləkənin vəziyyəti R
f
və ya
f
R mütəhərriklik əm-
salı ilə xarakterizə edilir. R
f
əmsalı, verilən maddənin irəliləmə
zonası məsafənin həlledicinin irəliləmə zonası məsafəsinə olan
nisbəti ilə təyin edilən
t
R kəmiyyəti daha stabildir.
Xromatoqram zonalarında maddələrin miqdarca təyini
aşağıdakı üç üsuldan biri ilə yerinə yetirirlər:
1. Elyuatların optik sıxlığının fotometrik təyini;
2. Ləkələrin sahələrinin ölçülməsi;
3. Maddələrin xromatoqramda birbaşa densitometrik
təyini.
Y a r ı m m i q d a r c a q i y m ə t l ə n d i r m ə zamanı
təcrübi və standart xromatoqramlarda
maddə ləkələrinin inten-
sivliyinə görə vizual olaraq, yəni baxmaqla müqayisələndi-
rirlər. Bu metodun dəqiqliyi 15-50% civarında dəyişir.
L ə k ə s a h ə s i n i n ö l ç ü l m ə s i m e t o d u ona
əsaslanır ki, müəyyən şəraitlərdə, qismən eyni həcmli maddə
191
məhlullarının kiçik “
l ə k ə c i k l ə r” şəklində start xəttinə
köçürülməsi zamanı xromatoqramda alınan ləkələrin sahəsi,
hər ləkədəki maddələrin konsentrasiyası loqarifmlərinə propor-
sionaldır. Metodun dəqiqliyi, ləkələr
dəqiq əhatə olunduqda
5
÷
10% civarında olur. Əgər ləkə qarmaqarışıq alınırsa, onda
digər kontrast (ziddiyyətli) kağızda onun fotoəksi alınır.
Xromatoqramı monoxromatik işıq şüası ilə edən (sürətini
çəkən) və qayıdan, yaxud ləkədən keçən şüa enerjisini foto-
metriya metodu ilə təyin edən
d e n s i t o m e t r i y a me-
todu daha dəqiqdir. Ləkənin maksimal optik sıxlığı, zonadakı
maddə konsentrasiyasının loqarifminə proporsionaldır (mütə-
nasibdir). Əgər ləkələr örtülmürsə və çevrəni, yaxud ellepsvarı
formaya malikdirsə, onda ləkələrin boyanma intensivliyinin
ölçülməsi metodu ilə, maddələrin (qatılığını) konsentrasiyasını
1 ÷ 2% dəqiqliklə təyin etmək olar.
Miqdarca xromatoqrafiyada
dəqiqliyi
1,0% təşkil
edən
e l y u r ə e t m ə (yuma) metodu daha geniş tətbiq
edilir. Bu metodda ləkəni kəsir, maddəni elyurə edir və məhlul-
ların, fotoelektrokalorimetrin köməyi ilə ölçülən optik sıxlığına
görə daha tez-tez konsentrasiyası təyin edilir. Kontrol məhlul
kimi təmiz həlledicidən yox, kağızın tədqiq olunan zonasına
yaxın sərbəst sahəsindən elyurəedilmiş (yuyulmuş) məhluldan
istifadə edilir. Belə ki, bir çox maddələrin boyanmış törəmələri,
adətən davamsız olur, ona görə də fotometrləməni tez (qısa
zamanda) yerinə yetirmək lazım gəlir. Kağız liflərin elyuata
düşməsinə yol vermək olmaz. Məhlulların optik sıxlığına görə
kalibrləmə qrafiklərinin köməyi ilə elyurə məhlullarında
tədqiq
olunan maddələrin konsentrasiyası təyin edilir, sonra isə işin
gedişində bütün durulaşdırılmalar nəzərə alınaraq, məhsulda
maddələrin miqdarı hesablanır.
Kağız üzərində paylaşdırıcı xromatoqrafiya metodu qida
məhsulları fenollarının, aminturşuların, karbohidratların
tədqiqində geniş tətbiq edilir, karbohidratların biokimyəvi
çevrilməsi zamanı əmələ gələn üzvi turşuların ayrılması üçün,
192
bitki mənşəli piqmentlərin, ali spirtlərin, aldehidlərin, mürək-
kəb
efirlərin tədqiqi üçün, bitki və heyvani mənşəli məh-
sullarda xlorlu üzvi qalıqların (DDT və s.) təyini üçün istifadə
olunur.
3.5.1. Hisə verilmiş məhsulların
fenol tərkibinin təyini
Hisə verilmiş məhsulların dad və aromatik xassələrinin
əmələ gəlməsində
f e n o l b i r l ə ş m ə l ə r i həlledici rol
oynayır. Hisə verilərkən balığın və ya ətin toxumaları tərə-
findən fenolların
x e m o s o r b s i y a s ı baş verir, tüstünün
və ya hisləyici mayenin fenol komponentləri
qida məhsulunun
tərkibinə daxil olan maddələrlə zəif və ya möhkəm birləşmiş
vəziyyətə keçir. Möhkəm birləşmiş fenol komponentlərinin
təyini daha uzun müddət tələb edən çətin prosesdir. Xromatoq-
rammalarda yalnız dörd-beş fenol təbiətli maddə aşkarlana
bilir.
Hislənmiş qida məhsullarının fenol tərkibinin təyini za-
manı, tədqiqata məruz qoyulan çəki nümunəsindən
fenollar
buxarla distillə edilir (qovur), sonra turşu və neytral xarakterli
qatışıqlardan təmizlənir. Bu zaman fenolların etil efirində yaxşı
həll olmasına və onların qələvilərlə qarşılıqlı təsirdə fenolyatlar
əmələ gətirmək qabiliyyətinə istinad edilir. Ayrılan fenollar
diazotlaşdırılan sulfanil turşusu (DST) ilə birləşir və diazotö-
rəmələr şəklində kağız xromatoqrafiyası metodu ilə ayrılmaya
məruz qoyulur. Diazosulfofenollar rənginə, yəni boyanma-
larına və R
f
kəmiyyətlərinə görə fərqləndirilir, bu isə mad-
dələrin identifikasiyasını asanlaşdırır. Fenolları miqdarca təyin
etmək üçün onların törəmələrinin boyanmış ləkələri kəsilir,
suda elyuatların optik sıxlığı ölçülür və hər bir fenol üçün
ayrıca qurulmuş kalibrləyici qrafiklərə fenolların elyuatdakı
konsentrasiyası tapılır, hesablama formullarına əsasən isə
məhsulda olan hər bir fenolun miqdarı hesablanır.