~ 87 ~
Rəngli (bulanma) ekstraktlar olduğu halda işçi məhlul mütləq
duruldulmalıdır. Bunun üçün isti, lakin son həcmə qədər çatdırıl-
mayan işçi məhlula damlalarla çöküntü əmələ gəlib qurtarana
qədər 10%-li qurğuşun asetat məhlulu əlavə olunur. Adətən 10 q
nümunədən alınmış işçi məhlula 0,5-2 ml qurğuşun asetat əlavə
olunması lazım gəlir. Qurğuşun duzunun artıqlığına yol vermək
olmaz. Çünki o, filtrdən keçərək analizin gedişinə əngəl törədir.
Duruldulmuş işçi məhlul süzgəcdən keçirilir və həcmi su ilə 50
ml-ə çatdırılır.
Oksidləşdirilən şəkərlərin təyini. Təyin etmək üçün əvvəlcə-
dən mis qliserat məhlulunun hazırlanması lazım gəlir. Bunun
üçün 2:1 nisbətində 1 №li məhlulun (0,8% CuSO
4
·5H
2
O) 2 №li
ilə (15%-li OH 1 ml qliserin əlavə etməklə) qarışığı hazırlanır.
1 ml durulmuş və süzgəcdən keçirilmiş işçi məhlul sınaq
şüşəsinə keçirilir, üzərinə 15 ml mis qliserat əlavə olunaraq
qarışdırılır və 70
0
C-də su hamamında 6 dəqiqə qızdırılır. Sonra
sınaq şüşəsi soyuq suda soyudulur və şəffaf məhlul optik sıxlığı
təyin etmək üçün küvetə qoyulur (nümunə 1).
Oksidləşən və oksidləşməyən (saxaroza) şəkərlərin cəminin
təyini. Oksidləşməyən şəkərlərin miqdarını təyin etmək üçün 0,5
ml duruldulmuş filtrdən keçmiş işçi məhlul götürülərək üzərinə
0,5 ml 1%-li HCl əlavə olunur, qarışdırılır və qaynayan su
hamamı üzərinə qoyularaq 15 dəqiqə saxlanır. Sonra 15 ml mis
qliserat əlavə olunaraq su hamamında 6 dəqiqə qızdırılır. Sınaq
şüşəsi soyuq suda soyudulur, sakit qoyularaq çökdürülür və optik
analiz üçün şəffaf məhlul götürülür (nümunə 2). Bu nümunədə
oksidləşdirilən şəkərlərin və saxarozanın cəmi təyin edilir.
Spektrofotometriya. Tədqiq olunan məhlulun optik sıxlığı
λ=582 nm dalğa uzunluğunda qeydiyyatdan keçirilir.
Nümunələrdə şəkərlərin miqdarını qlükozaya görə qurulmuş
kalibrləmə əyrisinə görə təyin etmək olar. Bunun üçün 10 mq/ml
qlükozaya malik 50 ml məhlul və sonra duruldulma yolu qalan
məhlullar 2.5 saylı cədvələ uyğun hazırlanır.
Cədvəl 2.5
№
Qlükozanın
Qlükozanın ilkin
Suyun
Optik
~ 88 ~
miqdarı, mq/ml
məhlulunun
miqdarı, ml
miqdarı, ml
sıxlıq, D
582
1
0,5
0,5
9,5
2
1,0
1,0
9,0
3
2.5
2,5
7,5
4
5,0
5,0
5,0
5
7,5
7,5
2,5
6
10,0
10,0
0
Bu məhlulların optik sıxlığını (D
582
) təyin etmək üçün təcrübə
variantlarında olduğu kimi, əvvəlcədən mis qliseratla reaksiya
aparılmalıdır.
Tədqiq olunan obyektdə oksidləşdirilən şəkərlərin miqdarı (A)
folmulla hesablanır:
,
burada: C - kalibrləmə əyrisi ilə nümunə 1-də tapılan şəkərlərin
miqdarı;
V – çəkilmiş nümunədən alınan işçi məhlulun həcmi;
m - numunə çəkisinin kütləsi, qramla.
Həmin formula uyğun həm də oksidləşdirilən şəkərlərin və
saxarozanın cəmi hesablanır. C-nin yerinə nümunə 2-də kalibrlə-
mə əyirisinə görə tapılan şəkərlərin miqdarı yazılır. İkinci və
birinci təyinetmələr arasındakı fərq 0,95 əmsalına vurularaq
tədqiq olunan obyektdə saxarozanın miqdarı tapılır. Nəticələr
cədvəl 2.6-da əks olunur.
Cədvəl 2.6
Obyek
t
D
582
numun
ə 1
D
582
numun
ə 2
Oksdiləşdirilə
n şəkərlərin
miqdarı, mq/q
Mono və
oliqoşəkərləri
n cəmi, mq/q
Saxarozanı
n miqadrı,
mq/q
Sonda nəticələrə gəlinir.
~ 89 ~
2.14.
Müxtə
lif bitkil
ə
rin toxum v
ə
vegetativ
hiss
ə
l
ə
rind
ə
zülalların miqdarının tə
yini
Zülalların miqdarı müxtəlif bitkilərdə güclü surətdə dəyişir.
Bu, növ və sortun genotip xüsusiyyətlərindən və onların becəril-
mə şəraitindən asılıdır. Bundan başqa, zülallar bitki toxumlarında
qeyri-bərabər paylanır. Zülal maddələri yaşlı gövdə və köklərdə
az, yarpaq və toxumda isə xeyli miqdardadır. Paxlalı bitkilərin,
məsələn soyanın toxumunda zülalların miqdarı 50%-ə çata bilir.
Bitki toxumalarından zülalların ekstraksiyası toxumaların suda,
duz məhlullarında, turşu, qələvi və bufer məhlullarında parçalan-
masında onların həll olma xüsusiyyətinə əsaslanır. Bufer məhlul-
lar zülalların ayrılması üçün yumşaq şərait təmin edir və bu halda
onların molekulları təbii strukturunu saxlamış olur. Zülal maddə-
lərinin çox hissəsini (zülal preparatı) ayırmaq üçün pH 8 olan
bufer məhlulundan istifadə olunur.
Bitki toxumlarında zülalların miqdarını təyin etmək üçün bir
neçə üsul mövcuddur.
İşin məqsədi – müxtəlif dənlilər, dənli-paxlalıların toxumun-
da, həmçinin bitkilərin vegetativ kütləsində zülalların miqdarının
təyin edilməsidir.
Reaktiv və materiallara destillə edilmiş su, fosfat buferi (pH 8),
Na
2
HPO
4
·2H
2
O, natrium bisulfid, etil spirti, üç xlorsirkə turşusu
(ÜSX), NaOH, Na
2
CO
3
, CuSO
4
·5H
2
O, K yaxud Na - şərab turşu-
su, Folin reaktivi, albumin yaxud kazein, farfor kasa və həvəng-
dəstə, kvars qumu, Bunzen kolbası, rofator, 100 ml tutumlu ko-
nusvari kolba, ölçülü silindrlər, sınaq şüşələri, dondurucu kamera,
sentrifuqa aiddir.
İşin gedişi. 1. Dənli və dənli-paxlalı bitkilərin toxumundan
cəmi zülalların ayrılması 1q xam cücərmiş toxum (buğda, arpa,
lobya, noxud, mərcimək, soya) çəkilərək farfor həvəngə keçirilir.
Az miqdarda kvars qumu əlavə olunaraq, 40 ml fosfat buferinin
(pH8), 0,2% natrium bisulfit və bir neçə damla etil spirtinin
iştirakı ilə möhkəm əzilir. Quru toxumdan istifadə olunduqda
əvvəlcədən onları un vəziyyətinə qədər üyüdür və sonra fosfat
Dostları ilə paylaş: |