245
3.6.7. Karbohidratların ayrılması
Nazik təbəqəli xromatoqrafiya
üsulu məhsulda şəkərlərin
miqdarı çox kiçik olduqda belə onları kifayət qədər tez ayır-
mağa və təyin etməyə imkan verir, ayrılmış ləkələr isə intensiv
rəngə və dəqiq konturlanmış sərhədlərə malik olur. Karbo-
hidratların sellüloza və silikahel təbəqələrində ayrılması
üsulları məlumdur.
Bitki mənşəli məhsullardan şəkərlərin (saxaroza, qlükoza,
fruktoza, rafinoza) kifayət qədər qənaətbəxş ayrılması bufer
kimi 0,03 molyar natrium asetat məhlulu və aşağıdakı 14-cü
cədvəldə göstərilən iki həlledicilər sistemindən istifadə etməklə
KSK markalı silikaheldə həyata keçirilmişdir.
Lövhəciklərin hazırlanma şərtləri aşağıda göstərildiyi
kimidir: üyüdülmüş 3,0 q silikaheli və 0,05
mm diametrli
tordan ələnmiş 0,25 q tibbi gibs kiçik çini həvəngdəstəyə yer-
ləşdirir, üzərinə 12,5 – 13,0 ml su, 0,025 – 0,03 ml molyar
natrium-asetat məhlulu əlavə edir, kütlələri dəstəciklə tez və
yaxşıca qarışdırır və (20x16 sm)
ölçülü lövhəciklərin üzərinə
bütün səthi boyunca bərabər qalınlıqda paylamaqla boşaldılır.
Tam qurumaya nail olmaq üçün lövhəcikləri otaq tempera-
turunda təqribən 12 saat saxlanılır ki, bundan sonra da onlar
analiz aparmaq üçün hazır sayılır.
Şəkərləri ayırmaq üçün pilləli yüksələn xromatoq-
rafiyadan istifadə edir. Birinci həlledicilər sistemində (cədvəl
14) şəkərləri tri-, di- və monoşəkərlərə ayırmaq mümkün olur.
Həlledicilər cəbhəsi yüksəldikdən sonra start xəttindən 9 sm
məsafədə, lövhəciyi 50
0
C istilikdə quruducu şkafda və ya hava
üfürücüsü
ilə qurudulur, monoşəkəri – qlükoza və fruktozanı
ayıran ikinci həlledicilər sisteminə keçirilir. Həlledicilər
sistemi cəbhəsi 15 sm-dən az olmamalıdır. Sonra lövhəciyi 20
– 30 dəqiqə ərzində quruducu sobada (şkafda) 120
0
C
temperatur həddində qurudulur. Qaynar lövhəciyi qatı sulfat
turşusunda həll edilmiş α-naftol ilə çilənir (100 mq α-naftol və
246
15 ml qatı H
2
SO
4
). Şəkərlər tünd göy rəngli ləkələr şəklində
aşkar olunur.
Ayrılmış şəkərlər lövhəcik üzərində aşağıda qeyd olunan
ardıcıllıqla düzülərək yerləşir: rafinoza, melibioza, maltoza,
saxaroza, qlükoza, fruktoza, ksiloza.
Cədvəl 14
Aminturşuları və karbohidratlar
üçün sorbent və həlledici sistemləri
Ayrılan maddə Sorbent Həlledici sistemləri Həcm
nisbəti
Aminturşuları
Sellüloza N - butanol - aseton -
ammonyak - su (I) . . .
İzopropanol - qarışqa
turşusu -su (II) . . . . .
İzopropanol - qarışqa
turşusu - su . . . . . . . . .
20:20:10:4
20:1:5
20:1:5
Silikahel
96%-li etanol - su . .
n - butanol - sirkə
turşusu - su . . . . . . . . .
Fenol - su . . . . . . . . . .
70:30
60:20:20
75:25
Karbohidratlar Sellüloza İkinci
butanol - etilasetat
– su . . . . . . .
n - butanol - piridin - su .
. . . . . . . . . . . . . . .
n - butanol - 25%-li
ammonyak - su . . . .
8:12:3
10:3:3
16:1:2
Silikahel
İzopropanol - etilasetat -
su (I) . . . . .
n - propanol - etilasetat -
su (II) . . . .
45:65:20
40:60:5
Şəkərlərin effektli ayrılması gibs və su ilə qarışdırılmış,
13x18 sm ölçülü şüşə lövhəcik üzərinə 0,1 – 0,2 mm qalınlıqda
çəkilən bərkidilmiş kağız sellülozası üzərində baş verir (məcnu
çəkildikdən sonra lövhəciyi 5 – 15 saat ərzində açıq havada və
40 dəq. ərzində 104-106
0
C temperaturda qurudulur). Şəkərlər
247
qarışığının daha dəqiq ayrılması, adətən yüksələn axında 20-
22
0
C-də 5 – 10 saat ərzində baş verir.
3.6.8. Aminturşuların ayrılması
Aminturşuların ayrılmasını nazik sellüloza və ya silikahel
təbəqəsində müxtəlif həlledicilər sistemindən (cədvəl 12)
istifadə etməklə, həm birpilləli və həm də iki pilləli xromatoq-
rafiya üsulu ilə həyata keçirmək olar.
Sellüloza təbəqəsində iki istiqamətdə ayırmaq
üçün əv-
vəlcə n - butanol - aseton - ammonyak - su (20:20:10:4) qarı-
şığından istifadə edir, hava üfürücüsündən verilən qaynar hava
ilə 2 saat ərzində qurudulduqdan sonra isə turş həlledicidə
digər istiqamətdə: izopropanol – qarışqa turşusu – su (20:1:5)
qarışığı ilə ayırma həyata keçirilir. Xromatoqramı qurudur və
dərhal asetonda 0,4%-li ninhidrin məhlulu ilə çiləməklə
aşkarlanır.
Bitki mənşəli qida məhsullarında sərbəst aminturşuları
ayırmaq üçün, adətən bir pilləli
xromatoqrafiya üsulunundan
istifadə edilir.
3.7. Kolonkalı xromatoqrafiya
3.7.1. Kolonkalı xromatoqrafiya
haqqında ümumi məlumat
Maddələrin xromatoqrafik ayrılması həyata keçirilən
kolonka silindrik formalı və ya xüsusi konstruksiyaya malik ola
bilər ki, bu da adətən şüşədən, təsadüfi
hallarda isə paslanma-
yan poladdan və alüminiumdan hazırlanır. Kolonkanın hündür-
lüyü bir neçə santimetrdən 5 – 20 metrədək, diametri bir neçə
millimetrdən 5 – 15 santimetrədək olur. Kolonkaların xroma-
toqrafiyada tətbiq olunan bütün forma müxtəlifliyində tam
qənaətbəxş ayırmanı, sonunda titrləmə üçün
büret tipli malik
ştativə bərkidilmiş şüşə borudan ibarət olan ən sadə kolon-
kalardan istifadə edildikdə əldə etmək olar.