Çətin parçalanan sintetik maddələrin əksəriyyəti aromatik həlqəli olub
periferik metabolizm yollarının müxtəlifliyinə görə bir-birindən seçilir. Aromatik
həlqənin parçalanmasından əmələgələn alifatik üzvi (sirkə, quzuqulağı, piroüzüm
və b.) turşular ümumi məlum yolla Krebs siklinə daxil olub mərkəzi metabolizmə
məruz qalırlar.
MÜHAZ RƏ 13. : “GENET K MÜHƏND SL K VƏ ONUN ƏSAS
ANLAYIŞLARI”
PLAN
1. Genetik mühəndisliyin yaranma tarixi
2. Genetik mühəndislik metodları
3. DNT və RNT-nin ayrılması və təmizlənməsi.
4.Rekombinat DNT molekullarının quraşdırılması
5. Genlərin alınması
6. Мolekulyar klonlaşma vektorları
7. Klonlaşdırma.
Ə
dəbiyyat:
1.Qənbərov X.Q., Abişov R.A.,.Ibrahimov A.Ş. “Biotexnologiyanın əsasları”,
Bakı-1994,-284s.
2.
Айала
Ф., Кайгер Дж. Современная генетика: В 3-х т. – М.: Мир, 1988
3.
Бациллы
. Генетика и биотехнология. Под ред. Хервуда К. М.: Мир,
1992 г.
4.
Бейли
Дж., Омис Д. Основы биохимической инженерии (в двух
частях
). М.: Мир, 1989 г.
5.
Инге
-Вечтомов С.Г. Генетика с основами селекции. – М.: Высш.
школа
, 1989.
6.
Щелкунов
С.Н. Генетическая инженерия: Новосибирск: Сиб унив. Изд-
во
, 2004.-496с.
7.
Бекер
М.Е., Лиепиньш Г.К., Райпулис Е.П. Биотехнология. – М.:
Агропромиздат
, 1990
Genetik mühəndislik molekulyar genetikanın yeni sahəsi olub fəal genetic
sturukturların (rekombinat DNT molekulunun) in vitro şəraitdə alınmasını
(quraşdırılmasını) öyrənir. Onun formalaşması, hər şeydən əvvəl, genetic
enzimologiyavə nuklein turşuları biologiyasının yüksək inkişafı sayəsində baş
vermişdir. Genetik mühəndisliyin inkişaf tarixini şərti olaraq üç mərhələyə bölmək
olar.
Birinci mərhələ rekombinat DNT molekulunun in vitro şəraitdə alınmasının
sübut olunması ilə bağlıdır. Bumərhələdə müxtəlif plazmidlər, plasmid və
faqlardan ibarətdir hibridlərin alınması öyrənilmişdir. Belə hibridlərə başqasözlə
vector molekulları dadeyilir. Birinci mərhələdə genetikmühəndisliyiaşağıdakı
məsələlərihəllolunmuşdur:
1.
müxtəlifnövbakteriyalarınDNTmolekullarındanistifadə
edərəkrekombinatmolekulyaradılması;
2.
rekombinatmolekulunhəyatqabillətinə malikolması;
3.
rekombinatmolekulunstabilliyi;
4.
onunhüceyrə daxilində fəaliyyətgöstərə bilməsi.
kinci mərhələdə prokariot orqanzimlərin (bakteriyaların) xromosom genləri
və müxtəlif plasmid DNT-lərinin hibridləşməsi ilə yeni rekombinat molekulların
alınması
sübut
edilmişdir.
Eynizamandabumolekullarınhəyatqabiliyyətinə
malikolmaları və stabilliyi öyrənilmişdir.
Üçüncü mərhələdə eukariot və eləcə də aliorqanizmlərin DNT-lərindəki
genlərlə vector molekullarını birləşdirməklə yeni rekombinat DNT alınması sübut
edilmiş və prokariot hüceyrədə DNT molekulunun transkripsiya olunması (DNT və
RNT sintezi) dagöstərilmişdir. Lakin DNT translyasiyası (metobolitinsintezi) isə
öyrənilməmiş qalırdı. Ona görə də genetik mühəndisliyin sonrakı inkişaf dövrü
heyvan genlərinin bakteriya hüceyrəsində klonlaşdırılması və ekspressiyası ilə
bağlıdır.
Son 30 il müddətində molekulyar biologiya, genetika, botanika,
virusologiya, biokimyasahəsində əldə edilən nailiyyətlər sayəsində genetic
mühəndislik çox böyük sürətlə inkişaf etməyə başlamışdır. Bu səbəbdəndə onun
inkişaf mərhələləri bir-birindən vaxt etibarı ilə çoxaz (1-2 il) fərqlənir.
1972-ciilə Berq əməkdaşları ilə birlikdə λ bakteriofaq (virus) DNT
fraqmentivə E. colibakteriyası DNT-nin qalaktozaoperonundan ibarət ilk bioloji
fəal rekomibinat DNT molekulunu almışdır. Bu tarix genetic mühəndisliyin
yaranma tarixi kimi qeydə alınmışdır.
Rekombinat DNT molekulların enzimologiyası. Rekombinat
DNT
molekulların quraşdırılmasında iştirak edən fermentlər beş qrupa bölünür:
1. DNT fraqmentlərinin alınmasında istifadə olunan fermentlər;
2. RNT matriksi əsasında DNT fraqmentini sintez edən fermentlər;
3. DNT fraqmentlərin “tikən” fermentlər;
4. DNT fraqmentlərinin uclarının quruluşunu dəyişən fermentlər;
5. Hibridləşmiş nümunələrin hazırlanmasında istifadə olunan fermentlər.
DNT-ni fraqmentlərə parçalayan endonukleaza fermentləridir. Onlar DNT
molekulundakı nukleotidləri tanımaq və müəyyən nahiyyədə parçalamaq
qabiliyyətinə malikdirlər. Endonukleazaların hərtərəfli tədqiqi nəticəsində DNT-
dən ayrı-ayrı genlər və gen qrupları alınmışdır. Xüsusi spesifikliyə malik olub
DNT-ni ancaq müəyyən nahiyyətlərdən parçalaya bilən endonukleazalara
restriktazalar deyilir. Onların genetik mühəndislik üçün əhəmiyyətindən
danışarkən qeyd etməknlazımdır ki, restriktazaları kəşf etmiş bir qrup alim 1978-ci
ildə Nobel mükafatına layiq görülmüşdür.
RNT matriksi əsasında DNT fraqmentlərini sintezedən fermentlərə DNT-
polimerazalar deyilir. Proses əks transkripsiya adlandığı üçün DNT-polimerazalara
ə
ks transkriptazalar da deyilir.
lk DNT-polimeraza fermenti E. coli bakteriyasından alınmışdır. Bu ferment
preparatının tərkibində eyni zamanda çoxlu nukleazalar olduğu üçün təmizləmə
prosesində DNT-polimeraza çıxımı xeyli azalır. Son illər DNT-polimeraza almaq
üçün Bacillus subtilis və Mikrococcus luteus bakteriyalarından da istifadə edilir. E.
Dostları ilə paylaş: |