37
təcridlərin patogenliyindəki fərq haqqında fikir söyləyirlər.
Göbələklərin hibridləşdirilməsi. Göbələk dəyişkənliyinin
mümkün yollarından biri də onların qohum formalarının çarpaz-
laşdırılmasıdır. Belə hibridləşdirmə heterotallizm halları ilə məh-
dudlaşdırılır və ona görə də bəzi mukorlu, kisəli, sürməli və paslı
göbələklərdə mümkündür. Keyfiyyətli yeni göbələk əmələ gəlməsi
ilə nəticələnən çarpazlaşmaya, növdaxili göbələk formaları ya da
onların fizioloji ümumiliyini itirməyən qohum növləri qadirdir.
Fizioloji əlaqə cəhətindən uzaq növlər arasında hibridləşmə
mümkün olmadığından, bir üsul kimi hibridləşmə müxtəlif göbə-
lək formaları arasında qohumluq dərəcəsinin müəyyənləşdirilməsi
üçün istifadə olunur. Növün digər amilləri ilə birlikdə hibridləşmə
növün taksonomik yerinin, sərhəd və strukturunun müəyyən edil-
məsi üçün yaxşı rol oynaya bilər.
Sürməli göbələklərin hibridləşməsi. Bunu Tilletia cinsinin
nümayindəsinin misalında müşahidə edək. Onu ilkin (bazidisporla)
və ikincili sporlarla da həyata keçirmək olar. Hər iki halda təcrid
edilmiş bazidisporu, su suspenziyası ilə qarışdırmaq üsulu ilə əldə
etmək olar. Steril Petri nimçəsinin qapağının içəri səthinə bir
damcı həmin suspenziyadan çəkib mikraskop altında içərisindən
yalnız bir bazidispor olanı ayrılır. Onu sonra kartoflu – qlükozalı
aqar hissəciyi ilə qidalandırıb nimçələri termostatda inkubasiya
edir, 5-6 gündən sonra isə cücərmiş bazidiasporlar inkişaf edən
mitselilərlə birlikdə aqarlı sınaq borularına təkrar əkilir. Kartoflu –
qlükozalı aqarda inkişaf zamanı monobazidiasporlu mühitlər
ikincili sporidilər əmələ gətirirlər. Ikincili sporidilər arasında bir-
ləşmə birincili sporidilərin birləşməsi kimi baş verir və Heltona
əsasən, Tilletia cinsindən olan müxtəlif göbələk formalarında bu,
onların cinsi uyğunluğunun göstəricisidir.
İlkin sporidilərin (bazidiasporlar) dərəcəsi çox olmayacaq.
Pas göbələklərinin hibridləşdirilməsinin özəlliyi onların
obliqat parazitlik xüsusiyyəti olduğundan bütün manipulasiyaları-
nın hamısı canlı bitkilər üzərində həyata keçir. Bu cür tədqiqatın
uğuru ilk növbədə sınaqdan keçirilən pas formasında teleytospor-
ların cücərmə prosesinin nə qədər mənimsənilməsindən asılıdır.
38
Sınaqda öz teleytosporlarının cücərmə sürəti və xarakteri ilə
fərqlənən bir necə göbələk forması iştirak etdiyi üçün, tempera-
turun kəskin surətdə müsbət və mənfiyə doğru dəyişməsi onları
bazidiaspor əmələ gətirmək şərti ilə eyni anda cücərməyə məcbur
edir.
Promitseldə 4 əmələ gəlmiş bazidiaspordan 2 əks cinsə mən-
sub olduğu üçün əsas sahibin onlarla peyvəndi zamanı monoba-
zidiasporlu spermaqoniyalı başcıqlar almaq vacibdir. Sonuncular
lupa vasitəsilə yaxşı görünən bir damcı spermaqonial nektar ifraz
edən yalnız bir spermaqoniya əmələ gətirirlər. Yalnız belə başcığın
əks işarəli spermoqanial nektar ilə mayalanması zamanı onlarda
esidisporlu esidilər inkişaf edəcək.
Peyvənd metodu sınaqdan keçirilən əsas sahib bitkini rütubətli
kameraya yerləşdirmək, yarpaqlardan mumlu ərpi silmək, pulivi-
zatorla bitkiyə su çiləməkdən ibarətdir.
Rütubətli kameraları hazırlamaq üçün ən yaxşı üsul, divarları
içəridən nəmli filtirli kağız sərilmiş “Yarasa” tipli fənərlərin şü-
şəsindən istifadə etmək və qapaq əvəzi isə icəri tərəfində su
damcıları ilə cücərmiş teleytosporlu material bərkidilmiş Petri
nimçələrinin qapağından istifadə etməkdir. Çoxlu sayda bazidia-
spor və teleytosporlu material əmələ gətirən oxşar monoba-
zidiasporlu başcıqlar əldə etmək üçün qapağı bitki üzərində 2-3
saat saxlamaq, sonra isə 10-12 saat ərzində qapağı növbəli olaraq
yavaş çevirmək və onu içərisinə nəmli filtirli kağız sərilmiş adi
qapaq ilə əvəz etmək lazımır. Bu üsulla peyvənd edilmiş esidial
sahiblər 2 gün rütubətli kameralarda saxlanılır, sonra isə təcridli
stasionara köçürülür.
Yoluxma əlamətləri spermoqanial başcıqlar şəklində 5-7 gün-
dən sonra əmələ gəlir. 6-cı gün lupanın köməkliyi ilə monobazidial
sporlu başcıqlar müəyyən edilərək tuşdan dairələrlə işarələnərək
nömrələnir, digər yoluxmuş yarpaqlar isə qoparılır. Monoba-
zidialsporlu başcıqlar eyni yarpaq üzərində bir-birindən 0,4 sm
məsafədə olmalıdırlar.
5-ci gündən tez olmamaqla çarpazlaşma aparmaq məsləhət
görülmür, çünki, bu müddət ərzində çətin (monobazidiasporlu ol-
39
mayan) başcıqlarda esidilər formalaşmağa başlayır və mono-
bazidialsporlu başcıqlar isə yetkinləşirlər.
Çarpazlaşma manipulasiyasının özü, bir pas göbələyi forma-
sında olan monobazidialsporlu başcıqların üzərinə nazik steril
neştər köməkliyi ilə digər pas göbələyindəki bir neçə başcığın
spermoqanial nektarının köçürülməsindən ibarətdir. Hər çarpaz-
lasdırmadan öncə neştər spirtlə sterilizə edilməlidir.
Sınaqdan keçirilən bitkilər sonra maksimal izolyasiya şə-
raitində saxlanılırlar. Mayalandırılmış başcıqlarda esidilər əmələ
gəlməyə başladığı andan etibarən izolyasiya evciklərinin dibinə
nəmli kağız sərir ya da başqa yolla nəmləndirirlər ki, esidisporlar
yaxşı ayrılsın və onları ayrı sınaq şüşələrində yığmaq olsun.
Pas göbələyinin hibrid formasının patogenlik xüsusiyyətinin
tətqiqi bir sıra dənli bitkiləri peyvənd etməklə həyata keçirilir.
Öz aralarında uyğun gəlməyən pas göbələklərinin çarpazlaş-
dırılması zamanı esidilər əmələ gəlmir və ya əmələ gəlmiş
esidilərdəki esidiasporlar yetişmək qabiliyyətinə malik olmur,
yaxud esidilər ümumiyyətlə cücərmir (açılmır).
Natamam tsikili göbələklərin hibridləşməsi. Sınaqdan keçi-
rilən göbələyin hər ştammından hazırlanan suspenziya damcısını
steril pipet köməkliyi ilə steri şüşə şpatellə sürtmək yolu ilə qazon
hazırlamaq üçün Petri nimçələrindəki aqarlı mühitə yerləşdirirlər.
Bu pipetdəki suspenziya damcısını halqa dəliklərindən birinə
yerləşdirirlər. Bu manipulasiyaları sonrakı hər bir ştamla həyata
keçirirlər. Qazonların miqdarı içərisində fərqli ştam suspenziyaları
olan quyuların miqdarına uyğun gəlməlidir.Sonra tikanlı replika-
toru üzərindəki spirti yandırmaqla sterilizə edib, Petri nimçələrində
olan aqarlı halqaların içərisinə (göbələk qazonu olmadan) yerləş-
dirmək yolu ilə soyudur və yalnız bundan sonra replikator halqa
üzərinə elə hesabla yerləşdirilir ki, hər bir tikan hər hansı bir
suspenziyalı quyunun içərisində olsun. Yalnız bütün bunlardan
sonra replikatorun bütün tikanları hər hansı bir göbələk ştammına
toxunur.Bu yolla içərisində bir göbələk ştammı qazonu olan bir
Petri nimçəsində təcrübədə iştirak edən bütün digər ştammlar da
yerləşdirilir. Müxtəlif cinsli işarəli ştamların Petri nimçəsində
40
yerləşdirilməsi zamanı təcrübədən keçirilən göbələyin kisəli
mərhələsinin əmələ gəlməsi mümkündür. Sayılan manipulasiya-
ların hamısını sınaqdan keçirilən göbələyin hər ştammına qarşı hər
dəfə replikatoru sterilizə etmək şərti ilə təkrar edilir.
Göbələklərin “vegetativ hibridləşməsi” sitoqamiyadan sonra
plazmaqamiya əmələ gəlib karioqamiya əmələ gəlmədiyi zaman
hif anastamozu vasitəsilə həyata keçirilir. Yenə də, belə hibrid-
ləşmə nəticəsində irsən dəyişmiş hibridlər əmələ gəlir. Bu hal
heterokarioz adı ilə tanınır, alınan hibridlər isə heterokarionlar
adlandırılır.
Çox zaman anastamozlar artıq cücərmiş kanidi budaqları
arasında müşahidə olunur. Mayalanmış budaqdan yetişən mitselidə
yüksək inkişaf müsahidə edildiyi zaman digər budaqlar məhv olur.
Bununla yanaşı böyük mitseli hifləri arasında da anastamozlar
olur.
Həqiqi cinsi prosesdə olduğu kimi, qohum çarpazlaşma kom-
panentləri ilə çox asan anastamoz baş verir. Əksinə, heterokarioz
kompanentlərinin öz aralarındakı genetik fərqləri nə qədər çox
olarsa, heterokarionlar bir o qədər çətin əmələ gəlir, amma buna
baxmayaraq onlar valideyn formalarından bir o qədər fərqlənmir.
Təcrübədə heterokarioz steril şəraitdə bir damcı içərisində
olan iki müxtəlif göbələk formasının tək konidilərini yetişdirməklə
həyata keçirirlir. Bunun üçün sporların təcrid edilməsi, onların
cücərmə prosesi və budaqların anastamozlarının inkişafına nəzarət
mikraskop altında edilir. Sonra əldə edilən heterokarion steril aqar
hissəciyi ilə yedizdirilir və bütünlüklə sınaq borusuna və ya Petri
nimçəsinə əkilir. Bu zaman fərqli nüvələrin müxtəlif mitseli hissə-
ciklərinə düşməsini güman edərək əldə edilən mühitdən hiflərin
yuxarı hissələrini təcrid edib onlar əkilir. Daha dəqiq nəticələrin
əldə edilməsi üçün vegetativ hibridləşmə təcrübələri maksimal
təkrarda həyata keçirilir.
Vegetativ hibridləşməni təkcə natamam göbələklərdə deyil,
həm də pas göbələklərinin diploidli uredosporlu cücərtilərində də
yerinə yetirmək mümkündür.
Göbələklərin mutagenezi. Göbələklərdə mutagenez onlara
41
bir sıra amilin əsasəndə, ultrabənövşəyi ya da bir başa günəş
şüalarının təsiri, radioaktiv şüalanmanın, etilen – imin tipli güclü
təsir edən kimyəvi reaktivlərin, ya da substrata bəzi bakteriyaların
ölü mühitlərini əlavə edilməsinin və s. təsiri nəticəsində əmələ gələ
bilər.
Güclü təsir edən amillərin bir çoxu kimi, bu mutagenlər az
dərəcədə təcrübəli orqanizmlərin inkişafını stimulizə edə, orta
dərəcədə onları yora, güclü dərəcədə isə öldürə bilər. Təcrübə
aparılan populasiya ərazisindəki nümunələrin hamısı mutagenlərin
təsirini heç də eyni qəbul edilmir. Bəziləri hətta məhvedici dozada
sağ qalaraq mutasiya dəyişkənliklərinə məruz qalmırlar. Əldə
edilən mutantları təkrar əkərək yeni əmələ gəlmiş əlamət və
xüsusiyyətlərin sonrakı əkin proseslərində stabilliyini yoxlayır,
onları morfoloji – mühitin əlamətləri və patogenlik xüsusiyyətləri
nöqteyi nəzərindən yuxarıda qeyd edilən adi üsullarla tətqiq edilir.
42
Ədəbiyyat
1.
Лакин Г.Ф. Биометрия (учебное пособие для биологов
спец. вузов.) М: Высшая школа, 1980, 293 с.
2.
Левитин М.М. Фитопатогенные грибы и болезни человека
// Защита и карантин растений. 2009, № 9, с. 34-36.
3.
Лилли В., Барнетт Г. Физиология грибов. М, «Иностранная
Литература» 1953, 531 с.
4.
Методы фитопатологии / пер. с англ. З.Кирай, З.Климент,
Ф.Шоймоши, И.Вереш, С.В.Васильевой / под. ред.
Горленко М.: Колос, 1974, 343 с.
5.
Миринчик Т.Г. Использование некоторых питательных
сред для выделения почвенных грибов // Биологические
науки, 1970, №1, с. 123.
6.
Огарков Б.Н., Балбашевская Н.А. Грибы рода триходерма
в борьбе с фитопатогенными грибами // Защита и карантин
растений. 2006, №7, с. 29.
7.
Хохряков М.К. Методические указания по эксперимен-
тальному изучению фитопатогенных грибов. ВИЗР,
Ленинград, 1976, 64 с.
43
Mündəricat
Giriş............................................................................................. 3
Patogenlərin təyin edilməsi....................................................... 6
Rütubətli kameralar..................................................................
7
Göbələklərin təmiz mühitləri.................................................... 12
Göbələklərin qışlama üçün qoyulması..................................... 14
Patogenin biologiyasının öyrənilməsi.......................................
15
Göbələyin inkişaf dövrünün öyrənilməsi................................. 15
Göbələklərin ixtisaslaşmasının öyrənilməsi............................. 17
Təcrübələr üçün bitkilərin hazırlanması.................................
19
Peyvəndin hazırlanması............................................................ 21
Peyvəndin həyat qabiliyyətinin yoxlanılması........................... 23
Bitkilərin peyvənd üsulları........................................................
25
Çiçək və zoğların peyvənd edilməsi......................................... 26
Toxumların peyvənd edilməsi...................................................
26
Budaq və yarpaqların peyvənd edilməsi...................................
27
Ağac bitkilərinin budaqlarının peyvənd edilməsi..................... 28
Bitkilərin torpaq vasitəsi ilə peyvənd edilməsi......................... 29
Peyvənd etmənin nəticələrinin qeydiyyatı................................
29
Optimal qida mühitinin müəyyən edilməsi............................. 31
Göbələyin ekoloji tələbatının müəyyənləşdirilməsi.................
31
Kardinal temperaturun müəyyənləşdirilməsi............................
32
Torpaqda yaşayan fitopatogen göbələklərin ekologiyasının
öyrənilməsi..................................................................................
32
Torpağın funqistaziyasının A.S.Dasenkoya görə müəyyən
edilməsi........................................................................................
33
Kök ifrazlarının bitki rizosferasında göbələk cücərtilərinə
təsirinin öyrənilməsi...................................................................
34
Göbələklərin növdaxili dəyişkənliyinin öyrənilməsi .............. 34
Genotipik dəyişkənlik............................................................ 34
Göbələklərin monosporlu tətqiqi...........................................
35
Coğrafi dəyişkənliyin öyrənilməsi......................................... 36
Göbələklərin hibridləşdirilməsi............................................. 37
Sürməli göbələklərin hibridləşdirilməsi.................................
37
Pas göbələklərinin hibridləşdirilməsi..................................... 37
Natamam tsikli göbələklərin hibridləşməsi........................... 39
Göbələklərin “vegetativ hibridləşməsi”.................................
40
Göbələklərin mutagenezi.......................................................
40
Ədəbiyyat....................................................................................
42
44
C.T.Ağayev, S.F.Cabbarov
A.A.Hüseynova, N.K.Ağayeva
FİTOPATOGEN GÖBƏLƏKLƏRİN
EKSPERİMENTAL ÖYRƏNİLMƏSİ ÜSULLARI
(Metodik göstəriş)
Bakı – “Müəllim” – 2017
“Müəllim” nəşriyyatında çap olunmuşdur.
Çapa imzalanmışdır 31.05.2017. Sifariş 46.
Kağız formatı 60
84
1/16
. Şərti 3,0 ç.v. Sayı 100.
Dostları ilə paylaş: |